酸枣仁总皂苷改善对氯苯丙氨酸诱导失眠大鼠模型学习记忆损伤机制的研究

目的 基于代谢组学技术考察酸枣仁总皂苷（total saponins of Ziziphi Spinosae Semen,SZSS）对失眠大鼠内源性代谢物的影响,并探讨酸枣仁总皂苷改善学习记忆的药效及其作用机制。方法 采用对氯苯丙氨酸（DL-4-chlorophenylalanine,PCPA）诱导大鼠失眠模型,给予地西泮和酸枣仁总皂苷干预后,进行旷场实验及Morris水迷宫实验;采用苏木素-伊红（HE）染色观察海马组织病理变化;采用ELISA测定海马组织5-羟色氨（5-hydroxytryptamine,5-HT）、γ-氨基丁酸（γ-aminobutyric acid,GABA）及NO （nitric oxide,NO）水平。利用UPLC-Orbitrap-MS/MS技术对大鼠海马组织代谢轮廓进行分析,结合多元统计分析筛选差异性代谢物,并基于MetaboAnalyst 5.0数据库进行代谢通路及代谢网络分析,多角度探讨酸枣仁总皂苷改善学习记忆的代谢特征及作用途径。结果 与模型组比较,酸枣仁总皂苷组大鼠学习能力显著提高（P<0.05、0.01）,海马组织病理结构明显改善,海马组织中5-HT、GABA及NO水平显著升高（P<0.05、0.01）;代谢组学共鉴定出18种与学习记忆损伤相关的潜在生物标志物,酸枣仁总皂苷主要通过苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸等7条主要氨基酸代谢通路发挥改善记忆损伤的作用。结论 酸枣仁总皂苷能够通过回调海马组织内源性差异代谢物,并调控相关氨基酸代谢通路,从而改善失眠引起学习记忆减退。     

基于多元统计分析和网络药理学的炒酸枣仁饮片质量标志物预测分析

目的基于多元统计分析和网络药理学分析预测炒酸枣仁饮片潜在的质量标志物(Q-Marker)。方法利用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱质谱联用(ultra performance liquid chromatography-quadrupole-electrostatic field orbital trap mass spectrometry,UHPLC-Q-Orbitrap-MS)解析生、炒酸枣仁饮片的主要成分,运用多元统计分析结合VIP1和P0.05筛选出炮制前后潜在的差异化学成分。结合网络药理学筛选核心靶点构建"成分-靶点-通路"网络关系,预测炒酸枣仁潜在的Q-Marker,以潜在Q-Marker为指标对市售样品进行含量测定,验证Q-Marker的科学性。结果生、炒酸枣仁共鉴定54个化学成分,包括斯皮诺素、当药黄素等黄酮类成分,酸枣仁皂苷A、酸枣仁皂苷B等皂苷类成分,以及木兰花碱、乌药碱等生物碱类成分;结合多元统计分析共找到木兰花碱、6"'-阿魏酰斯皮诺素、酸枣仁皂苷A、白桦脂酸等28个差异性成分;经网络药理学分析筛选出包括17个差异成分的Q-Marker库,分别为酸枣仁皂苷A、酸枣仁皂苷B、美洲茶酸、白桦脂酸、木兰花碱、乌药碱、去甲荷叶碱、巴婆碱、斯皮诺素、当药黄素、维采宁Ⅱ、6"'-对-香豆酰斯皮诺素、6"'-阿魏酰斯皮诺素、芹菜素、桦木酮酸、牡荆素、异牡荆素;结合课题组前期研究及市售样品测定结果,最终确定木兰花碱、乌药碱、斯皮诺素、6"'-阿魏酰斯皮诺素、酸枣仁皂苷A和B作为炒酸枣仁的Q-Marker。结论分析预测的Q-Marker为炒酸枣仁的整体质量控制及临床应用提供科学依据,同时也为其功效关联物质的研究及作用机制的阐释奠定基础。     

分子鉴定技术在枣属植物中的应用进展

枣属(Ziziphus Mill.)是鼠李科(Rhamnaceae)中最具经济价值的一个属.全球约有170余种,我国有12种和3个变种,由于枣属植物品种繁多,且易受外部环境的影响,导致其形态特征和品质发生改变,对品种鉴别造成一定困难.分子鉴定技术近年来已被广泛应用于品种鉴定及亲缘关系研究方面,文章综述近十年来分子鉴定技...     

肠道菌群介导的酸枣仁总黄酮体内代谢轮廓研究

目的 比较正常和抗生素大鼠对酸枣仁总黄酮体内代谢转化反应的差异，及2组大鼠血浆中斯皮诺素的药动学变化特征。方法 采用ig联合抗生素建立抗生素干预大鼠模型；正常与抗生素大鼠ig酸枣仁总黄酮（120 mg/kg），收集粪便及不同时间点的血浆样品。采用UHPLC-Q-TOF-MS/MS技术分析粪便中原型成分及代谢产物；以黄芩苷为内标，建立UPLCMS/MS测定大鼠血浆中斯皮诺素含量的方法，并应用于斯皮诺素在正常与抗生素大鼠体内药动学比较研究。结果 正常及抗生素大鼠粪便中共鉴定了24个化合物，包括9个原型成分（维采宁II、斯皮诺素、牡荆素、异牡荆素、当药黄素、异当药黄素、山柰酚-3-O-芸香糖苷、6′′′-p-香豆酰斯皮诺素、6′′′-阿魏酰斯皮诺素）和15个代谢产物。正常大鼠中主要发生氢化、糖基化等4种代谢反应，抗生素干预后发生了脱甲氧基、去羟基化等6种代谢反应。与正常组相比，抗生素组大鼠血浆中斯皮诺素的血药浓度显著降低（P<0.05），达峰时间和半衰期显著升高（P<0.05）。结论 抗生素干预会导致酸枣仁黄酮类成分在大鼠体内代谢反应紊乱，并影响斯皮诺素的药动学行为。     

基于UPLC-Q-TOF-MS技术的酸枣仁水提物中8种有效成分的体内组织分布研究

本文旨在研究酸枣仁中8种有效成分的组织分布差异,为其药效物质基础研究提供参考。建立超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)测定大鼠组织中8种有效成分的含量测定方法,并应用于正常大鼠灌胃给予酸枣仁水提物(15 g·kg^-1)后,心、肝、脾、肺、肾、肌肉、脑、小肠和血清中8种有效成分在0.5、1.0、2.0 h的组织分布特点。结果显示, 8种成分在所设浓度范围内线性关系良好(r> 0.994 6);各成分的日内、日间精密度均小于19.77%,准确度均在-19.68%～19.46%;提取回收率均在86.70%～114.29%,基质效应均在82.14%～114.57%。4种黄酮当药黄素、斯皮诺素、6?-阿魏酰斯皮诺素、山柰酚-3-O-芸香糖苷主要分布在小肠>肾>心>肝中; 3种四环三萜类酸枣仁皂苷A (JuA)、酸枣仁皂苷B (JuB)、酸枣仁皂苷A1 (JuA1)主要分布在小肠>肺>脾>肾脏中;五环三萜类皂苷白桦脂酸主要分布在小肠>心>肺>肾>肝中。酸枣仁黄酮和皂苷类成分均能以极...