“固本解毒祛瘀”方药联合化疗治疗晚期非小细胞肺癌疗效观察

[目的]观察"固本解毒祛瘀"方药联合化疗治疗非小细胞肺癌(NSCLC)患者疗效观察。[方法]将80例非小细胞肺癌患者随机分为两组,对照组40例采用单纯化疗加对症治疗,治疗组40例在对照组基础上加用"固本解毒祛瘀"方药治疗,比较两组外周血常规、血T淋巴细胞亚群及卡氏(KPS)评分。[结果]与治疗前相比较,治疗组与对照组血WBC、HGB和PLT均减低(P0.05),而对照组减低更明显(P0.05);与治疗前比较,治疗组在CD3~+、CD4~+、CD4~+/CD8~+较治疗前明显上升,有显著差异(P0.01),而对照组治疗后CD3~+水平下降,与治疗前比较,有显著性差异(P0.05);KPS评分治疗组治疗前后组内比较,差异有统计学意义(P0.05)。[结论]"固本解毒祛瘀"方药可以减轻晚期NSCLC化疗患者骨髓抑制,增强免疫功能及改善生存质量。     

基于真实世界的银杏酮酯滴丸用药安全性研究

目的 研究真实世界银杏酮酯滴丸用药的安全性,为银杏酮酯滴丸临床大规模推广应用提供依据。方法 采用前瞻性、非干预、多中心、开放性、大样本真实世界研究的方法,收集银杏酮酯滴丸适用人群药物不良事件（adverse event,AE）和药物不良反应（adverse drug reaction,ADR）发生情况及相关因素、发生与转归特点。结果 纳入天津中医药大学第二附属医院等29家机构的1084患者。其中99例患者发生139例次AE,发生率为9.1%,发生率最高的AE为感染及侵染类疾病（3.3%）;相关因素分析发现女性、60～70岁患者、冠心病心绞痛（血瘀证）、社区医院、合并代谢及营养类疾病的患者银杏酮酯滴丸AE发生率较高。共有7例患者发生11例次ADR,总发生率为1.0%,胃肠系统疾病为ADR发生率最高,女性、70岁以上患者、冠心病心绞痛（血瘀证）、社区医院和合并高血压的患者银杏酮酯滴丸ADR发生率最高。针对AE采取相对措施,其中保持剂量不变131例次,导致降低剂量的AE 2例次、暂停用药的AE 3例次、永久停药的AE 3例次;105例次AE转归为已恢复且不伴后遗症,22例次AE未恢复,未知的...     

中东呼吸综合征研究进展

中东呼吸综合征由中东呼吸综合征冠状病毒感染所致,可导致感染者并发急性呼吸窘迫综合征,严重者可发展为肾衰竭而死亡。该病自2012年WHO首次报告以来,在沙特阿拉伯等20多个国家时有发生,对全球公共卫生构成重大威胁。本文对中东呼吸综合征研究进展进行综述,以期对该病的发生和流行及早预防和控制。     

RP-HPLC法测定哈蟆油中胆固醇棕榈酸酯含量

目的运用RP-HPLC法测定哈蟆油中胆固醇棕榈酸酯的含量。方法使用Agilent zorbax-C18色谱柱（4.6 mm×150 mm,5μm）;流动相∶甲醇-水（79∶21）;柱温：30℃;体积流速：1.5 mL/min;检测波长：210nm;进样量均为10μL。结果哈蟆油中胆固醇棕榈酸酯进样量在0.188 4~0.502 4μg范围内呈良好的线性关系,平均回收率为100.61%,RSD值为1.01%,且重复性、精密度、稳定性均良好。结论此方法可以通过RP-HPLC法快速、稳定、精密的测定哈蟆油中胆固醇棕榈酸酯的含量,减少以往利用正相色谱的不便。     

裂谷热病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立

目的建立一种快速、敏感、特异的RealtimePCR（实时荧光定量PCR）方法,用于裂谷热病毒（RVFV）的检测。方法根据裂符热病毒N蛋白基因的保守序列设计并合成一对引物及特异性TaqMan探针。通过条件优化,以10倍系列稀释重组质粒为标准品,进行Real-timePCR扩增,绘制标准曲线,并进行重复性、准确性、特异性及敏感性检测。结果建立的Real-timePCR方法检测裂谷热病毒所绘制标准曲线的相关系数大于0．99,灵敏度为1．0×10^1拷贝,高于常规PCR方法（1．0×10^3拷贝）;除裂谷热病毒外的其他7种对照烈性病病原体基因检测均呈阴性;批内重复和批问重复的变异系数均小于1％。结论建立的裂谷热病毒Real-timePCR检测方法敏感性和特异性较高,可用于裂谷执病毒感染懊涑诊眯斤殛流行病学谰杏．     

