金荞麦MYB转录因子基因FdMYBP1的克隆及分子特征分析

目的:对金荞麦MYB转录因子基因FdMYBP1进行克隆和序列特征分析.方法:采用RACE结合cDNA文库筛选的方法,从金荞麦cDNA文库中克隆MYBP1基因(FdMYBP1);生物信息学分析,Southern杂交.结果:克隆到1个MYBP1转录因子基因(FdMYBP1),通过Southern杂交分析,推测FdMYBP1基因是1～2个拷贝基因;FdMYBP1基因编码1个长256个氨基酸的蛋白质,在N端存在1个保守结构域,属于MYB转录因子家族.结论:首次从金荞麦中克隆到转录因子基因FdMYBP1,它具有MYB同源基因的典型特征,可能在金荞麦类黄酮代谢途径中起作用.     

二陈汤加减联合西医常规治疗COPD急性加重期有效性及安全性的Meta分析

目的:系统评价二陈汤加减联合西医常规治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)急性加重期的疗效和安全性.方法:计算机检索PubMed、Embase、Cochrane Library、中国知网(CNKI)、万方数据(WANFANG DATA)、维普中文科技期刊数据库(VIP)和中国生物医学文献数据库(CBM)中关于二陈汤加减联合西医常规疗法(治疗组)对比单用西医常规疗法(对照组)治疗COPD急性加重期的临床随机对照试验(RCT),检索时间为各数据库建库至2020年8月1日,采用RevMan 5.2、STATA 12.0软件进行Meta分析.结果:共纳入15篇文献,1108例患者.Meta分析结果显示:治疗组总有效率[RR=1.23,95％CI(1.17,1.29),P＜0.00001]优于对照组,FEV1％pred[SMD=0.26,95％CI(0.03,0.49),P=0.03]、FEV1/FVC[SMD=0.97,95％CI(-0.04,1.98),P=0.06]、咳痰症状积分[SMD=-0.75,95％CI(-0.96,-0.53),P＜0.00001]、喘息症状积分[SMD=-0.70,95％CI(-1.32,-0.09),P=0.02]、不良反应发生率[RR=0.27,95％CI(0.09,0.77),P=0.01]的改善程度均优于对照组,差异具有统计学意义.2组在咳嗽症状积分改善方面比较,差异无统计学意义[SMD＝-0.63,95％CI(-1.43,0.16),P=0.12].结论:二陈汤加减联合西医常规治疗COPD急性加重期的疗效和安全性优于单用西医常规治疗,值得进一步推广.     

提取金荞麦愈伤组织总RNA的一种有效方法

目的:建立金荞麦愈伤组织总RNA提取方法.方法:采用CTAB法结合LiCl沉淀的改良方法提取RNA,紫外分光光度检测、0.8%非变性琼脂糖凝胶电泳检测,RNA的反转录等评价RNA质量.结果:提取的总RNA 28S和18S条带清晰,且A260/A280在1.9～2.0,以提取的RNA为模板反转录的cDNA长度范围较广(500bp～5 kb).结论:该方法提取出的总RNA质量能满足RT-PCR等分子生物学操作的要求,且简单、有效、经济,可用于金荞麦愈伤组织总RNA的提取.     

野生金荞麦高黄酮含量愈伤组织中一个类异黄酮还原酶（IRL）基因的克隆与分析(英文)

木脂素是重要的植物防御物质之一, 具有优良的生物学活性。为研究传统抗肿瘤良药野生金荞麦的 药用次生代谢, 用RACE与文库结合的方法, 从野生金荞麦高黄酮含量愈伤系cDNA文库中快速克隆了一个类异黄酮还原酶 (isoflavone reductase-like, IRL) 基因FcIRL的全长cDNA (accession no. EU116032)。FcIRL cDNA全长1 217 bp, 含有1个942 bp的开放阅读框 (open reading frame, ORF), 编码313个氨基酸, 其5′ UTR区含有2个终止子TAG, 3′ UTR区含有推测的加尾信号ATAAA和polyA尾, 对应基因组序列不含内含子。FcIRL蛋白N端含有1个N-乙酰化作用位点 (M₁-K₅) 和1个保守的NADPH结合位点 (G₁₀-G-T-G₁₃-Y-I-G₁₆), 具有1个保守的NmrA结构域 (V₆-N₂₄₄) 和多个重要的磷酸化位点, 以及1个保守的N-糖基化作用位点 (N₂₁₄)。序列同源性比较、系统发生分析以及蛋白质高级结构预测分析均表明, FcIRL属于松脂醇-落叶松脂醇还原酶 (pinoresinol- lariciresinol reductase, PLR) 类,推测具有PLR的生物活性, 是8−8′连接木脂素 (8−8′-linked lignans) 合成途径中的关键酶,催化松脂醇和落叶松脂醇,还原生成开环异落叶松脂 (secoisolariciresinol), 参与金荞麦药用次生代谢与植物的防御。