腹腔镜微创术对慢性胆囊炎胆石症患者免疫功能影响分析

目的通过分析白细胞介素2(IL-2)、白细胞介素6(IL-6)、自然杀伤细胞(NK)及补体C3等指标水平来评价腹腔镜微创术对慢性胆囊炎胆石症患者免疫功能的影响,为临床慢性胆囊炎胆石症患者手术方式选择提供理论指导。方法选择2013年6月—2014年3月住院治疗的120例慢性胆囊炎胆石症患者为研究对象,将患者随机分成腹腔镜胆囊切除术(LC)组(60例)及开腹胆囊切除术(OC)组(60例),收集2组患者一般临床资料并检测手术前后IL-2、IL-6、NK细胞活性及补体C3水平,分析2组患者手术前后机体免疫功能变化。结果 LC组患者手术前后IL-2、IL-6、NK细胞活性及补体C3水平分别为(8.09±0.114 vs.7.89±0.25)、(54.87±16.02 vs.56.93±12.61)、(55.12±7.16 vs 53.99±8.11)、(1.39±0.25 vs.1.33±0.15),各指标手术前后水平差异均无统计学意义(P>0.05)。OC组患者手术前后IL-2、NK细胞活性及C3水平分别为(8.02±0.14 vs.5.12±0.78)、(55.62±7.76 vs.45.99±8.11)、(1.45±0.23 vs.1.02±0.15),差异具有统计学意义(P<0.01)。IL-6手术前后水平为(55.41±15.12 vs.68.93±13.61),差异具有统计学意义(P<0.01)。结论腹腔镜胆囊切除术(LC)较传统的开腹胆囊切除术(OC)对患者免疫系统的干扰损害较小,值得进一步推广。     

迭代重建算法前瞻性心电门控大螺距肺动脉双源CT成像的图像质量

目的与滤波反投影(FBP)算法比较,探讨基于原始数据的迭代重建(SAFIRE)算法大螺距肺动脉双源CT(DSCT)成像的图像质量。方法对临床怀疑肺栓塞的69例患者行前瞻性心电门控大螺距肺动脉CT扫描,分别采用SAFIRE和FBP算法进行图像重建,比较两种重建算法的肺动脉CT图像质量、噪声、SNR和CNR。结果 SAFIRE算法图像的肺动脉CT图像质量显著优于FBP算法[图像质量评分分别为(1.28±0.36)分和(1.99±0.56)分,P<0.001];SAFIRE算法的噪声显著低于FBP算法[分别为(14.60±2.11)HU和(18.52±2.65)HU,P<0.001];SAFIRE算法的SNR和CNR显著高于FBP算法(SNR分别为26.57±4.99和20.23±3.94,P<0.001;CNR分别为23.41±4.58和17.77±3.62,P<0.001)。结论前瞻性心电门控大螺距肺动脉DSCT成像时,与FBP算法相比,SAFIRE算法的肺动脉CT图像噪声更低,图像质量更高,显示肺动脉细小分支更佳。     

腹腔镜手术治疗伴有 Calot 三角冰冻样粘连的急性坏疽性胆囊炎40例观察

目的：探讨伴有 Calot 三角冰冻样粘连的急性坏疽性胆囊炎行腹腔镜胆囊切除术的临床效果。方法沈阳军区总医院肝胆外科2008年8月—2013年8月治疗伴有 Calot 三角冰冻样粘连的急性坏疽性胆囊炎77例,依据手术方式分为观察组40例和对照组37例。观察组经腹腔镜实施胆囊切除术,对照组给予开腹手术。观察两组手术时间、术中出血量、引流量、下床活动时间、胃肠功能恢复时间及住院天数,比较两组并发症发生率。结果观察组手术时间、下床活动时间、胃肠功能恢复时间、住院天数均短于对照组,术中出血量和术后引流量均少于对照组(P <0．05)。两组并发症发生率比较差异无统计学意义(P >0．05)。结论腹腔镜手术治疗伴有 Calot 三角冰冻样粘连的急性坏疽性胆囊炎损伤小,术后恢复快,但术式还应依据患者具体情况选择。     

各种手术治疗股骨转子间骨折疗效分析

目的讨论股骨转子间骨折不同手术治疗的临床疗效。方法应用动力髋螺钉（DHS）、股骨近端髓内钉（PFN）多枚空心螺钉加压内固定、多枚空心螺钉对153例不同类型股骨转子间骨折的治疗。结果随访146例，随访时间3个月～5年，优良率为91％。结论治疗骨质疏松的老年患者PFN优于多枚空心螺钉及DHS。     

