含Cremophor RH40的自微乳化给药系统对大鼠体内CYP3A酶的抑制作用

［摘要］目的考察包含表面活性剂Cremophor RH40的自微乳化给药系统（SMEDDS）对大鼠体内细胞色素P450（CYP3A)活性的影响。方法以咪达唑仑（MDZ）为模型药物,采用高效液相色谱（HPLC）法测定MDZ及其活性代谢物1’ 羟基咪达唑仑在大鼠体内的血药浓度,并计算其药动学参数,考察MDZ自乳化微乳对大鼠体内CYP3A活性的影响,同时采用蛋白免疫印迹法检测上述制剂对大鼠肠黏膜上CYP3A蛋白表达的影响。 结果MDZ微乳的口服生物利用度为MDZ片 的3.14倍,且显著降低1′ 羟基咪达唑仑与咪达唑仑血浆浓度 时间曲线下面积（AUC）0 ∞的比值（由0.25减少到0.11,P＜0.05）;MDZ自微乳化制剂还可显著延长MDZ在体内的平均滞留时间（MRT）及半衰期（t1/2）［MRT由（0.63±0.13） h延长至（1.23±0.38） h; t1/2由（0.33±0.11） h 延长至（0.65±0.25） h, P＜0.05］;相对于MDZ片,SMEDDS口服给药后,肠道CYP3A的蛋白表达水平显著降低。结论含有Cremophor RH40的SMEDDS能抑制大鼠体内CYP3A的代谢,从而提高CYP3A底物药物的口服生物利用度。     

伊曲康唑Pluronic P123聚合物胶束的制备工艺研究

 目的 制备Pluronic P123为载体的伊曲康唑胶束给药系统。方法 采用薄膜水化法制备载药胶束,考察处方因素及工艺条件对载药共聚物胶束的包封率及载药量的影响,并采用三因素、五水平的星点设计-效应面法优化处方。动态光散射法测定胶束粒径,并对载药胶束的体外溶出度进行了测定,HPLC 法测定胶束的载药量和包封率。结果 制得的载药胶束包封率为60.23%,载药量为1.12%,粒径为30～40 nm。载药胶束在模拟的人工胃液和人工肠液中都可以快速溶出,但市售SporanoxTM胶囊的溶出行为却与溶出介质相关。结论 本实验制备以Pluronic P123为载体的伊曲康唑胶束给药系统工艺简单可行,为其进一步研究奠定了基础。     

非洛地平缓释片在健康志愿者体内的生物等效性研究

目的建立测定血浆非洛地平浓度的高效液相色谱-质谱串联法,研究非洛地平缓释片的相对生物利用度及生物等效性。方法采用双周期交叉试验方法,20例男性健康志愿者分别单剂量口服非洛地平缓释片试验药或对照药。采用高效液相色谱-质谱串联法测定血浆非洛地平浓度,用DAS2.0软件对两药进行等效性评价。结果试验药与对照药的主要药动学参数:血药峰浓度(Cmax)分别为(2.15±0.63)和(2.29±0.63)ng.mL-1;达峰时间(tmax)分别为(6.33±1.57)和(6.68±1.32)h,半衰期(t1/2)分别为(18.22±2.75)和(19.04±2.27)h,药物浓度-时间曲线下面积(AUC0-48)分别为(58.11±5.15)和(61.13±6.31)ng.mL-1.h。受试制剂对参比制剂平均相对生物利用度F为(95.06±8.42)%。结论两种非洛地平缓释片生物等效。     

叶酸复合物在肿瘤靶向治疗中的应用

叶酸受体是一种糖蛋白受体,目前已知它在一系列肿瘤部位过度表达,如卵巢、子宫颈、子宫内膜、肾、乳腺、脑、肺、骨髓、间皮等,特别是在肿瘤晚期或者已经产生耐药性的部位,而在正常组织中很少或几乎不表达。因此,用一般方法难以克服的肿瘤有可能极易被叶酸导向药物所攻克。经过十多年的研究,叶酸复合物的技术已被公认为具有巨大的潜在治疗价值,将叶酸复合物用于肿瘤靶向治疗正成为当今研究的热点之一。本文介绍了叶酸与细胞毒药物、脂质体、基因等形成的复合物的研究进展和概况。     

国产右旋布洛芬缓释胶囊在大鼠体内的药动学及生物利用度研究

目的 考察自制和市售右旋布洛芬缓释胶囊在大鼠体内的药动学性质与生物等效性.方法建立反相高效液相色谱法,测定右旋布洛芬在血浆中的浓度,进行药动学和相对生物利用度研究.结果自制和市售右旋布洛芬缓释胶囊的主要药动学参数C_max分别为(1 173.87±281.68),(1 186.06±268.79) μg.mL^-1;AUC_(0-t)分别为(4 276.53±578.59),(4 489.83±645.73) mg.L^-1.h;AUC_(0-∞)分别为(5 095.58±683.82),(5 466.37±753.35) mg.L^-1.h;t_max分别为(1.33±0.26),(1.58±0.49) h;各参数间比较差异无统计学意义(P>0.05),以AUC_(0-∞)计算自制右旋布洛芬缓释胶囊的相对生物利用度为(93.2±12.5)%.结论自制右旋布洛芬缓释胶囊与市售制剂之间生物等效.     

