喘可治注射液对甲型H1N1流感病毒FM1株感染免疫低下小鼠肺炎的影响

目的:观察喘可治注射液对甲型H1N1流感病毒感染免疫低下小鼠肺炎模型的预防和治疗作用。方法:采用腹腔注射环磷酰胺联合甲型H1N1流感病毒FM1株滴鼻感染ICR小鼠造成免疫低下小鼠肺炎模型,分别经治疗性给药4 d和预防性给药5 d后,取各组小鼠肺组织称重,计算肺指数、肺指数抑制率, RT-PCR法检测各组小鼠肺组织中相对病毒载量。结果:采用甲型H1N1流感病毒FM1株感染免疫低下小鼠后,肺指数明显增高,脾、胸腺指数降低,三者与环磷酰胺对照组比较差异有显著统计学意义(P0.01)。治疗性给予喘可治注射液4d后,小鼠肺指数有所降低,与模型对照组比较差异无统计学意义(P0.05);脾指数和胸腺指数均升高,其中脾指数与模型对照组比较,差异有统计学意义(P0.05)。预防性给予喘可治注射液5 d,肺指数明显降低,与模型对照组比较差异有显著统计学意义(P0.01);小鼠肺组织中FM1株流感病毒病毒载量也明显降低,与模型对照组比较差异有统计学意义(P0.05),病毒载量抑制率可达58.68%。结论:喘可治注射液对流感病毒感染免疫低下小鼠肺炎模型有较好的防治作用。     

小儿肺热咳喘口服液对甲型H1N1流感病毒感染小鼠的影响

目的:观察小儿肺热咳喘口服液对甲型H1N1流感病毒感染小鼠的影响。方法:以甲型H1N1流感病毒滴鼻感染ICR小鼠造成肺炎模型,造模同时开始ig小儿肺热咳喘口服液20,10,5 mL.kg-1,以达菲为阳性对照,观察肺部炎症、计算肺指数,死亡率和生命延长率,酶联免疫法检测血清中细胞因子的含量。结果:小儿肺热咳喘口服液治疗性给药后能明显降低流感病毒FM1株和PR8株感染后小鼠的肺指数、降低死亡率、延长平均存活天数,而对小鼠血清中的细胞因子含量没有明显影响。结论:小儿肺热咳喘口服液对甲型H1N1流感病毒感染小鼠造成的病毒性肺炎具有明显的治疗作用。     

小儿肺热咳喘口服液防治甲型H1N1流感病毒感染免疫低下小鼠的研究

目的:评价小儿肺热咳喘口服液对免疫低下小鼠感染甲型H1N1流感病毒的防治作用。方法:ICR小鼠sc环磷酰胺造成免疫低下,以甲型H1N1流感病毒滴鼻感染造成肺炎模型,造模同时及造模前ig 20,10,5 mL·kg-1小儿肺热咳喘口服液4 d后观察肺部炎症、计算肺指数,死亡率和生命延长率,Real-time RT-PCR法检测肺组织中病毒载量,酶联免疫法检测血清中免疫因子的含量。结果:小儿肺热咳喘口服液治疗性给药或预防性给药后能明显降低流感病毒FM1株和PR8株感染后免疫低下小鼠的肺指数、降低死亡率、延长平均存活天数、显著降低小鼠肺组织中的病毒载量,明显升高小鼠血清中CD4/CD8的比值。结论:小儿肺热咳喘口服液对甲型H1N1流感病毒感染免疫低下小鼠造成的病毒性肺炎具有明显的防治作用。     

鱼腥草注射液体内抗流感病毒药效学研究

本研究评价新、老两种鱼腥草注射液制剂在体内对H1N1流感病毒感染的防治作用。采用甲型H1N1流感病毒FM1和PR8株, 滴鼻感染正常小鼠和免疫低下小鼠造成肺炎模型, 分别进行治疗性和预防性给药, 观察小鼠肺指数。结果显示: 鱼腥草注射液新、老两种制剂对两种流感病毒感染引起的小鼠肺部炎症均有明显治疗作用, 且小剂量时新制剂对FM1株治疗作用优于老制剂; 新、老两种制剂对两种病毒感染免疫低下小鼠引起的肺部炎症有明显预防作用, 且小剂量时老制剂对PR8病毒株的预防作用优于新制剂。鱼腥草注射液可改善流感病毒引起的小鼠肺炎症状, 降低H1N1感染小鼠的肺指数, 在体内对H1N1流感病毒感染有较好的防治作用。     

