用分子探针杂交法观测多次献血对造血系统的影响

目的建立非同位素标记的探针杂交测定外周血白细胞端粒DNA长度的方法,借此探讨无偿献血对献血者造血系统的影响。方法酚/氯仿提取基因组DNA,限制性内切酶消化,琼脂糖凝胶电泳,非同位素标记的探针Southern印迹杂交,化学发光X线片曝光显示杂交谱带,积分光密度扫描计算TRF值。结果所测样本获得了较好的低背景杂交谱带,测得35～40岁无偿献血组TRF值平均为11.73kb,相应无献血史对照组平均为11.78kb。结论建立了非同位素标记的探针检测端粒DNA的方法,用上述方法初步显示了固定的长期无偿献血并未对献血者的造血系统产生负面影响。     

“双一流”背景下医药高校师德师风建设策略

党二十大报告强调“立德树人”是高校建设的根本任务,“双一流”建设的根本任务是建立世界一流的高素质人才方阵,而培养具有国际竞争力的创新后备军、德才兼备的师资队伍是“深入实施人才强国战略”的重要保证。文章结合医药高校的特点,从价值观偏移、缺乏敬业精神、重科研轻育人、重实操轻医德培养四个方面,分析了“双一流”建设背景下医德、师德师风建设中存在的问题。然后,文章总结其他医药高校的成功经验,针对上述问题,从发挥教师主体作用、强化敬业精神以及育人使命并有效利用名师示范工程表率效应、建立平衡教研的多元业绩考核体系、构建监督防控体系四个方面,提出符合医药高校特点的实施策略,以期为医药高校“双一流”建设助推加力。     

改良的端粒DNA检测方法及其在无偿献血中的应用

目的 建立非同位素标记的探针杂交测定外周血白细胞端粒DNA长度的方法，并探讨其在无偿献血中的应用。方法 酚／氯仿提取基因组DNA，限制性内切酶消化，琼脂糖凝胶电泳，非同位素标记的探针Southern印迹杂交，化学发光X线片曝光显示杂交谱带，积分光密度扫描计算TRF值。结果 所测样本获得了较好的低背景杂交谱带，测得35～40岁无偿献血组TRF值平均为11．73kb，相应无献血史对照组平均为11．78kb。结论 建立了非同位素标记的探针检测端粒DNA的方法，用上述方法初步显示了固定的长期无偿献血并未对端粒的长度产生影响。     

基于微课的混合式教学模式设计与实践

混合式教学模式融合了传统教学和网络教学的优势,已成为现代教学发展的重要方向。从混合式教学设计、网络资源开发、混合式教学实践、教学效果分析等方面对基于微课的混合式教学模式进行深入探究。精炼生动的微课资源是混合式教学成功实施的保障。学生在线自主学习是混合式教学成功实施的前提;课前、课中、课后的无缝衔接,一体化的有机融合是混合式教学成功实施的核心;教师主导的学生之间激烈探讨是混合式教学成功实施的关键;混合式教学改革能够极大地激发学生的学习兴趣,提高了教学质量。     

EGFR/HER-2双受体酪氨酸激酶抑制剂拉帕替尼的研究进展

EGFR/HER-2是理想的抗肿瘤分子靶点。拉帕替尼(lapatinib)是口服的小分子EGFR/HER-2双受体酪氨酸激酶抑制剂,体内外的临床前试验证实了lapatinib的抗肿瘤活性,Ⅰ期临床研究显示了它的安全性,治疗侵袭、复发、炎性、脑转移乳癌的Ⅱ、Ⅲ期临床研究取得了可喜的成绩。随着对乳癌生物特性的理解,选择特异的肿瘤亚型(HER-2过表达),进行分子靶向治疗(例如lapatinib)正成为一种新的辅助治疗方案。     

核黄素联合紫外线A照射对血浆中伪狂犬病毒的灭活效果

目的考察核黄素联合紫外线A对血浆中伪狂犬病毒的灭活效果。方法以伪狂犬病毒为模拟病毒,以Vero细胞为培养细胞,用病毒感染细胞,制备病毒增殖液;分别采用5、10、15及20J/cm2联合核黄素处理血浆,观察处理前后血浆病毒灭活的效果,筛选灭活病毒合适的紫外线剂量;将含有伪狂犬病毒血浆的样本分为实验组:采用上述筛选的紫外线强度照射联合核黄素处理;对照组1:单独采用紫外线A照射;对照组2:单独采用核黄素处理;阴性对照组:未采用紫外线照射和核黄素处理;分别在实验前后采用96孔细胞病变法,对照细胞病变效应,根据Reed-Muench公式计算病毒滴度。结果采用不同强度的紫外线联合核黄素处理血浆,紫外线强度为15及20J/cm2的灭活血浆病毒的效果明显,处理后病毒滴度分别下降4.55和4.39logs;实验组和对照组1病毒滴度分别下降4.55和4.28logs,有统计学意义(P<0.05);对照组2病毒滴度降低1.93logs,没有病毒灭活效果。结论核黄素联合紫外线可灭活血浆中伪狂犬病毒,单独紫外线照射也具有灭活血浆伪狂犬病毒的效果;而仅单独采用核黄素处理而未联合紫外线照射,对血浆中伪狂犬病毒灭活效果不明显。     

