筋骨草提取物有效成分在beagle犬体内药代动力学研究

乙酰哈巴苷和哈巴苷是筋骨草提取物中含量最高的2种有效成分.该文建立了LC-MS/MS法,对beagle犬口服筋骨草提取物后乙酰哈巴苷和哈巴苷的药代动力学进行研究.健康雌性Beagle犬口服不同剂量的筋骨草提取物,对不同时间点的乙酰哈巴苷和哈巴苷血药浓度进行测定,采用winnonlin 6.3软件以非房室模型进行拟合.色谱条件:安捷伦ZORBAX XDB-C₁₈柱 (2.1 mm×50 mm,3.5 μm);柱温30 ℃;流动相(A为0.1%甲酸水溶液;B为乙腈)为0~2 min 5% B;2.1~5 min 95% B;5.1~10 min 5% B.流速0.3 mL·min^-1.质谱条件:电喷雾离子源;正离子模式;选择离子分别为乙酰哈巴苷(m/z 429.2→369.2)、哈巴苷(m/z 387.2→207.2)和肉桂酸(m/z 149.2→103.1).干燥气流速10 L·min^-1;干燥气温度300 ℃;毛细管电压4 000 V.结果表明Beagle犬口服筋骨草提取物后乙酰哈巴苷和哈巴苷存在剂量依赖性,乙酰哈巴苷和哈巴苷的达峰时间分别为1.7,1.57 h左右,远大于大鼠口服筋骨草提取物后的乙酰哈巴苷和哈巴苷的达峰时间,这可能是由于种属差异造成的.     

HPLC-ELSD同时测定筋骨草药材中乙酰哈巴苷和哈巴苷含量

目的建立高效液相色谱-蒸发光散射检测器法(HPLC-ELSD)同时测定筋骨草药材中乙酰哈巴苷和哈巴苷含量的方法,并对不同产地和批次的筋骨草药材进行测定。方法采用Dikma C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm);流动相A为水,B为乙腈,梯度洗脱(0~6 min,5%B;6~11 min,5%~15%B;11~17 min,15%B);洗脱流速1 mL/min;柱温30℃。蒸发光散射检测器漂移管温度103℃,以压缩空气为雾化气,气体流速1.6 L/min。结果乙酰哈巴苷在0.017~17.32μg、哈巴苷在0.003~1.62μg范围内呈良好线性关系,精密度和准确性良好。福建6个批号样品的乙酰哈巴苷和哈巴苷含量较高。结论乙酰哈巴苷和哈巴苷可作为监测筋骨草药材质量的指标性成分。     

大鼠口服不同形式茯苓三萜类成分提取物后有效成分的药代动力学分析

目的:建立UPLC-Q-TOF/MS测定大鼠口服茯苓三萜类成分提取物粉末及软胶囊内容物后土莫酸及去氢土莫酸的血浆药物浓度,研究这2个成分的体内药代动力学过程,比较二者在粉末与软胶囊内容物中的药代动力学差异。方法:血浆样品采用乙酸乙酯提取,以甘草次酸为内标物,流动相0.1%甲酸水溶液(A)-0.1%甲酸乙腈溶液(B)梯度洗脱(0~3 min,50%~70%B;3~3.5 min,70%~100%B;3.5~4.5 min,100%B),正离子模式,毛细管电压3 k V,锥孔电压40 V,离子源温度120℃,脱溶剂温度500℃,脱溶剂气流速800 L·h~(-1)。结果:软胶囊内容物中土莫酸和去氢土莫酸药峰浓度(Cmax)及药时曲线下面积(AUC0-t)均大于粉末。软胶囊内容物中土莫酸的达峰时间(Tmax)大于粉末,而去氢土莫酸的Tmax则小于粉末,结论:植物油的加入促进了土莫酸和去氢土莫酸的吸收,推测由于土莫酸和去氢土莫酸的化学结构不同,剂型变化后会引起吸收速率的改变。     

HPLC/MS考察大鼠和肝微粒体CYP450活性及硝苯地平代谢研究

 目的建立以硝苯地平为探针药物测定大鼠和犬肝微粒体活性的HPLC/MS。方法采用SHIMADZU VP-ODS(2.0mm×150mm,5μm)色谱柱;柱温为室温;以甲醇-水(55∶45)为流动相,流速:0.2mL·min^-1。选择正离子扫描(SIM)m/z 345。以硝苯地平为探针药物与大鼠或Beagle犬的肝微粒体进行体外孵育,以液相色谱串联质谱法测定硝苯地平的代谢产物氧化硝苯地平。结果在所建立的HPLC/MS条件下,硝苯地平的氧化产物保留时间约为7.15min。杂质峰不干扰测定;氧化硝苯地平最低检测限为3μg·L^-1(S/N=3),线性范围为0.01～10mg·L^-1,回收率及精密度均符合检测要求。结论该HPLC/MS能够准确的检测出在大鼠和Beagle犬肝微粒体中的硝苯地平氧化产物。     

Beagle犬肝微粒体中葛根素的HPLC-ESI-MS测定及代谢动力学研究

目的：建立Beagle犬肝微粒体中葛根素及其代谢物的液相色谱质谱测定方法，并对葛根素在Beagle犬肝微粒体中的代谢动力学进行研究。方法：超速离心法制备Beagle犬肝微粒体；Shimadzu-ODS色谱柱(2.0 mm×150 mm，5 μm)；流动相甲醇-水梯度洗脱，正离子模式，选择离子扫描m/z 417(M+H)+(葛根素)，m/z 531(2M+Na)+(大豆苷元)。结果：在体外代谢系统中，葛根素在Beagle犬肝微粒体中被代谢为大豆苷元，其酶促动力学参数Vmax为(0.047±0.006) mg·min-1·g-1，Km为(1.22±0.53) mg·L-1。结论：该HPLC-MS法能够准确灵敏测定犬肝微粒体中葛根素和大豆苷元；葛根素在Beagle犬肝微粒体中被P450酶代谢为大豆苷元，同时为白葛胶囊后续研究奠定基础。