茉莉花MVD基因及其启动子的克隆与表达

根据茉莉花转录组数据,采用RT-PCR技术,克隆了茉莉花甲羟戊酸焦磷酸脱羧酶(MVD)基因,命名为JsMVD(GenBank登录号为MH311041.1).采用染色体步移技术分离JsMVD基因5′端上游调控序列,通过实时荧光定量PCR技术检测JsMVD基因在茉莉花植株不同组织及不同激素处理下的表达水平.测序结果表明,JsMVD基因全长cDNA序列的长度为1 500 bp,包含长度为1 269 bp的开放阅读框(ORF),共编码422个氨基酸,亚细胞定位预测该蛋白可能位于细胞质上.JsMVD蛋白含有GHMP激酶N-端和C-端保守结构域,具有多个保守氨基酸残基及ATP结合位点,与野生油橄榄的相似性最高,相似系数达到88%,且进化树显示两者的亲缘关系最近.JsMVD基因5′端启动子序列长度为893 bp,该调控序列包含多种植物激素响应元件和光响应元件.实时荧光定量PCR技术检测结果表明,JsMVD基因在成熟花中的表达量最高,从高到低依次为成熟花、花蕾、茎、叶、根,且受GA、IAA和ABA不同程度的诱导.     

新制造环境对成本会计的影响及对策

随着以计算机为代表的信息技术不断发展,资源需求、制造资源计划、信息化集成生产、快速生产方式等信息系统逐渐普及和推广,企业迎来了新的发展挑战.在当前生产环境下,企业开始大量采用现代科技生产技术,生产方式和管理环境的巨大变革,对企业成本会计管理也提出了新的挑战.本文首先分析了当前企业生产环境特点和组成要素,阐述了现代生产环境对成本会计管理的影响,并从这种影响分析出发,针对现代成本会计发展方向做出展望,并进一步提出改进成本会计管理对策和建议,从而不断促进成本会计管理理论健康发展.     

VC对微波降解蓝莓提取物矢车菊素-3-葡萄糖苷的影响

将不同浓度（0.8、0.4、0.2 mg/L）蓝莓提取物矢车菊素-3-葡萄糖苷分别与0.8 g/L的VC混合,在70℃、400 W、1 000 r/min条件下微波处理10 min,以不加VC为对照,采用pH示差法测定各处理中矢车菊素-3-葡萄糖苷的含量,并研究不同微波功率、温度以及时间下VC对矢车菊素-3-葡萄糖苷的保护作用。结果表明,矢车菊素-3-葡萄糖苷降解率随着微波温度、功率以及时间的增加而增加,VC对不同处理条件下的微波降解矢车菊素-3-葡萄糖苷均有一定的保护作用,保护率在5%~10%。该结果可为微波加热食品中活性组分的保护提供一定的理论依据。     

茶树甲羟戊酸激酶基因CsMVK克隆及表达特性分析

[目的]克隆茶树甲羟戊酸激酶基因(CsMVK),分析其生物学信息及在不同组织及乌龙茶做青过程中的表达特性,为研究茶叶加工过程中香气形成机制提供参考.[方法]RT-PCR扩增CsMVK基因,应用生物信息学软件对其编码蛋白(CsMVK)的氨基酸序列进行预测分析,通过实时荧光定量PCR(qPCR)分析CsMVK在茶树不同组织及乌龙茶做青过程中的表达特性.[结果]克隆获得的CsMVK基因(GenBank登录号MF668187)全长1455 bp,开放阅读框(ORF)长度为1164 bp,编码387个氨基酸,蛋白质分子量41.18 kD,理论等电点(pI)5.88.CsMVK蛋白具有GHMP_kinases_N domain和GHMP_kinases_C domain 2个功能结构域,定位于细胞质中,不存在跨膜结构和信号肽.系统发育进化树分析结果显示,CsMVK与三七、常春藤的MVK聚为一类,表明茶树与三七、常春藤的亲缘关系最近.qPCR检测结果显示,CsMVK基因在果实中的表达量显著高于其他组织(P<0.05,下同),在不同组织中的表达量排序为:果实>根>叶>茎>花;在乌龙茶做青过程中,从鲜叶到晒青叶,CsMVK基因的表达量上升,晒青到一摇过程中表达量下降,经过3次摇青,其表达量持续升高并在杀青前达最大值,与其他做青阶段差异显著.[结论]CsMVK基因表达与茶叶香气品质形成有关.     

