麻杏石甘汤对流感病毒肺部感染模型肺组织TLR2/4-MyD88信号通路蛋白表达的影响

目的:从肺组织TLR2/4-MyD88信号通路蛋白表达水平探索麻杏石甘汤抗流感病毒效应机制.方法:经鼻腔接种建立流感病毒肺部感染模型,设正常对照组、模型对照组、奥司他韦组、抗病毒口服液组、麻杏石甘汤组.各治疗组经灌胃给药3、7d,常规法检测肺指数、肺指数抑制率;HE染色法观察肺组织的病理变化;免疫组织化学法和免疫印迹法...     

MIC 基因多态性与解脲脲原体感染的易感关联性研究

目的:研究MIC 等位基因多态性与解脲脲原体感染易感性之间的关联性。方法:采用PCR-SSP 和PCR-SBT方法对样本MIC 等位基因的多态性进行检测。结果:解脲脲原体患者中检出12 种MICA、5 种MICA-STR 和14 种MICB 等位基因;和对照组相比较,解脲脲原体患者组中MICA* 010 和MICB*009N 等位基因分布频率更高(MICA*010:OR=3.85,95%CI:2.12-6.99,Pc<0.05;MICB*009N:OR=3.22,95% CI:1.33-7.80,Pc<0.05),MICA-A5.1 和MICB*00502 等位基因分布频率更低(MICA-A5.1:OR=0.61,95%CI:0.40-0.94,Pc<0.05;MICB*00502:OR=0.58,95%CI:0.40-0.83,Pc<0.05),差异均具有统计学意义;基因型方面,MICA*010/010、MICA*01201/01201 纯合子分布频率更高(MICA*010/010:OR = 14.84,95%CI:1.90-115.9,Pc<0.05;MICA*01201/01201:OR=10.83,95% CI:1.35-86.79,Pc<0.05),差异均具有统计学意义;解脲脲原体患者中MICB*00502/00502 纯合子分布频率较高,但差异不具有统计学意义(Pc>0.05)。结论:MIC 等位基因多态性与解脲脲原体的易感性间存在关联性。     

青霉素诱导的大鼠癫痫模型中STAT3 及IL鄄6 表达

目的:通过构建青霉素诱导的大鼠癫痫动物模型,探讨STAT3 及IL-6 在青霉素诱导的癫痫大鼠模型中的表达。方法:腹腔注射不同剂量的青霉素,制备癫痫动物模型,观察各组大鼠脑电图及行为学,荧光定量PCR 方法检测各组动物IL-6 及STAT3 的mRNA 表达量;ELISA 法检测血清中IL鄄6 的分泌量; Western blot 检测各组动物STAT3 的蛋白表达。结果:500 U/ kg 和800 U/ kg 青霉素腹腔注射均出现癫痫行为学发作症状及典型的癫痫脑电波,癫痫发作率为100%;和对照组比较,模型组大鼠IL鄄6 以及STAT3 mRNA 水平明显升高,血清中IL-6 分泌增加,STAT3 蛋白表达水平无显著性差异,但p-STAT3蛋白表达水平显著增加。结论:在青霉素诱导的大鼠癫痫模型中,STAT3 及IL-6 起着重要的作用。     

