复合抗氧化剂对荷瘤大鼠60Co γ射线局部照射时血液氧化损伤的影响

目的探讨荷瘤大鼠60Co γ射线局部照射时血液学氧化损伤以及复合抗氧化剂抗损伤作用. 方法采用Walker-256肿瘤细胞株接种大鼠皮下,得到实体瘤,摘除实体瘤分割成小块植入大鼠的右后腿皮下,制成大鼠荷瘤模型,将荷瘤大鼠分成3组,分别为肿瘤组、照射组和抗氧化剂保护组,同时选取正常大鼠作为阴性对照组. 抗氧化剂保护组每日给予复合抗氧化剂ig,分次对照射组和抗氧化剂保护组的荷瘤大鼠进行60Coγ射线局部照射4次,每次间隔1 wk,累计剂量为47 Gy,最后一次照射后7 d,活杀大鼠,取全血和血清测定过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)和总蛋白. 结果照射组的MDA含量显著高于非照射组和抗氧化剂保护组(347 μmol*g-1 vs 292, 305和196 μmol*g-1, P<0.05),复合抗氧化剂显示出良好的保护作用. 而照射组的抗氧化酶类如总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性显著低于非照射组和抗氧化剂保护组(3.65 μkat*g-1 vs 4.05, 4.82和4.70 μkat*g-1, P<0.05),CAT的活性在照射组显著低于肿瘤组和抗氧化剂保护组(362 K*g-1 vs 677和672 K*g-1, P<0.05). 结论 60Co γ射线局部照射可以产生自由基引发的全身氧化损伤,高效的复合抗氧化剂可以起到有效的保护作用.     

小鼠光气染毒对肺脏细胞的凋亡作用

背景与目的:小鼠原代肺Ⅱ型细胞的分离、培养方法的建立,探讨光气对肺水肿小鼠的肺脏细胞凋亡的诱导作用.材料与方法:12只二级BALB/c小鼠,雄性,随机分为2组:正常对照组(6只)和染毒组(6只).正常对照组小鼠以空气为对照,染毒组小鼠给予11.9 mg/L剂量的光气,时间为5 min.染毒后4 h,分离、培养肺Ⅱ型细胞,电镜观察两组小鼠肺Ⅱ型细胞、肺Ⅰ型细胞、嗜酸性粒细胞、巨噬细胞、淋巴细胞和纤毛细胞凋亡情况.结果:单宁酸染色和电镜鉴定培养细胞为小鼠原代肺Ⅱ型细胞;小鼠给予11.9 mg/L的光气染毒5 min,电镜显示光气染毒肺水肿小鼠原代肺Ⅱ型细胞出现凋亡小体,肺Ⅱ型细胞核染色质呈现月牙型,嗜酸性粒细胞、巨噬细胞、淋巴细胞和纤毛细胞均出现凋亡征象.结论:建立了小鼠原代肺Ⅱ型细胞的分离、培养方法,证明光气染毒可造成肺水肿小鼠肺脏细胞发生凋亡.     

芦荟对大鼠肝微粒体脂质过氧化损伤体外模型的影响

目的: 探讨芦荟的抗氧化作用及其剂量效应关系。方法: 通过大鼠微粒体的提取,制备了VC/Fe2+和过氧基异丙苯(CHP)脂质过氧化损伤模型,检测不同剂量芦荟轧汁干预对丙二醛(MDA)含量变化的影响,观察芦荟清除活性氧的抗氧化作用。结果: 在CHP微粒体脂质过氧化激发模型中,各芦荟干预组的MDA含量均较对照组显著降低(P﹤0.01),在VC/Fe2+模型中,低剂量芦荟轧汁干预组与高剂量干预组MDA含量较阳性对照组显著下降(P﹤0.05),并且高剂量组降低更加明显(P﹤0.01)。但中剂量芦荟轧汁组MDA含量反而较阳性对照组有一定的升高。结论: 芦荟轧汁在抗氧化方面存在着双向效应,在一定剂量范围内有着较好的抗氧化作用,可能是芦荟的医疗保健功效的机制之一;但特定的剂量又可激发活性氧的生成。     

