基于Hippo信号通路探讨鹿茸提取液对BMSCs成骨分化的影响

目的 观察鹿茸提取液对SD大鼠骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs）向成骨分化及Hippo信号通路的影响。方法 将3、4代BMSCs随机分为正常组、诱导组以及鹿茸组。酶联免疫吸附测定（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）法分别检测6、12 d以及18 d碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)的活性及水平;茜素红染色法检测3组BMSCs钙结节生长增殖情况;qRT-PCR法和蛋白质印迹法（Western blot）检测RUNX2及Hippo信号通路 MST1和YAP的转录表达与蛋白表达水平。结果 ELISA实验结果表明,鹿茸提取液可以提高ALP的活性,12 d鹿茸组ALP的活性达到最高,18 d鹿茸组ALP的活性显著上调（P＜0.01）;茜素红实验结果显示,鹿茸组观察到大量且密集的钙结节形成,提示鹿茸提取液可有效促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞转化;qRT-PCR的实验结果表明,与正常组相比,鹿茸组YAP和RUNX2 mRNA显著上调（P＜0.01）;Western blot法检测结果显示,鹿茸提取液可显著上调YAP蛋白表达水平（P＜0.01）,并且明显上调RUNX2蛋白表达水平（P＜0.05）。结论 鹿茸提取液能够影响RUNX2以及Hippo信号通路中 MST1和YAP相关蛋白进而推进骨髓间充质干细胞向成骨细胞的转化。     

填精益气中药对BMSCs成骨分化及甲基化转移酶METTL3的影响

目的 探究基于“精气互化”理论的填精益气中药对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)向成骨分化的影响以及其分化过程中对甲基化转移酶METTL3、WTAP、PPARγ影响的实验研究。方法 将BMSCs随机分为对照组、诱导组、填精组、益气组以及填精益气组。填精组药物为鹿茸提取液,益气组药物为黄芪甲苷,填精益气组药物为鹿茸提取液联合黄芪甲苷。使用ELISA法检测6、12、18 d各组细胞碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)含量变化;qRT-PCR法检测各组细胞METTL3、WTAP、PPARγ的基因转录;Western blot法检测各组METTL3、WTAP、PPARγ的蛋白表达。结果 ALP实验结果显示,填精益气组ALP活性优于填精组和益气组,且在第12天填精益气组的ALP活性达到了最高值;QRT-PCR及Western blot的实验结果表明,与对照组相比,各用药组甲基化转移酶METTL3和WTAP mRNA及蛋白表达水平均显著上调(P<0.01),PPARγ mRNA及蛋白表达水平显著下...     

基于肾-精-天癸理论探讨围绝经期综合征肾虚相关病因病机与治疗

围绝经期综合征是指女性在绝经前后卵巢功能减退而出现的一系列以植物神经系统功能紊乱为主,伴有神经心理症状的一组证候群。肾虚为此病的根本病因,补肾填精为治疗的根本大法。作者从中医学“肾-精-天癸”理论出发,围绕心肾不交、肝肾阴虚、脾肾阳虚3种证型对围绝经期综合征肾虚相关病因病机及治疗进行探讨,以期为临床治疗围绝经期综合征提供依据。