普流罗尼克对P-gp底物罗丹明123在Caco-2细胞蓄积的影响

 目的 研究普流罗尼克（Pluronic F127,F68,P85,P123对小肠P-糖蛋白（P-gp的调控作用。方法 采用MTT法检测不同质量浓度的Pluronic对Caco-2细胞生长抑制作用;以P-gp底物罗丹明123(R-123为荧光探针,评价各种Pluronic辅料和P-gp抑制剂维拉帕米对R-123细胞蓄积的影响,细胞内的R-123浓度采用高效液相-荧光检测。同时考察了Pluronic P123和F127对P-gp ATP酶活性的影响。结果 除了L61,经Pluronic处理后的细胞生存率都在80％以上,表明在蓄积实验中的细胞活性没有受到Pluronic的影响。在抑制剂维拉帕米和不同浓度的Pluronic(0.001~50 mg·mL-1作用下,可在不同程度上提高R-123在Caco-2细胞的蓄积作用,同时具有浓度依赖性,在接近或超过临界胶束浓度(CMC后,细胞蓄积达到最大值,然后随着Pluronic浓度的继续增大,蓄积作用又逐渐减弱。不同浓度的Pluronic P123和F127对P-gp ATP酶活性具有抑制作用。结论 蓄积实验结果表明,Pluronic F127,F68,P85和P123可以通过抑制P-gp的作用改善药物的吸收,抑制P-gp ATP酶活性可能是原因之一。因此,联合使用Pluronic,有望提高P-gp底物药物的口服生物利用度。     

Preparation of anti-HER2 monoclonal antibody-paclitaxel immunoconjugate and its biological evaluation

Anti-HER2 monoclonal antibody (Sc7301)-paclitaxel (TAX) immunoconjugate was prepared and its specific binding to tumor cells was investigated in this study.Sc7301 was conjugated to　TAX by the active es...     

Inhibitive effect of cremophor RH40 or tween 80-based self-microemulsiflying drug delivery system on cytochrome P450 3A enzymes in murine hepatocytes

This study examined the effect of self-microemulsiflying drug delivery system (SMEDDS) containing Cremophor RH40 or Tween 80 at various dilutions on cytochrome P450 3A (CYP3A) enzymes in rat hepatocytes, with midazolam serving as a CYP3A substrate.The particle size and zeta potential of microemulsions were evaluated upon dilution with aqueous medium.In vitro release was detected by a dialysis method in reverse.The effects of SMEDDS at different dilutions and surfactants at different concentrations on the metabolism of MDZ were investigated in murine hepatocytes.The cytotoxicity of SMEDDS at different dilutions was measured by LDH release and MTT technique.The effects of SMEDDS on the CYP3A enzymes activity were determined by Western blotting.Our results showed that dilution had less effect on the particle size and zeta potential in the range from 1:25 to 1:500.The MDZ was completely released in 10 h.A significant decrease in the formation of 1’-OH-MDZ in rat hepatocytes was observed after treatment with both SMEDDS at dilutions ranging from 1:50 to 1:250 and Cremophor RH 40 or Tween 80 at concentrations ranging from 0.1% to 1% (w/v), with no cytotoxicity observed.A significant decrease in CYP3A protein expression was observed in cells by Western blotting in the presence of either Cremophor RH40 or Tween 80-based SMEDDS at the dilutions ranging from 1:50 to 1:250.This study suggested that the excipient inhibitor-based formulation is a potential protective platform for decreasing metabolism of sensitive drugs that are CYP3A substrates.     

紫杉醇与抗HER2单抗Sc7301偶联物对肿瘤细胞株的体外杀伤效应

目的：研究紫杉醇（TAX）与抗HER2单抗Sc7301偶联物对HER2表达阳性肿瘤细胞的特异性杀伤作用，为进一步研究卵巢癌靶向治疗奠定基础。方法：采用活化酯法制备紫杉醇与抗HER2单抗Sc7301的免疫偶联物；ELISA法检测TAX与Sc7301偶联后抗体活性的变化；四氮唑蓝（MTT）法观察TAX—Sc7301偶联物的抗肿瘤作用；流式细胞仪检测凋亡细胞比率。结果：偶联后抗体的活性保持为原有活性的54．8％以上，抗体的活性基本保持；偶联物NTT试验中，对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞的抑制作用为相同剂量TAX与Se7301的混合物的2～3倍，而对HER2表达阴性的人肝癌细胞株HepO2的作用则较混合物相差不大；流式细胞仪观察随偶联物浓度的升高，细胞的亚二倍体凋亡峰越明显。结论：TAX与Sc7301的偶联物在体外可选择性杀伤HER2表达阳性的肿瘤细胞。     

紫杉醇联合抗HER2单抗对人卵巢癌细胞株A2780的作用

目的:体外观察紫杉醇及抗HER2单抗对人卵巢癌细胞株A2780增殖的抑制作用及两者联合应用时的抑制率及相互作用.方法:采用MIT法测定两者单用或合用对A2780的增殖抑制率,利用中效原理判定两药合用的效果,用流式细胞仪观察细胞凋亡及细胞周期的变化.结果:两种药单独应用时随药物剂量增加,其效应也增加,紫杉醇的中效浓度为6.98 nmol·L-,抗HER2单抗的中效浓度为8.69 μg·ml-1;两药合用时它们的中效浓度为2.92 nmol·L-1 0.49 μg·ml-.大剂量(紫杉醇＞13.02 nmol·L-,抗HER2单抗＞2.17 μg·ml-1)合用时是拮抗作用(CI＞1),小剂量(紫杉醇＜13.02 nmol·L-,抗HER2单抗＜2.17 μg·ml-1)合用时是协同作用(CI＜1).结论:紫杉醇联合抗HER2单抗对人卵巢癌细胞株A2780的生长有抑制作用,它们合用时大剂量是拮抗,而小剂量则为协同作用.