氯气致急性肺损伤机制及保护药物的研究

目的 氯气是一种在工业生产以及环境污染中常见的吸入性刺激性毒剂。急性氯气暴露会导致明显的肺部损伤，包括呼吸道黏膜脱落、肺水肿，甚至引起死亡，但损伤机制不清楚。目前尚无有效的临床救治药物。丙酮酸乙酯（EP）是一种稳定的丙酮酸代谢产物，有重要的抗炎抗氧化特性，在脓毒血症以及系统性炎症中能够显著降低死亡率。本研究中给予氯气染毒大鼠EP治疗，观察对肺损伤及肺组织氧化应激指标的影响，以探讨氯气致急性肺损伤机制及EP对肺损伤治疗作用。方法 30只SD大鼠随机分为阴性对照组，氯气染毒组和EP治疗组，共3组，每组10只动物。正常对照组大鼠以空气为对照，染毒组大鼠给予800 ppm的氯气，染毒时间为20 min，于染毒后6 h观察肺组织湿干比、肺组织病理以及血氧指数，并检测肺组织匀将中TBARs, GSH, GSSG含量以及SOD和CAT活性。结果 氯气染毒后肺组织湿干比显著增加，肺组织病理HE染色显示炎症细胞浸入，肺泡间水肿形成，并存在严重出血。血氧指数显著降低。表明氯气染毒后导致肺组织急性肺损伤出现。EP治疗后肺组织湿干比降低，组织病理表现显著改善，血氧指数增加。表明EP治疗显著改善了氯气导致的急性肺损伤。肺组织匀浆中TBARs, GSH显著降低，GSSG显著增加。而SOD和CAT活性显著降低。表明氯气导致了肺组织氧化应激发生。EP治疗显著改善了肺组织氧化应激状态。结论 氧化应激在氯气致肺损伤中发挥了重要作用，EP治疗通过改善肺组织氧化应激状态抑制了氯气导致的急性肺损伤发生。     

硫辛酸对细胞DNA损伤保护作用的初步研究

目的:用单细胞凝胶电泳技术(SCGE)研究不同浓度过氧化氢(H2O2)分别作用于HepG2细胞2 h后DNA损伤的剂量效应关系,同时观察硫辛酸对H2O2损伤细胞DNA的保护作用. 方法: 将细胞分为对照组、损伤组和保护组,依次加入不同浓度的H2O2及硫辛酸,应用SCGE检测H2O2引起细胞DNA损伤. 结果: 随着H2O2浓度的增加,细胞DNA的损伤程度加重,能使尾长、尾部DNA百分含量和尾距显著增加(P《0.05). 硫辛酸能使H2O2损伤细胞的尾长、尾部DNA百分含量和尾距均较对照组减少(P《0.05). 结论: H2O2对细胞DNA损伤具有剂量效应关系,硫辛酸可以有效地减少H2O2引起的细胞DNA的断裂损伤.     

维生素E和β-胡萝卜素对小鼠辐射损伤的联合作用

目的：观察维生素E和/或β-胡萝卜素对小鼠经^60Coγ射线辐射后的抗氧化损伤作用,为维生素应用于抗辐射损伤提供实验资料。方法：昆明种小鼠随机分为阴性对照组、辐照组（阳性对照组）、维生素E组（VE组）、β-胡萝卜素组（β-car组）以及维生素E＋β-胡萝卜素组（VE＋β-car组）,共5组。实验小鼠除阴性对照组外,其余各组均一次性给予4.5Gy的^60Coγ射线照射,照射后各组灌胃给受试物,V_E的剂量为30mg/（kg·d）、β-胡萝卜素剂量为20mg/（kg·d）,溶剂为经乙醇及高温处理过的市售菜籽油,对照组给予等体积的纯溶剂,连续灌胃3 d。其后摘眼球取血,处死小鼠并剖取肝脏。用酶联免疫法（ELISA）测定血清中视黄醇结合蛋白（RBP）水平,荧光法测定血清和肝脏的丙二醛（MDA）及还原型谷胱甘肽（GSH）含量。结果：与阴性对照组比较,辐射组RBP显著降低,血清和肝脏中的MDA水平显著升高、GSH水平显著降低（P均〈0.05）。给予VE和/或β-胡萝卜素使^60Coγ射线辐射引起的RBP下降得以回升,对血清和肝脏MDA的升高和GSH的下降均有一定的抑制作用。而VE单用组较VE与β-胡萝卜素联合组的作用效果更显著（P〈0.05）。结论：VE和β-胡萝卜素对^60Coγ射线辐射导致的脂质过氧化均有一定的抗氧化效果,但两者合用具有一定的拮抗作用。     