基于JAK1/STAT1信号通路研究流感“肺脑传变”的分子机制及麻杏石甘汤干预作用

目的 基于Janus酪氨酸蛋白激酶1/信号转导和转录激活因子1（JAK1/STAT1）信号通路研究流感“肺脑传变”的分子机制,并进一步探讨麻杏石甘汤（MXSGT）的干预作用。方法 SPF级BALB/c小鼠100只,随机分为正常组、模型组、奥司他韦组、抗病毒颗粒组和MXSGT组,每组20只。除正常组常规饲养外,其余4组以A型流感病毒（IAV）滴鼻感染构建小鼠IAV肺炎模型,造模24 h后,各药物治疗组分别予以奥司他韦（21.63 mg·kg^-1·d^-1）、抗病毒颗粒（3.9 g·kg^-1·d^-1）、MXSGT（6.05 g·kg^-1·d^-1）灌胃,正常组和模型组以等量生理盐水灌胃,每天1次,连续给药3、7 d。苏木素-伊红（HE）染色观察肺、脑组织病理变化;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测肺、脑组织中IAV核蛋白（NP）及JAK1、STAT1 mRNA表达水平;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肺、脑组织中JAK1、STAT1蛋白表达水平;免疫组化法检测肺、脑组织中磷酸化（p）-STAT1表达水平;酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清中白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-10（IL-10）的水平。结果 与正常组比较,模型组小鼠肺组织及大脑皮质出现明显病理变化;肺部IAV NP mRNA相对表达量显著增加（P<0.01）;肺组织和脑组织中JAK1、STAT1 mRNA和蛋白表达水平明显增加（P<0.05,P<0.01）;肺组织和大脑皮质中p-STAT1表达水平明显增加（P<0.05,P<0.01）;血清中IL-1β表达量明显增加（P<0.05）。与模型组比较,MXSGT组小鼠肺组织及大脑皮质病理损伤减轻;肺组织IAV NP mRNA相对表达量显著降低（P<0.01）;肺组织和脑组织中JAK1、STAT1 mRNA和蛋白表达水平明显降低（P<0.05,P<0.01）;血清中IL-10水平显著增加（P<0.01）。结论 JAK1/STAT1信号通路异常活化可能是流感“肺脑传变”的分子机制之一,MXSGT作为有效的抗流感病毒中药复方,可通过调控该通路介导的细胞因子水平的变化缓解IAV肺部感染小鼠的脑组织病理损伤。     

麻杏石甘汤对流感病毒感染小鼠肠道菌群及趋化因子CCL5、CXCL10的影响

目的探索麻杏石甘汤(Maxing Shigan Decoction)通过影响小鼠肠道菌群组成及趋化因子产生而防治流感病毒感染的潜在机制。方法通过鼻腔接种法建立A型流感病毒感染小鼠模型,经ig给药3 d和7 d后,观察小鼠体质量等一般情况;HE染色检测结肠组织病理变化;免疫组化检测结肠组织趋化因子CCL5、CXCL10的表达;酶联免疫法检测结肠组织中CCL5、CXCL10含量,并取小鼠肠内容物进行16SrRNA基因V3～V4可变区测序、物种注释及聚类,进行Alpha多样性和Beta多样性分析,线性判别式分析[linear discriminant analysis(LDA)effect size,LEfSe]筛选组间差异物种,冗余分析及Spearman等级相关系数分析肠道菌群与CCL5、CXCL10的关联性。结果给药3 d后,模型组小鼠体质量下降(P0.01),肠黏膜固有层中炎性细胞明显浸润且高表达CCL5和CXCL10(P0.01),结肠组织匀浆中CCL5和CXCL10含量增加(P0.01);与模型组比较,各药物组小鼠体质量明显增加,炎性细胞浸润减少,CCL5、CXCL10阳性表达细胞减少,肠组织匀浆中CCL5、CXCL10含量降低,以奥司他韦组和麻杏石甘汤组差异显著(P0.05、0.01)。菌群多样性分析和物种差异分析结果显示,给药3 d后,模型组小鼠肠道菌群组成与对照组及各药物组存在明显差异。模型组小鼠变形菌门、埃希菌属相对丰度较对照组明显增加(P0.05),厚壁菌门、乳杆菌属、粪球菌属相对丰度明显降低(P0.05、0.01);与模型组比较,各药物组变形菌门、埃希菌属相对丰度降低(P0.05),奥司他韦组和麻杏石甘汤组厚壁菌门相对丰度显著增加(P0.01),抗病毒颗粒组颤螺旋菌属相对丰度增加(P0.05),麻杏石甘汤组乳杆菌属、粪球菌属相对丰度增加(P0.05、0.01)。给药7 d后,模型组小鼠结肠组织病变减轻,趋化因子表达下降,变形菌门、埃希菌属相对丰度较给药3 d后明显降低(P0.01);与模型组比较,各药物组疣微菌门相对丰度明显降低(P0.05、0.01),拟杆菌门相对丰度明显升高(P0.05)。关联性分析显示,小鼠结肠组织中CCL5、CXCL10含量与埃希菌属、克雷伯菌属、梭菌属、粪球菌属等相对丰度显著相关(P0.05、0.01)。结论 A型流感病毒感染可引起小鼠肠道菌群结构紊乱及免疫功能失衡,麻杏石甘汤通过调节肠道菌群结构并影响趋化因子的产生,对流感病毒引起的肠道免疫损伤有一定的保护作用。     