肺癌A549耐药裸鼠移植瘤模型的建立

目的探讨肺癌A549耐药裸鼠移植瘤模型的建立方法,为克服肿瘤多药耐药新药的筛选提供体内研究的模型。为进行肿瘤的体内相关研究和抗癌药物的筛选提供实验基础。方法使用顺铂诱导肺癌A549细胞,以建立其多药耐药细胞株A549/DDP;MTT细胞毒实验检测细胞对顺铂的敏感性;皮下接种法建立裸鼠移植瘤模型;绘制移植瘤生长曲线,观察其增值特性。结果经过8个月的诱导建立了肺癌顺铂耐药细胞株A549/DDP;MTT细胞毒实验结果显示与A549细胞比较,A549/DDP细胞对顺铂约耐药8倍,并且A549/DDP耐药细胞建立的裸鼠移植瘤仍然保持对顺铂的耐药性;生长曲线结果显示A549/DDP细胞裸鼠移植瘤的增殖速度与A549细胞之间没有显著性差异。结论成功建立了肺癌A549/DDP耐药细胞裸鼠移植瘤模型,可为肺癌耐药的研究提供较理想的动物模型。     

氧化苏木素诱导人乳癌MCF-7细胞凋亡及其作用机制

【目的】 探讨氧化苏木素对人乳癌MCF-7细胞的凋亡作用及其相关作用机制。 【方法】 MTT实验检测氧化苏木素对MCF-7细胞和正常乳腺上皮细胞MCF 10A的细胞毒作用;Annexin V/PI双染,流式细胞仪检测细胞凋亡的发生;荧光染料DiOC6染色,流式细胞仪检测细胞内线粒体膜电位的变化;Western blot实验检测细胞浆细胞色素C及细胞内caspase-9和survivin蛋白的变化。 【结果】 氧化苏木素对人乳癌MCF-7细胞具有高效的细胞毒作用,而对正常乳腺上皮MCF 10A细胞毒性较弱,IC50值分别为(7.15 ± 0.43)μmol/L 和(33.56 ± 2.87) μmol/L;0、7.5、15、30 μmol/L的氧化苏木素处理MCF-7细胞48 h后,细胞的凋亡率从(3.37 ± 0.66)%依次升高到(16.8 ± 1.27)%、(31.31 ± 4.22)%、(51.23 ± 5.55)%;DiOC6染色流式细胞仪检测结果显示氧化苏木素可以剂量依赖性地降低线粒体膜电位;Western blot结果显示氧化苏木素诱发了线粒体内细胞色素C的释放和细胞内caspase-9蛋白的剪切激活,同时氧化苏木素也可剂量依赖性地降低survivin蛋白的表达。 【结论】 氧化苏木素可通过线粒体通路诱导MCF-7细胞凋亡,下调survivin蛋白可能是其诱导细胞凋亡的主要机制。     

无偿献血对骨髓造血干细胞的影响

目的:Southern印迹杂交测定外周血白细胞端粒DNA长度,观察无偿献血对骨髓造血干细胞的影响。方法:收集35～40岁有15次左右献血史者的血样,同年龄组无献血史者的血样与之对照,酚/氯仿提取基因组DNA,Southern印迹杂交,积分光密度扫描计算TRF值。结果:无偿献血组TRF值平均为11.76Kb,对照组平均为11.81Kb。经统计学分析P>0.05两组样本差异无显著性。结论:通过对两组样本端粒长度的检测未发现长期的无偿献血会对献血者的骨髓造血干细胞产生负面影响。     

常温保存期血小板数量及功能的变化

目的探讨保存期机采血小板数量及功能的变化。方法血细胞分离机采集血小板8人份,22℃振荡保存,分别在保存0、1、3和5d,在100级超净台内取样10ml,进行血小板计数、pH值、乳酸脱氢酶(LDH)、血小板凋亡数及CD62P表达的检测。结果在0、1、3和5d的Plt没有显著性差异;pH值比较,有显著性差异;0d与3d和5d相比,LDH有显著性差异;0d与第1、3、5d相比,血小板凋亡数有显著性差异;0d与1d、5d相比,CD62P表达有显著性差异。结论在血小板保存期,随着保存期的延长,机采血小板的pH值下降;LDH水平逐步增高;血小板凋亡数逐渐增高;CD62P的表达也逐渐增高,激活的血小板数增多。