胆总管梗阻性病变135例的超声诊断

对135例胆总管梗阻手术病理结果与超声诊断结果对照分析如下。     

PCR产物靶向克隆法构建pET15b-CAT及His-tag-CAT融合蛋白的表达与纯化

目的:将人过氧化氢酶(Catalase,CAT)cDNA的PCR扩增产物定向克隆到pET15b载体上以构建重组质粒pET15b-CAT,并表达和纯化出His-tag-CAT融合蛋白。方法:扩增目的基因的PCR引物的5′端加上与线性化载体同源的碱基序列,以使PCR的扩增产物两端分别带上15个和线性化载体两端同源的碱基序列。以pZeoSV2(+)-CAT为模板进行靶向克隆所需的人CAT cDNA扩增。将纯化的人CAT cDNAPCR产物与经XhoⅠ和BamH Ⅰ酶切的线性化载体pET15b以6∶1摩尔数之比混合于含重组酶的反应液中,25℃反应30min,将PCR产物定向克隆于目标载体pET15b上,获得重组质粒pET15b-CAT。重组质粒经PCR,XhoⅠ酶切和DNA测序鉴定。pET15b-CAT转化BL21(DE3)宿主菌,用IPTG诱导表达出His-tag-CAT融合蛋白,采用Ni2+-NTA树脂进行亲和层析。结果:人CAT cDNA的PCR扩增产物与经XhoⅠ和BamHⅠ酶切的线性化载体pET15b发生了同源重组反应,经鉴定采用PCR产物靶向克隆法成功构建了pET15b-CAT。SDS-PAGE和Western blot结果表明,转化了pET15b-CAT的宿主菌表达出了His-tag-CAT融和蛋白,经Ni2+-NTA树脂亲和层析得到了纯化的His-tag-CAT,并在体外检测到其具有特异的过氧化氢酶的活性,活性值为80.23U/g。结论:采用PCR产物靶向克隆法成功地构建了pET15b-CAT,并表达和纯化出了His-tag-CAT融和蛋白,为采用外源性CAT防治与氧化应激损伤相关性疾病奠定了基础。     

体外药物敏感实验在乳腺癌个体化化疗中的应用

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,且发病率呈逐年上升趋势。化疗是乳腺癌综合治疗的重要组成部分,目前人们选择化疗方案通常是根据临床研究     

PEP-1-SOD1融合蛋白转导入大鼠心肌组织的能力及其酶活性

目的:研究PEP-1-SOD1融合蛋白转导进人大鼠心肌组织的能力,并测定转导的目的蛋白酶活性.方法:实验分为SOD1组和PEP-1-SOD1组,分别经大鼠尾静脉注射500 μg纯化后的SOD1及500μg纯化后的PEP-1-SOD1融合蛋白入大鼠体内,于注射后0.5,1,2,4,8,24 h时间点取心脏(n=6,每组,每个时间点),经40 g/L多聚甲醛溶液固定6 h后行冰冻切片,通过免疫组织化学方法检测PEP-1-SOD1进入大鼠心肌组织的能力和分布情况.黄嘌呤氧化酶法测定心肌组织SOD1活性.结果:PEP-1-SOD1组注射后0.5 h时,大鼠心肌组织中即出现均一的明亮红色荧光信号,分布于细胞浆及细胞核,具有时间依赖性的特点,荧光强度最强点为1 h时间点,而SOD1组未见到红色荧光信号.于注射后0.5 h时SOD1活性开始升高PEP-1-SOD1组为(85.37±1.67),SOD1组为(52.23±0.67),两组相比较,差异具有统计学意义(P<0.01);注射后1 h时SODl活性可达高峰,PEP-1-SOD1组为(119.16±1.37),SOD1组为(53.47±1.02),两组相比较,差异具有统计学意义(P<0.01),2～24 h逐步下降;SOD1组各时间点间相比较差异无统计学意义(P>0.05).结论:PEP-1-SOD1融合蛋白能以天然活性形式迅速高效的转导人大鼠心肌组织,并保持酶活性达24 h.     

PCR产物靶向克隆法构建原核表达载体pET15b-CAT

目的:将人过氧化氢酶(Catalase,CAT)cDNA的PCR扩增产物定向克隆到pET15b载体上以构建重组质粒pET15b-CAT.方法:扩增目的基因的PCR引物的5′端加上与线性化载体同源的碱基序列,以使PCR的扩增产物两端分别带上15个和线性化载体两端同源的碱基序列.以pZeoSV2( )-CAT为模板进行靶向克隆所需的人CAT cDNA扩增.将纯化的人CAT cDNA PCR产物与经XhoⅠ和BamHⅠ酶切的线性化载体pET15b以6:1摩尔数之比混合于含重组酶的反应液中,25℃反应30 min,将PCR产物定向克隆于目标载体pET15b上,获得重组质粒pET15b-CAT.重组质粒经PCR,XhoⅠ酶切和DNA测序鉴定.结果:人CAT cDNA的PCR扩增产物与经Xho Ⅰ和BamHⅠ酶切的线性化载体pET15b发生了同源重组反应,经鉴定采用PCR产物靶向克隆法成功构建了pET15b-CAT.结论:PCR产物靶向克隆法是一种简便、高效地将PCR产物定向克隆于目标载体的方法,而无需对PCR产物进行酶切、末端抹平、载体去磷酸化及连接反应,适用于任何载体、任何插入片段和任意酶切位点.     

丹参酮Ⅱ A联合顺铂对Hela细胞生长及p53蛋白表达水平的影响

目的:研究丹参酮Ⅱ A联合顺铂在体外对宫颈癌Hela细胞生长的影响及细胞中p53蛋白表达水平的变化。方法:采用MTT法测定丹参酮Ⅱ A联合顺铂对Hela细胞增殖的影响;HE染色法观察细胞的形态学变化;流式细胞仪检测药物作用后的细胞凋亡情况;Western Blot测定p53蛋白水平的表达。结果:丹参酮ⅡA联合顺铂用药组比同等剂量的两药单用组及对照组对Hela细胞的增殖抑制率高(P<0.05);对照组细胞未见凋亡,而两药单用组及联合组均可见细胞凋亡;药物处理组均可检测到细胞亚G1峰,两药联合组细胞亚G1峰与单药组差异显著;在只含溶媒组、丹参酮Ⅱ A组、顺铂组及丹参酮Ⅱ A联合顺铂组中p53蛋白水平表达逐步升高。结论:丹参酮Ⅱ A联合顺铂比两药单用能显著抑制Hela细胞的生长;二者通过增加p53蛋白的表达,促进细胞凋亡。