MICA基因多态性与肺癌的相关性研究

目的 研究海南汉族人群MICA基因的多态性与肺癌的相关性.方法 采用PCR-SSP和PCR-SBT方法对样本MICA基因的多态性进行检测分析.结果 肺癌患者中有1 1种MICA等位基因被检测出来,MICA* A5/010基因频率在肺癌组中明显增高(MICA* A5:OR=1.62,95％ CI:1.18～2.23,Pc ＜0.05;MICA *010:OR=6.13,95％ CI:3.5～10.75,Pc＜0.000).结论 MICA* A5/010基因可能与肺癌的易感性相关.     

结合网络药理学从JAK2/STAT3信号通路探讨麻杏甘石汤抗流感病毒的效应机制

目的结合网络药理学探索JAK2/STAT3信号通路在A型流感病毒感染所致肺组织损伤中的影响,并探讨麻杏甘石汤对该通路的干预作用。方法通过网络药理学方法筛选麻杏甘石汤作用于流感病毒的潜在靶点所富集的信号通路;以BLAB/c小鼠为研究对象,用A型流感病毒进行滴鼻感染,设置正常对照组、模型对照组、奥司他韦组、抗病毒颗粒组和麻杏甘石汤组,给予相应药物3、7 d后,处理动物。常规法检测小鼠体质量并计算肺指数,观察肺组织病理变化,RT-PCR法检测肺组织中JAK2、STAT3、IL^-1β、IL-4 mRNA表达水平,Western blot法或ELISA法检测肺组织中JAK2、STAT3、IL^-1β和IL-4的蛋白的表达水平;利用AutoDock Vina软件对STAT3与靶点化合物进行分子对接。结果麻杏甘石汤主要活性成分与流感病毒有110个交集靶点,富集于170条信号通路;麻杏甘石汤治疗组小鼠体质量增加,肺组织病理损伤减轻,肺指数下调,肺组织中JAK2、STAT3、IL-1βmRNA和蛋白的表达水平下调,IL-4 mRNA和蛋白的表达水平上调;STAT3与麻杏甘石汤中活性化合物甘草查尔酮A有较好的结合活性。结论麻杏甘石汤能有效地减轻肺部病理变化、调节免疫平衡,其可能的作用机制是通过抑制JAK2/STAT3信号通路的激活而缓解A型流感病毒感染所致的肺损伤。     

海南汉族人群MICB等位基因多态性与类风湿性关节炎相关性研究

目的 研究海南汉族人群MHC I类链相关基因B(MHC class I chain-related gene B,MICB)等位基因多态性与类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)的相关性.方法 用世界卫生组织推荐的标准盐析法提取外周静脉血DNA,采用PCR-序列特异性引物(PCR sequence specific primer,PCR-SSP)和PCR产物直接测序分型(PCR-sequence based genotyping,PCR-SBT)方法对样本MICB基因的多态性进行检测分析.结果 RA患者及对照组中共有10种MICB等位基因被检测出,两组中MICB*005:02等位基因频率分布最高,其频率为52.6％比42.0％,但MICB* 002等位基因频率在RA组明显低于对照组(13.1％比25.5％),差异具有统计学意义(Pc＜0.05),MICB* 014等位基因频率在RA组亦明显低于对照组(8.1％比15.3％),差异具有统计学意义(Pc＜0.05).结论 MICB* 002和MICB*014等位基因与RA的易感性之间存在负相关,可能是RA的保护性基因.     

从“寒湿伏燥”谈新型冠状病毒肺炎之病因病机

新型冠状病毒感染性肺炎属中医学"疫病"范畴,其病因病机复杂。本文结合疫情的变化特点及作者对相关疫病古籍文献的理解,从湖北省武汉市"暖冬"异常气候、独特地理位置、寒湿伏燥病机演变、寒湿伏燥所致临床证候、毒邪"三焦"传变以及正气与毒邪博弈6个方面探析新型冠状病毒感染性肺炎中医学病因病机,目的是希望能为中医药抗击疫情尽微薄之力。