2型糖尿病大鼠模型的建立及其氧化应激特征分析

目的建立一种与人类2型糖尿病发病特点相似的动物模型。方法将体质量180～220g的SD雄性大鼠30只随机分为5组,分别为:对照组、高脂高糖组(HH)、高脂高糖+60Co照射组(HH+R)、高脂高糖除抗氧化剂组(HH-AntiO)及高脂高糖除抗氧化剂+60Co照射组(HH+R-AntiO)。HH+R组和HH+R-AntiO组于实验第15、30、60天给予剂量为4Gy的60Co-γ射线全身照射。在指定时间点检测各处理组动物的氧化应激指标,实验第60天时进行静脉糖耐量实验。大鼠出现胰岛素抵抗后,腹腔注射链脲佐菌素(20mg/kg),每周1次,连续4周,大鼠诊断为2型糖尿病后,进行胰腺灌流实验检测胰岛B细胞功能。整个实验进行过程中监测血糖和胰岛素水平。结果各组动物在不同时间点出现不同程度的氧化损伤改变。第60天时,除HH组外,其余各组动物均出现胰岛素抵抗。结合小剂量链脲佐菌素注射后,大鼠出现比较稳定的中度高血糖,其中HH-AntiO组大鼠对葡萄糖刺激的反应最为接近2型糖尿病患者胰岛素分泌的两相性特点;同时胰腺中胰岛素也有一定的贮存量,约为对照组的40%。结论与遗传因素在发病过程中起主导作用的转基因大鼠模型相比,本研究建立的大鼠2型糖尿病模型能更好地观察环境因素对机体的影响,可以用于预防和治疗2型糖尿病的药物研究。     

过氧化氢诱导同步化HepG2细胞DNA损伤和凋亡的敏感时相研究

目的:探讨过氧化氢(H2O2)诱导HepG2细胞的DNA损伤和凋亡效应在细胞周期不同时相的敏感性.方法:利用胸腺嘧啶核苷(TdR)阻断肝癌HepG2细胞于G1期末后,去除胸苷,培养不同时间,分别得到同步化的G1期、S期和G2/M期细胞,150 μmol/L的H2O2处理12 h,采用单细胞凝胶电泳技术(SCGE)测定细胞的DNA损伤;将各期细胞用200 μmol/L的H2O2处理,采用流式细胞术测定细胞凋亡.同时实验设立未同步化和正常对照组.结果:①分别获得 88.6%的G1期细胞、78.1%的S期细胞、66.8%的G2/M期细胞.② SCGE结果显示,同步化于S期和G2/M期细胞的DNA尾长明显增长,尾部DNA百分比含量和尾矩明显增加,其中S期细胞效应最为显著.③凋亡检测结果显示,同步化各组细胞的凋亡率明显高于未同步化组,以S期最为显著.结论:H2O2诱导HepG2细胞DNA损伤和细胞凋亡在细胞周期的不同时相效应敏感性不同,主要诱导S期细胞的DNA损伤和凋亡.     

荷瘤大鼠60Co局部照射后骨髓蛋白质的差异表达

目的:观察荷瘤大鼠受60Co局部照射后骨髓中蛋白质的差异表达.方法:制备荷瘤大鼠动物模型,60Co局部照射后分别提取荷瘤组和照射组大鼠骨髓蛋白质,运用双向聚丙烯酰胺凝胶电泳技术分析2组荷瘤大鼠骨髓蛋白质的差异表达.结果:荷瘤大鼠经60Co局部照射骨髓有24个蛋白点表达发生变化,其中出现2个新蛋白点,4个蛋白点表达量下降,1个蛋白点表达量升高,17个蛋白点在照射后消失.结论:60Co局部照射可诱导荷瘤大鼠骨髓蛋白质差异表达.     

医用抛射剂HFC-134a的急性毒性研究

目的： 研究国产医用抛射剂HFC-134a的急性毒性,为进一步扩大其在医疗上的应用提供可靠的实验安全数据。方法：将60只昆明小鼠分成5组,每组12只,雌雄各半,分设剂量为0、100、500、1 000、5 000 mg/m3,连续吸入HFC-134a气体染毒4 h,后常规饲料喂养,期间每天观察小鼠行为学改变,7 d后处死小鼠,比较染毒前后小鼠体质量变化,并行大体病理形态学检查,观察肝、肾、胰腺等脏器的变化。结果：与阴性对照组相比,染毒组小鼠体质量,行为及肝、肾、胰腺等脏器未发现异常改变。最高给药剂量(5 000 mg/m3吸入4 h)组,无动物死亡,平均体质量增至(26.3±5.8) g,无致炎、致敏和中毒反应。结论：在本实验条件下,医用抛射剂HFC-134a未发现明显的急性毒副反应,常规用药剂量安全。