金线莲抗软腐病离体鉴定方法的研究

以活体喷雾法作对照,研究不同离体接种方法、不同接种浓度以及不同叶龄对金线莲抗软腐病的影响。结果表明离体叶碟滴接法接种后金线兰和台湾金线莲之间病情指数差异较大,能够比较明显区分其抗病性;当接种浓度为1.0×10⁷ cfu·mL^-1时,病情指数差异较明显,能够较好地区分抗、感病品种;在4个月叶龄接种时,金线兰和台湾金线莲间病情指数有一定的差异,能相对准确地反映品种间的抗性差异。采用离体叶碟滴接法,对4个月叶龄的金线兰与台湾金线莲接种浓度为1.0×10⁷ cfu·mL^-1的细菌悬浮液,放入14 h光照、28℃培养箱中培养5 d后进行鉴定,其鉴定结果与活体喷雾法一致,可用于金线莲抗软腐病离体鉴定,为金线莲抗软腐病的新品种选育及种质创新提供依据。     

不同种质金线莲氨基酸和矿物质元素量的比较

目的比较不同种质金线莲中氨基酸和矿物质元素的差异。方法采用全自动氨基酸分析仪和原子吸收光谱仪测定11个不同种质金线莲中氨基酸和矿物质元素的量。结果不同种质金线莲必需氨基酸为2.81%~4.47%,总氨基酸量为11.38%~17.06%,其中天门冬氨酸、谷氨酸和精氨酸的量明显高于其他氨基酸组分。矿物质元素中钾元素的量最高,其顺序为KCaMgFeMnZnCrCuPbCd。主成分分析表明丙氨酸、丝氨酸、谷氨酸、天门冬氨酸、苏氨酸、异亮氨酸、丙氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸为金线莲的特征性氨基酸,Fe、Zn、Mn、Ca、Cr、Mg为金线莲的特征性元素。结论金线莲中氨基酸和矿物质元素量存在地域性差异。     

金线莲基原植物花粉活力和柱头可授性及结实特征研究

采用TTC法和过氧化物酶法测定花粉活力及寿命,用联苯胺-过氧化氢法测定柱头可授性,并对不同授粉方式的植株进行结实特征调查。结果表明:1金线兰与台湾金线莲在花粉活力上表现出相同的趋势,先上升后下降;贮藏温度与贮藏时间对金线莲花粉活力存在显著的影响,随着贮藏时间的延长,花粉活力降低,4℃冰箱贮藏可适当延长花粉活力。2柱头于开花当天就具有可授性,第4天最强,随后逐渐降低,金线兰于花后第8天不具可授性,而台湾金线莲于花后第10天不具可授性。3不同授粉方式对金线莲结实率影响显著,人工异花授粉的结实率远远高于人工自花授粉。因此,采集花后第3天花粉对花后第4天的柱头进行人工异花授粉杂交,可显著提高结实率,为金线莲新品种的选育和良种繁育提供技术保证。     

灵芝孢子粉增强免疫功能的研究

目的 研究灵芝孢子粉(破壁)的增强免疫作用。方法 通过ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化实验、绵羊红细胞诱导的小鼠迟发型变态反应实验(足跖容积法)、抗体生成细胞检测实验(Jerne改良玻片法)、血清溶血素测定(血凝法)、小鼠碳廓清实验、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验(半体内法)、NK细胞活性实验(乳酸脱氢酶测定法)评价灵芝孢子粉增强免疫功效。结果 ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化实验、迟发型变态反应实验、抗体生成细胞检测实验、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验4项实验结果均为阳性。结论 灵芝孢子粉(破壁)样品具有增强免疫作用。     

金线莲形态学性状与产量形成关系的多重分析

以13份金线莲种质为研究对象,对其9个性状（株高、地径、叶长、叶宽、植株叶面积、叶片鲜重、叶片数、高径比、植株鲜重）进行相关、通径和主成分分析。不同种源金线莲形态学性状变异系数为2.96%~12.59%,相关性研究表明植株鲜重与地径、株高和叶片数呈极显著正相关,与叶片鲜重呈显著正相关。通径分析表明株高对植株鲜重有最大的正向直接作用,并通过叶片鲜重和叶片数对植株鲜重有不同程度的间接作用。通过主成分分析,将金线莲形态学性状分为“高产型形态决定因子”和“产量的叶部决定因子”。在实际生产及良种选育过程中,应关注金线莲株高、叶片鲜重和叶片数等性状。     