茶树脂肪酸去饱和酶家族基因的克隆与表达分析

以茶树品种‘铁观音’为试材,利用RT-PCR技术克隆得到5个脂肪酸去饱和酶（fatty acid desaturase,FAD）家族基因的cDNA序列,分别命名为CsFAD2-2、CsFAD3、Δ7-CsFAD、Δ8-CsFAD和CsFAB2,其编码序列长度1 137 ~ 1 320 bp。系统发育与基序分析结果表明,茶树FAD成员来自4个亚家族,即ω3/ω6-FAD亚家族、Δ7/Δ9-FAD亚家族、Front end FAD亚家族和FAB亚家族。同一亚家族成员的保守基序一致,而不同亚家族的保守基序存在较大不同。荧光定量PCR结果表明,5个CsFAD家族基因都显著响应低温诱导,Δ8-CsFAD对低温胁迫响应最强烈,表达水平上调千倍;外源ABA处理后,除CsFAD3外,其他4个CsFAD基因的表达均上调2倍以上;干旱胁迫下,5个CsFAD中CsFAD2-2、Δ7-CsFAD和Δ8-CsFAD表达水平都上调1.5倍以上,其中Δ8-CsFAD的表达上调最大,达5.5倍,而CsFAD3和CsFAB2的表达受到干旱处理抑制显著下调。克隆并分析Δ8-CsFAD启动子,发现存在多种与逆境胁迫响应相关的顺式元件。烟草亚细胞定位观察表明Δ8-CsFAD定位于细胞膜。根据上述结果推测5个CsFAD可能参与茶树抗逆响应,尤其是Δ8-CsFAD,可能通过调控茶树细胞膜不饱和脂肪酸的合成进而影响茶树的抗逆性。     

融资融券对我国证券市场的影响及风险防范措施探讨

融资融券，又称证券信用交易，是市场经济环境下证券交易的一种重要形式，具有对冲风险、促进证券市场协调发展的积极效应。融资融券业务的推出对我国证券市场乃至整个金融市场的发展有着重要的现实意义，并产生了积极的影响：使证券公司拓宽了融资渠道，积极创造新的盈利模式；使证券市场的流动性增加，市场定价更趋合理；使货币政策传导机制更加完善。与此同时，开展融资融券业务也存在特有的风险，因此应积极开展投资者适当性管理工作，建立预警补仓制度和强制平仓制度以及风险管理量化指标体系，从而有效防范风险，促进证券市场乃至整个金融系统的安全运行与健康发展。     

我国网络银行面临的问题与发展路径探析

网络银行是依托信息技术和各类网络载体而兴起的一种新型银行服务形态,以网上银行、电话银行、手机银行等为典型代表,具有便利、实时、快捷等特点。在网络经济的巨大推动下,我国网络银行业务呈现出爆炸式增长,但是其发展不均衡,整体发展水平较低,与国外的差距较大,仅仅处于初级阶段。我国网络银行业务同质化现象较为严重,创新能力不足,不能满足市场需求,同时还面临社会信用、法律规范、网络安全等诸多问题。因此,我国商业银行在发展网络银行业务时,应积极探寻发展路径,充分发挥自身特有的优势,进行资源整合,找准发展方向,注重业务创新,加强技术更新,强化安全防范,从而推动我国网络银行的健康、持续发展。     

茉莉花MK基因及启动子克隆与表达分析

甲羟戊酸激酶在植物萜类化合物合成中具有重要作用。本研究以茉莉花转录组测序数据为基础,利用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,从双瓣茉莉花中获得甲羟戊酸激酶(mevalonate kinase,MK)基因,命名为JsMK(GenBank登录号为MH311040)。测序结果显示JsMK全长cDNA为1608 bp,包含开放阅读框(ORF)1164 bp,编码387个氨基酸。生物信息学分析结果表明该基因编码的蛋白可能定位于细胞质中,为非亲水性稳定蛋白,含有与其他MK蛋白所共有的3个保守区,以及GHMP家族特有的N端保守区和C端保守区。Blast比对和系统进化树分析结果表明,JsMK蛋白与野生油橄榄、长春花等多种植物的MK蛋白同源性较高。采用染色体步移技术(Genenome walking technique)扩增MK基因5’端上游调控序列,获得709 bp启动子序列,PlantCare分析表明该序列含有大量基本顺式作用元件TATAbox、CAATbox,还存在生长素(IAA)、茉莉酸甲酯(MeJA)、脱落酸(ABA)等激素响应激素及多个光响应顺式调控元件。利用实时荧光定量PCR检测Js MK在IAA、MeJA、ABA处理下的表达水平。结果表明,JsMK同时受IAA、MeJA及ABA不同程度的诱导表达,其中MeJA对其诱导最明显。本研究通过从茉莉花中克隆并分析JsMK基因及其启动子序列,为进一步研究JsMK基因在萜类合成调控的功能提供科学依据。     

白茶实时荧光定量PCR分析中内参基因的筛选与验证

利用GeNorm,NormFinder,BestKeeper软件对茶树不同叶位及白茶萎凋过程中7个候选内参基因的表达稳定性进行分析。获得3个稳定性较好的内参基因β-Actin、GAPDH和RUBP,RUBP适合作为白茶萎凋过程叶片荧光定量PCR的内参基因,β-Actin适合作为白茶不同叶位叶片荧光定量PCR的最佳内参基因。因此,在白茶萎凋过程中,使用GAPDH+RUBP组合作为内参基因进行荧光定量PCR检测。     

乳过氧化物酶的特性及其在羊乳产业中的应用

羊乳富含维生素和蛋白质等营养物质,易被人体消化吸收,却也极利于微生物的生长,如何使用安全、便捷、成本低廉的保鲜方法促进羊乳产业的发展是必须要解决的现实难题。本文从乳过氧化物酶（lactoperoxidase,LP）的结构特性、组成成分、抑菌机理、热力学特性以及稳定性等方面进行论述,并综述了LP在羊乳产业中用于保鲜、检测对原料乳、干酪和发酵型乳制品的影响,为了解LP在羊乳产业的发展与应用提供参考。