不同衰老大鼠模型大脑皮层细胞凋亡状况的比较

目的比较不同方法建立的衰老大鼠模型大脑皮层细胞凋亡与线粒体膜电位的变化状况。方法实验分为正常对照组、单纯腹腔注射D-半乳糖组、单纯摘除胸腺组、D-半乳糖注射联合胸腺摘除组、维生素E、C治疗组。造模及投药6w后,检测血清超氧化物歧化酶(SOD)水平和血清总抗氧化能力(T-AOC),并采用流式细胞术观察大脑皮层神经元细胞凋亡发生率以及神经元线粒体膜电位。结果造模及投药6w后,与对照组比较,3个造模组血清SOD水平和T-AOC均明显下降(P0.05),造模3组之间无显著差异;神经元细胞凋亡发生率均明显上升,神经细胞线粒体膜电位均显著降低(P0.05),以D-半乳糖腹腔注射联合胸腺摘除组尤为明显,与单一方法造模的两组比较该两项指标变化均有显著意义(P0.05)。结论应用胸腺摘除复合D-半乳糖腹腔注射方法建立的衰老大鼠模型,更能体现出神经细胞衰老损伤的病理特征。     

脑内灌流6-羟基多巴胺对大鼠纹状体细胞外液氨基酸类神经递质的影响及美多芭的作用

目的探讨脑内灌流6-羟基多巴胺(6-OHDA)对大鼠纹状体细胞外液氨基酸类神经递质的影响以及美多芭的作用。方法SD大鼠,随机分为对照组、模型组及美多芭高、低剂量组。采用微透析技术脑内灌流6-OHDA造模,邻苯二甲醛柱前衍生,高效液相-荧光检测技术,动态监测清醒自由活动大鼠纹状体细胞外液氨基酸神经递质水平。结果6-OHDA脑内灌流40 min后,模型组大鼠纹状体细胞外液谷氨酸(Glu)浓度有4个时间点、γ-氨基丁酸(GABA)浓度有1个时间点、牛磺酸(Tau)浓度有8个时间点较对照组升高(P<0.05或P<0.01)。美多芭高、低剂量组与模型组比较分别有5个和4个时间点Glu浓度降低、有7个和2个时间点GABA水平升高(P<0.05或P<0.01)。结论6-OHDA脑内灌流引起大鼠纹状体细胞外液氨基酸类神经递质变化,美多芭可以剂量依赖性地抑制其引起的Glu升高,并进一步增加GABA的浓度。     

大鼠脑微透析样品中左旋多巴、多巴胺及其代谢产物、羟自由基的测定

目的:建立快速、准确、同时测定大鼠脑微透析样品中左旋多巴(L-DOPA)、多巴胺(DA)及其代谢产物、羟自由基指标的高效液相色谱-电化学检测方法。方法:应用玻璃碳工作电极、银/氯化银(Ag/AgCl)参比电极、Antec Leyden BV C18分析柱,工作电压为0.52 V,单一流动相,检测大鼠脑微透析样品。结果:清醒自由活动大鼠纹状体微透析液中L-DOPA、DA及其代谢产物、羟自由基指标等10种物质在15 min内分离。标准曲线在一定浓度内线性良好。结论:所建方法可用于大鼠脑微透析样品中L-DOPA、DA及其代谢产物等的同时测定,为脑内L-DOPA药物浓度-药物效应-药物副作用同步研究提供可用的方法。     

帕金森病模型大鼠血液和纹状体细胞外液左旋多巴药动学同步研究

 目的 采用清醒自由活动大鼠血-脑双位点微透析采样的方法,同步探讨左旋多巴(L-DOPA在帕金森病(PD大鼠血液和纹状体细胞外液药物浓度随时间变化的规律。方法 SD大鼠随机分为5组,对照组、模型组、高剂量对照组、高剂量模型组和低剂量模型组,脑内注射6-羟基多巴胺(6-OHDA造模,血-脑双位点微透析采样,分别用高效液相-荧光法(HPLC-FLD、高效液相-电化学法(HPLC-ED检测血、纹状体细胞外液L-DOPA浓度。应用DAS软件拟合药动学参数。结果 PD大鼠腹腔给药后,药物迅速吸收入血,并通过血脑屏障进入纹状体。血液、纹状体细胞外液L-DOPA药-时曲线符合一室模型;纹状体细胞外液L-DOPA的达峰时间(t_max晚于血液,药-时曲线下面积(AUC_0-∞和达峰浓度(ρ_max小于血液。结论 清醒PD模型大鼠纹状体细胞外液药动学过程与血液相比存在时间滞后;血、脑药物浓度与给药剂量存在依赖关系,血液药动学行为不能完全反映纹状体中的情况。     

首乌方与美多芭同用对PD模型大鼠纹状体细胞外液神经化学物质的影响

目的:应用清醒自由活动大鼠脑内微透析及其相关检测技术,探讨首乌方与美多芭同时应用对帕金森病(PD)模型大鼠纹状体细胞外液神经化学物质的影响.方法:SD大鼠,随机分为对照组、模型组、美多芭组(30 mg· kg-1)、首乌方+美多芭组(含首乌方生药量18 g·kg-1+美多芭30 mg· kg-1).单侧纹状体内注射6-羟基多巴胺造模,清醒自由活动状态下脑内纹状体微透析采样,高效液相-电化学检测样品中多巴胺(DA)及其代谢产物高香草酸(HVA)、二羟基苯乙酸(DOPAC)、羟自由基指标(2,3DHBA,2,5DHBA)浓度.结果:与美多芭组相比,首乌方+美多芭组纹状体细胞外液DA水平升高,最高达(39.15 ±28.70) μg·L-1,DA变化率(△DA)降低;羟自由基指标在观察时间内始终低于美多芭组,有9个时间点P＜0.05.结论:首乌方可增加纹状体细胞外液DA递质的浓度并减少其波动;抑制羟自由基产生,对神经细胞具有保护作用.     

