串联质谱技术在脂肪酸氧化代谢病诊断中的应用研究

目的探讨利用串联质谱技术检测干血滤纸片中酰基肉碱水平,诊断脂肪酸氧化代谢病。方法对象为2941例临床遗传性代谢病高危儿童,利用串联质谱技术检测患儿干血滤纸片中酰基肉碱水平,结合临床资料和常规生化结果,进行脂肪酸氧化代谢病诊断。结果诊断了14例脂肪酸氧化代谢病(0.5%),其中肉碱棕榈酰转移酶Ⅰ缺乏症1例,肉碱棕榈酰转移酶Ⅱ缺乏症1例,短链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症1例,中链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症7例,极长链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症2例,多种酰基辅酶A脱氢酶缺乏症2例。结论通过串联质谱技术检测干血滤纸片中酰基肉碱水平,可对部分脂肪酸氧化代谢病进行诊断。     

串联质谱分析干血滤纸片中酰基肉碱质控

目的：串联质谱技术是近几年应用于临床检验的新技术，具有特异性强、灵敏度高，一次试验可检测数十种物质的优点。本文通过对近4年的质控结果进行分析，探讨影响检测结果的因素及应对措施。方法：美国CDC每年提供4批酰基肉碱质控干血滤纸片，酰基肉碱检测方法为取直径为3mm的质控干血滤纸片放入96孔聚丙烯板，经含酰基肉碱内标的甲醇萃取，盐酸正丁醇衍生后，进行串联质谱检测。分析本实验室质控结果与美国CDC检测结果的偏差及其他实验室质控结果（169个实验室的均值）与美国CDC检测结果的偏差之间的差异。结果：本实验室每次质控结果所有酰基肉碱均在美国CDC检测结果95％可信区间内，且每一批结果的临床评价与美国CDC质控临床评价完全一致。本实验室质控结果与美国CDC检测结果的偏差与其他实验室质控结果与美国CDC检测结果的偏差比较，无显著差异，丙酰基肉碱差异显著（Z=-2．638，P〈0．005），戊二酰基肉碱差异亦显著（Z=-2．482，P〈0．005）。结论：本实验室酰基肉碱质控结果，达到美国CDC的质控要求，丙酰基肉碱检测值偏高，其阳性判断切割值设定也相应增高，而戊二酰基肉碱检测值偏低，其阳性判断切割值设定也相应降低。     

52例急性主动脉夹层术前监护体会

目的总结急性主动脉夹层入院后监护治疗经验,以提高早期监护质量,为患者顺利接受手术治疗提供必要条件。方法患者入院后采取紧急措施包括：①有效镇痛、充分镇静;②控制血压和心率,延缓夹层进一步发展;③严格控制活动量;④严密观察生命体征,正确进行病情判断和处理;⑤实施健康教育。结果本组患者入院后配合治疗,心率、血压控制良好。1例在术前麻醉过程中因夹层破裂死亡,其余51例均顺利接受手术治疗。术后痊愈出院47例,死亡5例（8%）,死亡患者均为急性A型夹层,死亡原因分别为夹层破裂、心衰、急性肾功能衰竭和吻合口出血。结论个体化止痛、镇静治疗;密切观察并及时、有效的控制血压、心率等生命体征变化;及时处理相关并发症,可使患者平稳渡过早期危险期,平稳接受手术治疗。     

ICU护士对心脏手术患者及家属实施术前宣教的效果观察

目的:探讨ICU护士对心脏手术患者及家属实施术前宣教的效果。方法:将2012年6~12月在我科二病区行心脏手术的100例患者分为对照组,给予常规术前宣教;将同期在我科三病区行心脏手术的100例患者分为研究组,在常规术前宣教的基础上由ICU护士给予系统术前宣教。比较两组治疗依从性、角色行为、治疗效果、对护理工作满意度等。结果:两组依从性、角色行为、治疗效果及满意度等方面比较差异均有统计学意义(P0.05)。结论:由ICU护士进行系统术前宣教能有效促进心脏术后患者康复,提高患者及家属依从性、对护士工作的满意度,有利于充分体现护士自身价值,提高ICU病区管理质量。     

