芪白平肺颗粒HPLC指纹图谱研究及其多指标成分定量分析

目的建立芪白平肺颗粒(QPG)的HPLC指纹图谱,并进行多成分定量分析,用于评价QPG的质量。方法样品经50%甲醇提取后,采用Phenomenex Luna C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm)进行检测,以甲醇-0.2%甲酸水溶液梯度洗脱,体积流量1.0 m L/min,检测波长250 nm,柱温30℃。采用国家药典委员会出版的《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》(2012年版),对10批次的QPG化学成分指纹图谱进行相似度计算,并通过对照品对共有峰进行指认。结果 10批QPG指纹图谱中样品间相似度均大于0.96,共标定出25个共有峰,各峰分离度良好,其中1号峰来源于地龙,2、3号峰来源于地龙和人参,4号峰来源于人参、五味子和川芎,5号峰来源于人参、薤白、川芎和地龙,6、8、22、23、24、25号峰来源于五味子,7号峰来源于黄芪和五味子,9号峰来源于人参和薤白,10号峰来源于薤白和葶苈子,11、12、13、15、16号峰来源于川芎,14号峰来源于黄芪和葶苈子,17、18、19、20、21号峰来源于黄芪。通过对照品比对确定了6个成分,分别为咖啡酸(12号峰)、阿魏酸(13号峰)、五味子醇甲(22号峰)、五味子酯甲(23号峰)、五味子甲素(24号峰)和五味子乙素(25号峰);其中,五味子醇甲在2.99~95.61μg/m L、咖啡酸在3.38~108.02μg/m L、阿魏酸在3.60~115.33μg/m L、五味子甲素在3.26~104.17μg/m L、五味子乙素在2.89~92.45μg/m L、五味子酯甲在2.81~89.77μg/m L,呈良好的线性关系;10批QPG样品中咖啡酸在0.412~0.429 mg/g,阿魏酸在0.302~0.317 mg/g,五味子醇甲在0.182~0.195 mg/g,五味子酯甲在0.179~0.195 mg/g,五味子甲素在0.203~0.215 mg/g,五味子乙素在0.131~0.144 mg/g,不同批次间各指标成分的量变化较小,样品质量较稳定。结论本方法具有良好的精密度、重复性、稳定性,色谱峰间分离度较好,可用于QPG的质量评价。     

清平片中黄酮类成分定量分析

目的:建立清平片中黄酮类成分槲皮素、葛根素、芦丁的含量测定方法,为清平片质量控制研究提供参考。方法:超声提取方法处理样品,采用Kromasil C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相甲醇-0.05%三氟乙酸进行梯度洗脱,流速1.0 m L·min~(-1),柱温30℃,检测波长247 nm。结果:葛根素在0.003 6~0.114 0 g·L~(-1)(r=0.999 8),芦丁在0.003 3~0.105 0 g·L~(-1)(r=0.999 6),槲皮素在0.003 2~0.102 0 g·L~(-1)(r=0.9997)呈良好的线性关系,葛根素,芦丁,槲皮素平均回收率分别为99.60%,99.86%,99.94%,RSD分别为0.4%,0.3%,0.2%。结论:该方法快速、简便、重复性好,稳定,可控,可用于清平片黄酮类成分的含量测定。     

基于ICP-MS法分析九味熄风颗粒中25种重金属及微量元素

目的采用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法建立九味熄风颗粒中25种重金属及微量元素(Li、Mg、Cd、Sn、Al、Mn、Fe、Ti、V、Co、Zn、Ga、Cr、Ni、Tl、Pb、Cu、As、Be、B、Sb、Ba、Sr、Hg、Bi)的测定方法。方法九味熄风颗粒样品经微波消解后,以Ge、In元素为内标,以灌木枝叶标准物质作为质控标准物质,采用ICP-MS法进行测定。结果检测的25种元素线性关系良好,相关系数R2≥0.999 2,各元素的检出限在0.009~16.051μg/L,回收率在70.75%~107.66%,RSD≤6.44%。测定的6批样品中Cr、Sn、Hg、Pb均未检出,Tl、Cd、As、Cu的量均较低或未检出,Cd≤0.011μg/g,Cu≤0.373μg/g,Tl≤0.021μg/g,As≤0.571μg/g。结论该方法操作简便,分析速度快,灵敏度高,适用于九味熄风颗粒中重金属及微量元素的测定。     

