丹参对过氧化氢诱导的大鼠血管平滑肌细胞迁移的影响研究

目的 :研究丹参对过氧化氢诱导的大鼠血管平滑肌细胞 (VSMC)迁移的影响。方法 :用组织贴块法培养血管平滑肌细胞。将H2 O2 和丹参作用于 10 0 %FCS趋化作用下的VSMC ,采用改良的Boydenchamber方法检测VSMC的迁移活性。结果 :丹参剂量依赖性地抑制H2 O2 诱导的VSMC的迁移活性。结论 :提示丹参对冠状动脉腔内血管成形术后再狭窄的防治可能具有应用前景。     

丹参对H2O2诱导的大鼠血管平滑肌细胞凋亡的影响

目的:探讨丹参对过氧化氢(H2O2)诱导的大鼠主动脉平滑肌细胞(VSMCs)凋亡的影响及其可能机制.方法:选用体外培养的第3～5代大鼠VSMCs,以H2O2作为外源性活性氧(ROS)诱导VSMC凋亡,用丹参进行干预,以MTT比色法测定细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡率,同时用免疫细胞化学法检测VSMCs中Bcl-2和Bax蛋白表达的变化.结果:1 mmol/L H2O2诱导VSMCs凋亡,细胞存活率明显低于对照组,细胞凋亡率、Bax/Bcl-2蛋白表达的阳性指数(PI)明显高于对照组(P＜0.01);丹参干预后,和H2O2组相比,细胞存活率明显升高,而细胞凋亡率、Bax/Bcl-2蛋白表达的PI显著降低(P＜0.05或P＜0.01).结论:丹参可通过下调Bax/Bcl-2蛋白表达而对抗H2O2诱导的VSMCs凋亡.     

HPLC法测定染料木素自微乳中染料木素的含量

目的:建立染料木素自微乳中染料木素含量的HPLC测定方法.方法:采用Diamonsil C18色谱柱(150mm×4.6mm,5μm),甲醇-0.05%磷酸(60:40)为流动相,流速1.0mL·min-1,检测波长260nm,柱温为25℃.结果:染料木素在1.18～11.8mg·L-1范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9998),平均回收率为99.27%,RSD为1.40%.结论:该方法操作简便、结果准确、重现性好,可用于染料木素自微乳的质量控制.     

仙慈丹有效部位对人肺癌细胞A549增殖的抑制作用

目的:探讨仙慈丹(XCD)有效部位对肺癌细胞A549增殖抑制作用及其作用机制.方法:XCD有效部位为XCD水提滤液通过AB-8型大孔树脂柱收集80％乙醇洗脱液所得,得率为0.90％.体外培养A549细胞至对数期,分别以质量浓度为5,10,15,25,50,100,200 mg·L-1的仙慈丹有效部位作用,应用MTT法测定其对A549细胞的抑制率,进而求出半数抑制浓度(IC50).运用AnnexinV-FITC/PI双染流式细胞术及PI单染流式细胞术测定XCD有效部位对A549细胞凋亡及周期的影响.结果:通过MTT实验,经过统计计算得出XCD有效部位在对A549作用24,48,72 h后的IC50分别为136.550,56.671,55.322 mg·L-1;通过流式细胞仪测定XCD作用下A549在24,48,72 h的凋亡率分别为(17.98 ±0.11)％,(23.34 ±0.23)％,(29.54±0.78)％;XCD作用A549细胞24 h后,细胞周期被阻滞在S期,在48 h后细胞周期被阻滞在G0/G1期.结论:XCD有效部位对A549细胞增殖抑制作用明显,通过诱导肿瘤细胞凋亡,同时调节细胞周期抑制A549细胞生长.     

丹参注射液抑制H2 O2诱导的平滑肌细胞增殖的作用机制

目的 :观察丹参对H2 O2 诱导的离体大鼠主动脉平滑肌细胞 (VSMC)、增殖细胞核抗原 (PCNA)、核转录因子 (NF κB)蛋白表达和细胞增殖周期时相的影响 ,以探讨其可能的作用机制。方法 :以H2 O2 作为外源性活性氧(ROS)刺激VSMC增殖 ,用免疫细胞化学法检测培养的VSMC中PCNA和NF κB的表达 ,同时用流式细胞术测定细胞周期。结果 :H2 O2 可使VSMC胞核内PCNA和NF κB蛋白表达呈强阳性 ,并明显增加S期细胞百分比 (与对照组相比 ,P <0 0 5或P <0 0 1) ,加入丹参干预后 ,PCNA和NF κB蛋白表达明显受抑制 ,G0 /G1期细胞百分比升高 ,S期细胞百分比下降。结论 :抑制PCNA和NF κB蛋白表达 ,阻止细胞进入有丝分裂期可能是丹参抑制H2 O2 诱导的VSMC增殖的重要机制之一。     