MERS-CoV S1蛋白的表达及鉴定

目的真核表达具有天然构象的中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)S1蛋白,并进行免疫反应性鉴定。方法以pcDNA3.1-S重组质粒为模板,PCR扩增S1基因,连接至pFastBac1质粒,构建重组质粒pFB1-S1。将pFB1-S1转化至DH10Bac感受态中,构建重组杆粒BpFB1-S1,然后转染sf9细胞获得重组杆状病毒rpFB1-S1并连续传代。将第四代rpFB1-S1接种sf9细胞后悬浮培养96h,取上清,用PEG8000浓缩并进行免疫亲和层析纯化,采用SDS-PAGE和Western blot鉴定其分子质量及免疫反应性;另取感染rpFB1-S1 48h的sf9细胞进行IFA鉴定。结果 S1基因PCR扩增产物大小为2 212bp,与预期相符。重组质粒pFB1-S1经酶切和测序分析鉴定构建正确。重组杆粒BpFB1-S1经PCR鉴定构建正确。IFA试验可见感染rpFB1-S1的sf9细胞出现特异性绿色荧光,即有目的蛋白表达。SDSPAGE显示纯化的重组S1为单一100×103(Mr)蛋白条带,Western blot检测该蛋白能被鼠抗S-RBD蛋白单克隆抗体识别。结论成功表达了具有免疫反应性的MERS-CoV S1蛋白,为MERS-CoV快速诊断方法的建立及候选疫苗的构建奠定了基础。     

苏丹型埃博拉病毒糖蛋白原核表达及抗体间接ELISA检测方法的建立

目的原核表达苏丹型埃博拉病毒(Sudan virus,SUDV)糖蛋白(GP),并作为包被抗原建立抗体间接ELISA检测方法。方法 PCR扩增SUDV GP基因片段,克隆至pET30a(+)表达载体,IPTG诱导表达SUDV GP,经HisNi柱纯化,SDS-PADE和Western blot鉴定正确的SUDV GP作为包被抗原建立SUDV抗体间接ELISA方法,并对实验条件进行优化。结果SUDV GP在大肠杆菌中以包涵体的形式表达,建立的抗体间接ELISA检测方法最佳SUDV GP包被量为2μg/孔,待检血清最佳稀释度为1∶320,最佳作用时间1.5h,HRP标记羊抗鼠IgG最佳稀释度1∶10 000,TMB最佳显色时间为7min。该方法的特异性强,样品检测结果与已知血清的符合率为100%,检测SUDV阳性血清的敏感度为1∶40 960,SUDV GP批间及批内的实验结果变异系数(CV)均小于10%。结论成功表达SUDV GP并建立SUDV抗体间接ELISA检测方法,为疫苗免疫效果的评价、疫病的监测及SUDV抗体检测试剂盒的研发奠定了基础。     

中东呼吸综合征冠状病毒量子点免疫层析试纸的制备

目的制备一种能快速检测中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)的量子点免疫层析试纸,以期用于MERSCoV感染检测。方法采用EDC偶联法将羧基化CdTe/ZnSe量子点与抗MERS-CoV RBD的单克隆抗体(mAb/MERS-CoV)共价偶联,通过斑点免疫印迹检验偶联物的活性。以CdTe/ZnSe量子点标记的mAb/MERS-CoV作为荧光标记物,采用免疫层析技术制备量子点免疫层析试纸,用于MERS-CoV检测。并对该方法进行特异性、敏感性评价。结果 CdTe/ZnSe量子点可偶联mAb/MERS-CoV,且偶联物具有良好的生物活性。以其作为荧光标记物建立的量子点免疫层析试纸可特异性检测MERS-CoV假病毒,最低检测限为2×53 TCID50/ml,其他对照病毒检测均阴性。结论制备的MERS-CoV量子点免疫层析试纸具有简便、快速、特异等优点,可用于MERS-CoV感染快速诊断和流行病学调查。     

肺癌筛查的卫生经济学评价研究

目的:对肺癌筛查进行成本一效果分析,评价肺癌筛查的经济性。方法:构建肺癌筛查决策树模型,对肺癌筛查及不筛查两种策略进行投入产出分析,评价两种策略的成本与健康产出,并进行增量成本一效果分析,判断肺癌筛查策略的经济性。结果:肺癌筛查策略与不筛查策略相比,每多获得1个寿命年的成本为93 153元。结论:根据WHO推荐阈值,在人群中实施肺癌筛查是具有成本一效果的,应在人群中积极推广肺癌筛查。     

中东呼吸综合征冠状病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立

目的建立一种快速、敏感、特异的实时荧光定量PCR(Real-time PCR)方法,用于中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)的检测。方法根据中东呼吸综合征冠状病毒S蛋白基因的保守序列设计并合成一对引物及一条特异性TaqMan探针。通过条件优化,以10倍系列稀释重组质粒为标准品,进行Real-time PCR扩增,绘制标准曲线,并进行重复性、准确性、特异性及敏感性检测。结果建立的Real-time PCR方法检测中东呼吸综合征冠状病毒所绘制标准曲线的相关系数0.99,灵敏度为1.00×101拷贝,高于常规PCR方法(1.00×102拷贝);用该方法检测中东呼吸综合征冠状病毒基因为阳性,其他6种对照呼吸道病原体及冠状病毒基因检测均呈阴性;批内、批间重复试验的变异系数均1%。结论建立的中东呼吸综合征冠状病毒Real-time PCR检测方法灵敏、特异、重复性好,可用于中东呼吸综合征冠状病毒感染的快速诊断和流行病学调查。