MC002诱导人喉癌细胞Hep-2凋亡及其作用机制

目的与雷公藤内酯醇(PG490)进行比较,观察雷公藤内酯醇衍生物MC002对人喉癌Hep-2细胞体外增殖的抑制作用及其分子机制。方法以MC002和PG490分别处理人喉癌细胞Hep-2,采用噻唑蓝比色法(MTT)检测药物对Hep-2细胞的增殖抑制作用并计算IC50值;利用软琼脂克隆形成实验观察细胞的锚定非依赖性生长能力;选用Hoechst33258染色法观察细胞凋亡的形态学变化;用ROS检测试剂盒分析药物对细胞活性氧水平的影响;以实时荧光定量PCR技术(Realtime-PCR)检测细胞凋亡相关因子Bcl-2及Bax mRNA水平的表达变化。结果 MC002及PG490均对体外培养的人喉癌Hep-2细胞有增殖抑制作用,且具有剂量依赖性,IC50值分别为183.58nmol/L和119.35nmol/L,而且两种药物可以抑制细胞的锚定非依赖性生长能力;此外,MC002及PG490可以降低ROS水平,并且使凋亡相关因子BaxmRNA表达上调,Bcl-2mRNA表达下调。结论 MC002具有与PG490相同的作用,可以抑制人喉癌细胞株Hep-2的生长,诱导人喉癌Hep-2细胞凋亡,其机制可能与调节凋亡相关因子Bcl-2、Bax及ROS的表达有关。     

BN大鼠和豚鼠对卵清白蛋白致主动过敏反应的免疫学特性比较

目的比较BN大鼠和豚鼠对卵清白蛋白(OVA)致敏前后机体免疫学特性的变化。方法BN大鼠和豚鼠分别用OVA(每只1 mg)隔日致敏(i.p.),共5次；于末次致敏第10天以OVA(每只2 mg)激发致敏(i.v.)；分别设正常对照组和OVA致敏组。于激发致敏后1 h处死动物,分离腹腔肥大细胞、脾脏和骨髓,并制备脾脏和骨髓淋巴细胞。以annexin-V作为标志检测肥大细胞活性,同时以Fluo-3/AM标记胞内钙离子,检测钙离子水平；以PHA和LPS作为有丝分裂原,分别检测脾脏和骨髓T、B淋巴细胞活性。结果①致敏BN大鼠和豚鼠脾脏及骨髓T、B淋巴细胞活性均升高,其中骨髓淋巴细胞活性BN大鼠显著高于豚鼠,脾脏淋巴细胞活性两种属间差异无显著性；②致敏后,腹腔肥大细胞活性两种属间差异无显著性,但BN大鼠致敏后是致敏前的6倍,豚鼠是3倍；③肥大细胞内钙离子水平两种属致敏后均升高,豚鼠致敏前后钙离子水平具有统计学意义。结论OVA致敏后,BN大鼠骨髓淋巴细胞活性明显高于豚鼠,豚鼠肥大细胞内钙离子较BN大鼠升高明显,肥大细胞活性两者无明显差异。因此,在实验中可以根据两种属在过敏反应中的特点以及具体的实验要求选择动物模型。     

人脐带间充质干细胞分化胰岛样细胞过程中胰岛素和巢蛋白的表达

BACKGROUND:Domestic and international studies have confirmed that human umbilical cord mesenchymal stem cells could be induced to differentiate into islet-like cells, but little is reported about the changes of insulin and nestin expressions during the differentiation phase. OBJECTIVE:To observe the changes of insulin and nestin expressions during the differentiation of human umbilical cord mesenchymal stem cells into islet-like cells. METHODS:Human umbilical cord mesenchymal stem cells were cultured using UltraCULTURE medium in vitro. Stem cells were cultured for three generations to observe cell morphological changes under an inverted microscope, to test immunophenotype by flow cytometry, and to identify the capacity of osteogenesis and adipogenic differentiation. Induction protocol was divided into two stages. In stage 1, stem cells were induced for 14 days in the UltraCULTURE medium with 4 nmol/L activin A, 25 μg/L epidermal growth factor, 100 μg/L β-nerve growth factor, 10 mmol/L nicotinamide. In stage 2, the cells were cultured in the UltraCULTURE medium with 1% insulin-transferin-selenium, 10 mmol/L nicotinamide, 10 μg/L basic fibroblast growth factor for an additional 14 days. The expressions of nestin and insulin in those differentiated cells were tested by flow cytometry, and zinc ion expression in the islet-like cell clusters was identified by dithizone staining. RESULTS AND CONCLUSION:During the differentiation process, the insulin level was increased gradually in the induction group and reached a higher level on day 28, but the insulin expression showed negative in the control group. In addition, on day 14 of induced differentiation, the nestin expression reached the peak and then gradually reduced along with the prolonged inductive time. On day 28 of induction, islet-like cell clusters formed and were positive for dithizone staining. In this experiment, the umbilical cord mesenchymal stem cells were successfully induced and differentiated into islet-like cells, accompanied with the variation of insulin and nestin expression.     