栀子苷大鼠在体肠吸收动力学的研究

目的 研究栀子苷大鼠在体肠吸收动力学的特征.方法 采用大鼠在体肠吸收模型,UV法和HPLC法分别测定酚红和栀子苷的含量.考察药物质量浓度、不同肠段对栀子苷吸收的影响.结果 栀子苷20～120 μg·ml<'-1>对小肠吸收速率常数Ka无影响;十二指肠、空肠、回肠、结肠的Ka值分别为0.0240、0.0251、0.0234、0.0239 h<'-1>,各肠段的吸收速率常数Ka无显著性差异.结论 栀子苷在大鼠肠道的吸收呈一级动力学过程,为被动扩散.栀子苷具广泛的吸收窗,可制成缓释制剂.     

染料木素自微乳的大鼠在体肠吸收机制研究

目的：研究染料木素自微乳在大鼠的在体肠吸收机制。方法：采用大鼠在体肠回流装置，UV，HPLC分别测定酚红和染料木素的含量。考察药物浓度、pH、不同肠段及P-糖蛋白( P-gp)抑制剂维拉帕米对染料木素吸收的影响。结果：染料木素自微乳在药物浓度为0.05～0.5 g·L^-1和pH为5.4～7.8时小肠吸收速率常数K_a均无统计差异；各肠段的吸收速率常数K_a空肠>回肠>十二指肠>结肠，空肠与其他肠段有统计差异(P<0.05)；维拉帕米显著增加染料木素的肠吸收 (P<0.05)。结论：染料木素自微乳在大鼠肠道的吸收呈一级动力学过程,吸收机制为被动扩散，在整个肠段都有吸收，最佳吸收部位在空肠。药物吸收受P-糖蛋白外排影响,而 pH对药物吸收无显著影响。     

染料木素自微乳在家兔体内的相对生物利用度研究

目的研究染料木素自微乳在家兔体内的药物动力学和相对生物利用度。方法家兔分别灌胃染料木素自微乳和染料木素CMC—Na混悬液，用HPLC法测定不同时间血浆样品中染料木素的浓度，绘制药-时曲线，计算药动学参数及相对生物利用度。结果染料木素自微乳和染料木素混悬液药-时曲线下面积（AUC0→10h）分别为（24．90&#177;1．24）和（10．71&#177;0．86）μg&#183;h&#183;mL^-1，血药峰浓度（Cmax）分别为（4．02&#177;0．20）和（0．99&#177;0．04）μ&#183;mL^-1，达峰时间（Tmax）分别为2h和4h，染料木素自微乳较染料木素混悬液的相对生物利用度为232．49％。结论染料木素自微乳可显著提高染料木素的生物利用度。     

良附微乳和良附丸中高良姜素药代动力学比较

目的建立家兔血浆中高良姜素浓度的HPLC分析方法,并对良附微乳和良附丸中高良姜素药代动力学进行比较。方法家兔分别灌胃良附微乳和良附丸后用HPLC法测定不同时间血浆样品中高良姜素的浓度,用3P87程序计算主要药代动力学参数。结果良附微乳在家兔体内药动学符合一级单室开放模型,达峰时间(tpeak)为0.75h,血药峰浓度(Cmax)为38.46μg/L,药时曲线下面积(AUC)为129.42(μg·h)/L,消除半衰期(t1/2ke)为1.47h,良附丸中高良姜素的血药浓度未能检测出。结论HPLC法简单可靠,可用于良附微乳中高良姜素的血药浓度分析和药代动力学研究。微乳可促进高良姜素的吸收,提高其生物利用度。     

血根碱通过STAT3通路对LPS诱导的RAW264.7细胞炎症模型的保护作用

摘要 目的：研究血根碱对脂多糖（LPS）诱导的RAW264.7细胞产生的炎症因子的作用和其机制,探讨血根碱在炎症过程中的作用。方法：应用MTT法检测血根碱对细胞增殖作用的影响;检测各组细胞上清液中TNF-α、IL-6的含量;RT-PCR检测细胞中STAT3mRNA的表达量;Western blot法检测STAT3通路蛋白的表达情况。结果：血根碱可以显著性降低LPS诱导的RAW264.7细胞中TNF-α,IL-6的含量(P<0.01);LPS刺激细胞后,STAT3 mRNA和蛋白的表达量明显上升,血根碱作用后,可显著降低mRNA和蛋白的表达量（P<0.01）。结论：血根碱可降低细胞TNF-α,IL-6的含量、STAT3 mRNA和蛋白的表达量,血根碱可能通过STAT3通路调节LPS诱导的细胞炎症模型。