金线莲栽培中多菌灵残留动态及安全使用标准研究

采用甲醇提取,液液分配净化,高效液相色谱分析多菌灵在金线莲根、茎、叶及栽培基质中的残留消解动态,并对其安全使用标准进行讨论。结果表明不同多菌灵添加浓度下的回收率为82.9%~95.7%,RSD为2.0%~6.3%,满足农药残留检测要求。田间试验分别采用推荐剂量(1.0 kg·hm-2)和1.5倍推荐剂量(1.5 kg·hm-2)进行处理,2年连续实验结果表明,多菌灵在金线莲栽培基质中的半衰期为7.01~8.51 d,在根中残留趋势为先升后降,半衰期为4.93~5.71 d,在茎和叶中的消解半衰期分别为3.58~4.27,3.50~3.91 d。若多菌灵在金线莲植株中的最高残留限量推荐值为0.5 mg·kg-1,每年以1.0 kg·hm-2的剂量喷施4次,最后一次施药和收获时间的安全间隔期可推荐为28 d。     

不同移栽条件对金线莲组培苗成活率及生长的影响

观察金线莲幼苗的生长状况,统计不同移栽基质配比、种植密度、遮荫率和营养液条件下金线莲幼苗的成活率及植株高度、地径和植株鲜重的增长量。结果表明不同移栽条件对金线莲组培苗的生长状况影响差异较大,其中泥炭-河沙2：1,种植密度为3 cm×3 cm,遮荫率70%,1/4MS营养液的条件下,金线莲组培苗的成活率高且长势较好,为金线莲组培苗的人工栽培提供良好的技术方案。     

金线莲茎腐病菌的生物学特性及5种杀菌剂对其抑制作用

采用十字交叉法和血球计数板法分别测定不同培养温度、pH和光照条件对金线莲茎腐病菌菌丝生长状况和产孢量的影响;用菌丝生长速率法测定5种杀菌剂对金线莲茎腐病菌的抑制作用,为金线莲茎腐病的防治提供参考。结果表明该病菌菌丝生长、产孢的最适温度都为28 ℃,最适生长的pH为6~7,且光暗交替可促进菌落的生长和产孢。在5种杀菌剂中,戊唑醇乳油的EC₅₀为10.02 mg·L^-1,为多菌灵的92.50倍;其次是腈菌唑和福星乳油,EC₅₀分别为91.23,96.68 mg·L^-1。戊唑醇乳油对金线莲茎腐病菌的抑制作用最强,防治效果较好。     

种苗级别对金线莲生长发育及产量和品质的影响

对金线莲种苗的株高、地径、叶片数、全株鲜重和高径比5个形态指标进行检测,并进行主成分分析确定分级指标,采用逐步聚类分析方法聚类分级;进行不同等级种苗盆栽试验,对植株生长指标,药材产量和品质指标进行测定。结果表明可以选用株高和地径为种苗分级的质量指标,并初步制定了金线莲种苗质量分级标准;不同级别金线莲种苗对植株生长发育,药材产量有影响,Ⅰ级苗的株高和地径要比Ⅱ级、Ⅲ级苗高,且药材产量也显著高于Ⅱ级、Ⅲ级苗药材产量,而对药材内在品质无明显影响,为金线莲规范化栽培提供依据。     

浊点萃取反萃取-气质联用测定金线莲中5种拟除虫菊酯类农药残留

建立浊点萃取反萃取-气质联用测定金线莲中甲氰菊酯、高效氯氟氰菊酯、氯菊酯、氯氰菊酯和氰戊菊酯5种拟除虫菊酯类农药残留量的测定方法。选用聚乙二醇6000作为浊点萃取的提取剂、异辛烷为反萃取剂,气相色谱质谱法进行检测,外标法计算含量,结果表明,5种拟除虫菊酯类农药在15~2 000 μg·kg^-1呈良好的线性关系,相关系数为0.955~0.999,加标回收率85.12%~101.6%,RSD 3.1%~8.4%,检出限0.63~3.10 μg·kg^-1,定量限2.10~10.31 μg·kg^-1。该方法操作简单、安全,可应用于金线莲中5种拟除虫菊酯类农药残留的检测。