脐带间充质干细胞联合番茄红素的抗衰老作用

背景：研究证实脐带间充质干细胞、番茄红素均有不同程度的抗衰老作用,而关于二者联合抗衰老作用的研究国内外研究甚少,目前基本处于空白状态。 目的：观察人脐带间充质干细胞联合番茄红素对D-半乳糖衰老模型小鼠的抗衰老作用。 方法：实验选用ICR小鼠,通过颈背部皮下注射D-半乳糖复制亚急性衰老小鼠模型,分为对照组、模型组、干细胞治疗组、番茄红素治疗组和干细胞联合番茄红素治疗组。实验8周后处死,测定各组小鼠血清、肝脏、脑组织中丙二醛含量及超氧化物歧化酶活性及皮肤中羟脯氨酸含量。 结果与结论：与对照组相比,模型组小鼠超氧化物歧化酶活性、羟脯氨酸含量降低,丙二醛含量升高,差异有非常显著性意义(P ≤ 0.01)。与3个治疗组相比,模型组超氧化物歧化酶活性、羟脯氨酸含量偏低,丙二醛含量偏高,且差异有显著性意义(P ≤ 0.05),但模型组大脑中丙二醛含量与番茄红素治疗组差异无显著性意义(P > 0.05)。3个治疗组相比,干细胞联合番茄红素治疗组中超氧化物歧化酶活性、羟脯氨酸含量较高、丙二醛含量较低,差异有显著性意义(P ≤ 0.05)。提示干细胞、番茄红素具有不同程度的抗衰老作用,且二者联合的抗衰老作用优于单独使用。     

疏风解毒胶囊防治流感体内药效学实验研究

目的评价疏风解毒胶囊在体内对H1N1流感病毒感染的防治作用。方法本研究中采用甲型H1N1流感病毒FM1和PR8株滴鼻感染正常小鼠造成肺炎模型,分别进行治疗性和预防性给药,观察小鼠肺指数、病死率。结果①感染当天开始给予疏风解毒胶囊治疗,连续4 d后3个剂量组肺指数均明显降低;②预防性给予疏风解毒胶囊连续4 d,对两种病毒感染正常小鼠引起的肺部炎症有明显预防作用。③感染前预防性给予疏风解毒胶囊4 d,FM1株三个剂量组动物的死亡数均显著降低。结论疏风解毒胶囊可改善流感病毒引起的小鼠肺炎症状,降低H1N1感染小鼠的肺指数,对病毒性感冒有较好的治疗和预防作用;并可明显降低感染动物的死亡率,延长评价存活天数。     

黄金方防治甲型H_1N_1流感病毒感染小鼠肺炎的实验研究

目的:观察黄金方对甲型H1N1流感病毒FM1株和PR8株感染小鼠肺炎的防治作用。方法:采用滴鼻感染正常小鼠和免疫低下小鼠建立流感病毒感染肺炎模型,分别采用治疗和预防性给药,观察对小鼠肺指数、死亡率、生存时间的影响。结果:治疗给药试验中黄金方大剂量组(6 g.kg-1)、中剂量组(3g.kg-1)可明显降低正常小鼠感染流感病毒FM1株或PR8株后肺指数(与模型组比较,P<0.05),3个剂量组均可明显减少正常小鼠感染流感病毒FM1株或PR8株后死亡率并延长生存时间(与模型组比较,P<0.01);预防给药试验中黄金方大剂量组(6 g.kg-1)、中剂量组(3 g.kg-1)可明显降低免疫低下小鼠感染流感病毒FM1株或PR8株后肺指数(与模型组比较,P<0.05),3个剂量组均可减少正常小鼠感染流感病毒FM1株后死亡率并明显延长生存时间(与模型组比较,P<0.01)。结论:黄金方在体内对H1N1流感病毒感染有较好的治疗和预防作用。