红细胞二氢蝶啶还原酶活性测定方法的建立和应用

目的建立红细胞二氢蝶啶还原酶(DHPR)活性测定方法,对高苯丙氨酸血症(HPA)者进行DHPR缺乏型四氢生物蝶呤(BH4)缺乏症筛查。方法采用UV-2450型双光束分光光度仪、1 mmol/L细胞色素C及20 mmol/L 6-甲基四氢蝶呤等试剂测定外周干滤纸血片中DHPR活性。结果DHPR活性与年龄无关,该实验室儿童DHPR活性参考值为(2.2±0.7)nmol/(m in.5 mmd isc)[(1.02~3.35)nmol/(m in.5 mmd isc)];实验批内变异系数(CV)为9.1%,批间CV为11.5%,实验最好在37℃恒温下进行;30例HPA患儿DHPR活性测定结果为(2.4±0.8)nmol/(m in.5 mmd isc),未发现DHPR缺乏者。结论干滤纸血片中红细胞DHPR活性测定是DHPR缺乏症有效、可靠且易行的诊断方法。     

串联质谱检测干血滤纸片氨基酸方法的建立

目的　建立可靠的串联质谱技术检测干血滤纸片中氨基酸方法,以便用于氨基酸代谢紊乱疾病的筛查和诊断。方法　取含不同浓度氨基酸(苯丙氨酸、酪氨酸、亮氨酸、蛋氨酸、瓜氨酸和缬氨酸)的血滤纸片,用含已知量相应氨基酸内标的甲醇萃取,盐酸正丁醇衍生后,用串联质谱仪检测血片中氨基酸谱及其浓度。分析该方法的精确性、样品回收率及浓度相关性。结果　氨基酸批内和批间变异系数分别为6. 3% ~9. 7%、9. 9% ~14. 3%。低浓度回收率为92% ~100%,中等浓度回收率为94% ~104%,高浓度回收率为98% ~107%。不同浓度的氨基酸实测浓度与加入浓度之间的相关系数为0. 999 0~0. 999 9。结论　串联质谱技术检测干血滤纸片中氨基酸能够达到较高的精确性、准确性和回收率,为临床进行氨基酸分析提供了一项新技术,可用于新生儿遗传代谢病筛查、高危儿童遗传代谢病的诊断及其他与氨基酸代谢有关的疾病诊治。     

非体外循环冠状动脉旁路移植术后监护期间临床路径表的研制

研制非体外循环冠状动脉旁路移植术(Off-pump Coronary Artery Bypass Grafting,OPCAB)后监护期间临床路径表。通过调查医嘱历史数据、临床实际和临床专家,确定OPCAB术后监护期间的诊疗护理项目,同时确定术后诊疗过程的主要环节,并采用项目时间管理法制定标准入住ICU时间,并依此设计OPCAB病人术后早期ICU监护期间的3天临床路径。     

12例多种羧化酶缺乏症的基因突变分析

目的 旨在从基因水平证实多种羧化酶缺乏症(multiple carboxylase deficiency,MCD)的诊断,探讨我国MCD患儿的基因突变情况.方法 12例MCD患儿接受基因诊断.采用PCR及直接测序法分别对4例生物素酶(biotinidase,BT)缺乏症和8例全羧化酶合成酶(holocarboxylase synthetas,HLCS)缺乏症进行BT基因和HLCS基因突变分析,对基因新突变通过限制性片段长度多态性分析及患儿父母和50名正常对照者基因检测以证实.结果 12例患儿基因突变检出率100%.4例BT缺乏症中发现BT基因突变6种:c.98-104del7ins3,c.1369G>A(V457M),c.1157G>A(W386X),c.1284C>A(Y428X),c.1384delA,c.1493_1494insT,后4种为新突变.8例HLCS缺乏症中发现HLCS基因突变4种:c.126G>T(E42D),c.1994G>C(R665P),c.1088T>A(V363D),c.1522C>T(R508W),后两种为热点突变[75%(12/16)],c.1994G>C为新突变.结论 本研究从基因水平上证实了12例MCD的诊断.共发现了6种BT基因突变,4种HLCS基因突变,其中5种为新突变;得出2种HLCS基因的热点突变.