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目的 制备结核分枝杆菌异柠檬酸裂解酶(isocitrate lyase,ICL)并建立ICL抑制剂筛选模型.方法 通过四步层析法或金属螯合层析法纯化大肠埃希菌BL21(DE3)表达的ICL,并以异柠檬酸为底物,用纯化的ICL裂解舁柠檬酸,生成乙醛酸可与苯肼反应生成苯腙,苯腙在324nm波长下产生光吸收峰,测定酶促反应体系在324nm波长下光吸收检测异柠檬酸裂解酶的活性,根据待测样品对酶活性的抑制程度,筛选异柠檬酸裂解酶抑制剂.结果 用金属螯和层析法得到纯度为90%、比活力为2.8U/mg的ICL,建立并优化ICL抑制剂筛选模型,模型的信噪比(S/N)远大于3,变异系数(CV)远小于10%.结论 通过金属螯合层析法获得了特异性高、稳定性好的ICL抑制剂筛选模型,该模型可有效的应用于异柠檬酸裂解酶抑制剂的高通量筛选. 相似文献
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共青团的思想政治引领作用是团员青年成长的重要组成部分,本文以中国医学科学院医药生物技术研究所为例,采取文献调查法、问卷调查法,访问调查法,分析出目前团组织在研究生思想政治工作中发挥作用十分重要。培养好团干部就是为团组织活动提供力量;协助党委开展思想政治工作,为中国共产党储备后备力量;与研究所的各个部门联合开展思想政治工作,全面深入的了解研究生思想动态。针对存在的问题,团组织倡导党建带团建的领导核心作用,优化内容引领,完善团组织建设,聚焦青年需求,优化成长环境,团组织为新时代研究生思想政治工作开创新局面不断努力,努力使青年成为担当民族复兴大任的时代新人而不懈奋斗。 相似文献
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目的分离纯化链霉菌I08A 1776发酵液中的水溶性抗耐药结核活性成分。方法利用离子交换、反相和亲水作用等多种色谱技术进行分离纯化,通过现代波谱学方法鉴定活性成分结构。结果分离得到3个水溶性活性成分,其结构分别确定为链丝菌素E(1)、Nβ-乙酰链丝菌素E(2)和Nβ-乙酰链丝菌素D(3)。链丝菌素E(1)对结核分枝杆菌H37Rv和临床分离耐药株的MIC值为0.25~1.0μg/mL。结论首次利用亲水作用色谱分离纯化微生物发酵液中的水溶性活性化合物。亲水作用色谱在微生物水溶性次级代谢产物的分离纯化中具有广阔的应用前景。链丝菌素E具有较强的体外抗耐药结核分枝杆菌活性。 相似文献
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目的:获得特异性靶向结核分枝杆菌泛酸合成酶的抑制剂,为开发针对该靶点的新型抗结核药物奠定基础。方法:重组表达结核分支杆菌H37Rv的泛酸合成酶,以酶活测定体系为基础构建高通量筛选模型,对筛选到的酶抑制剂进行酶促动力学研究,并运用分枝杆菌微量直观快速药敏试验法测定其体外抗结核活性。结果:得到了具有天然活性的泛酸合成酶,建立并优化了酶活测定体系及筛选模型,应用模型筛选得到了具有新结构的抑制剂。评价结果显示,该抑制剂具有显著的体外抗结核活性。结论:获得了具有显著体外抗结核活性的新型泛酸合成酶抑制剂。 相似文献