首乌方对帕金森病模型大鼠血液和纹状体细胞外液左旋多巴药代动力学影响的研究

目的:采用清醒自由活动大鼠血-脑双位点微透析采样的方法,同步探讨首乌方对左旋多巴(L-DOPA)在帕金森病(PD)大鼠血液和纹状体细胞外液药动学的影响。方法:SD大鼠分为4组,对照组、模型组、左旋多巴组、首乌方+左旋多巴组。脑内注射6-羟基多巴胺(6-OHDA)造模,首乌方+左旋多巴组提前ig首乌方煎剂(生药量18 g·kg-1.d-1)6 d,各给药组单次ip L-DOPA 24 mg·kg-1和盐酸苄丝肼6 mg·kg-1。血-脑双位点微透析采样,分别用高效液相-荧光法(HPLC-FLD)、高效液相-电化学法(HPLC-ED)检测血液、纹状体细胞外液L-DOPA浓度。应用DAS软件拟合药动学参数。结果:与左旋多巴组相比,首乌方+左旋多巴组血药浓度在6个时间点升高,纹状体细胞外液药物浓度在给药后15 min时降低(P<0.05)。左旋多巴组、首乌方+左旋多巴组血液药动学参数分别为:AUC(1 627.7±420.6)mg.L-1.min-1,(2 626.4±980.6)mg.L-1.min-1;Tmax30 min,(37.5±8.2)min,MRT(0-t)(71.98±3.19)min,(83.44±9.53)min。纹状体细胞外液药动学参数分别为:Tmax(50.0±15.5)min,(81.0±27.3)min,MRT(0-t)(68.7±15.34)min,(107.9±26.7)min。与左旋多巴组相比,首乌方+左旋多巴组血液AUC增加(P<0.05),Tmax延后(P<0.05),MRT(0-t)延长(P<0.05)。纹状体细胞外液Tmax滞后(P<0.05),MRT(0-t)延长(P<0.05)。结论:首乌方可减慢L-DOPA消除,增加血液L-DOPA的吸收,减少纹状体L-DOPA药物浓度波动。     

帕金森病6-OHDA模型大鼠左旋多巴血药浓度与纹状体细胞外液氨基酸类递质结合研究的方法

目的建立对清醒自由活动的帕金森病模型大鼠进行左旋多巴(L-DOPA)血药浓度与纹状体细胞外液氨基酸类神经递质水平同步动态监测、结合研究的方法。方法 SD大鼠,脑内注射6-羟基多巴胺(6-OHDA)造模,血、脑双位点微透析采样、高效液相-荧光方法(HPLC-FLD)检测相关物质的浓度。结果大鼠腹腔给药吸收迅速,L-DOPA药时曲线符合一室模型;美多巴高剂量组的AUC、Cmax明显高于美多巴低剂量组(P<0.05或P<0.01)。与对照组相比,模型组大鼠纹状体细胞外液谷氨酸(Glu)水平明显升高,γ-氨基丁酸(GABA)水平明显降低;美多巴投药改善了6-OHDA导致的脑内氨基酸递质紊乱(P<0.05或P<0.01)。相同时间点血中L-DOPA浓度与脑内Glu/GABA值进行回归分析,r2值为0.7950。结论采用血、脑双位点微透析采样、HPLC-FLD检测技术,实现了对清醒自由活动大鼠L-DOPA血药浓度与纹状体细胞外液药效指标同步、动态的观察,提供了反映L-DOPA血药浓度-纹状体效应-时间三维关系的直接依据。     

多位点微透析技术在药代动力学研究中的应用

微透析(MD)作为一种活体生物取样技术,可以在不同组织、不同器官或同一器官不同部位进行化学取样,为阐明药物的体内过程、作用机制以及靶向性提供依据。本文介绍近年来有关多位点微透析技术在药代动力学研究领域中的应用现状和重大进展。     

清开灵注射液引发Beagle犬类过敏反应的实验研究

目的研究5个不同厂家生产的清开灵注射液及清开灵注射液各组分和辅料静脉注射的致敏性。方法一次性给予Beagle犬静脉恒速注射5种厂家生产的清开灵注射液及其各组成成分和辅料,观察给药后Beagle犬的行为学变化,检测血中组胺、IgE、IgG、IgM、嗜酸粒细胞阳离子蛋白(ECP)和白细胞介素-4(IL-4)的含量变化。结果根据行为异常评分和组胺、IgE、IgG、IgM、ECP和IL-4等含量变化,有3个药厂生产的清开灵注射液及栀子提取物和胆酸综合判断为类过敏反应阳性。结论3个药厂生产的清开灵注射液可引起类过敏反应,而栀子提取物和胆酸可能是引起类过敏反应的有关物质。