HPLC-ELSD法同时测定益心舒片中人参皂苷Rg1、Re、Rb1的含量

目的建立HPLC-ELSD法测定益心舒片中人参皂苷Rg1、Re、Rb1的质量分数。方法采用Kromasil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-水梯度洗脱,流速为1.5 m L·min-1,柱温为25℃;采用蒸发光散射检测器检测,漂移管温度40℃,载气N2,压力3.500×105Pa。结果人参皂苷Rg1、Re、Rb1分别在进样量为0.757 5~12.12μg、0.593 8~9.500μg、0.580 6~9.290μg范围内呈良好的线性关系。3种人参皂苷的平均回收率分别为101.0%(RSD=0.543 6%)、98.99%(RSD=1.108%)、103.8%(RSD=0.467 2%)。结论本方法灵敏度高、简便、重复性好,可用于益心舒片中人参皂苷的含量测定。     

ICP-MS法分析顷康片中的元素

目的：使用电感耦合等离子质谱仪,建立顷康片中锂、铍、硼、镁、铝、钛、钒、铬、锰、铁、钴、镍、铜、锌、镓、砷、锶、镉、锡、锑、钡、汞、铊、铅和铋共25种元素的测定方法。方法：顷康片经微波消解后,以锗、铟为内标,以灌木枝叶标准药材作为质控标准物质,用ICP-MS法进行测定。结果：结果表明,各元素的线性关系良好,相关系数r≥0.9994,各元素的检出限在0.001～4.447μg·L-1,回收率在87.38%～106.44%,相对标准偏差（RSD）≤7.72%。结论：该方法快速、简便、准确,可以用于顷康片中多元素的质量控制。     

王不留行毛状根培养体系建立及其黄酮苷的测定

目的建立王不留行毛状根培养体系。方法分别用发根农杆菌R15834、R1601、R1000、A4感染王不留行叶片产生毛状根,考察不同理化因子对其生长的影响,并利用HPLC测定王不留行中黄酮苷的量。结果发根农杆菌R1601转化王不留行叶片的诱导率最高,p H值为6.0,蔗糖浓度为3%的MS培养基培养毛状根增殖速度最快,王不留行毛状根中王不留行黄酮苷量略高于种子中的量。结论王不留行成功诱导毛状根,为进一步筛选适宜的王不留行发根培养体系并调控次生代谢产物的研究奠定了基础。     

HPLC法同时测定颐泰胶囊中6种成分

目的建立HPLC法同时测定颐泰胶囊(人参、黄芪、女贞子等)中人参皂苷Re、人参皂苷Rg_1、人参皂苷Rb_1、特女贞苷、毛蕊异黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷、齐墩果酸的含有量。方法该药物70%乙醇提取液的分析采用Luna C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相甲醇-0.2%磷酸,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温25℃;检测波长203 nm。结果 6种成分在各自范围内线性关系良好(r0.999 0),平均加样回收率95.58%~102.12%,RSD0.82%~1.73%。结论该方法简便、稳定、快速,可用于颐泰胶囊的质量控制。     

王不留行毛状根的诱导及培养

目的:利用4种发根农杆菌R15834,R1601,R1000,A4诱导药用植物王不留行产生毛状根,建立王不留行的毛状根培养体系。方法:采用共培养法研究不同外植体、菌株、外源激素、侵染时间、预培养时间和共培养时间对王不留行毛状根诱导率的影响。结果:用王不留行叶片作为外植体,外植体预培养60 h,共培养48 h,发根农杆菌R1601侵染10 min,培养基中添加0.1 mg.L-1吲哚丁酸(IBA)转化率最高。结论:王不留行毛状根诱导成功,为其遗传转化提供了依据。     

怡康片指纹图谱研究和两个指标成分定量测定

目的：建立怡康片的指纹图谱,进行两个指标成分的定量分析,为评价怡康片提供依据。方法：采用Kromasil C₁₈柱（4.6mm×250mm,5μm）,以甲醇-水梯度洗脱,流速1.0mL?min^?1,柱温30℃,检测波长为250nm。结果：得到分离度、重现性均较好的怡康片指纹图谱,标示出19个共有峰,各批次样品相似度在0.96以上;通过对照品比对,确定了两个成分,分别为葛根素和姜黄素,并对其进行定量分析。结论：本实验同时对怡康片指纹图谱和两个指标成分进行分析,快速、简便、准确,可作为全面评价该制剂质量的有效方法之一。