大肠杆菌分泌表达重组人肝再生增强因子的纯化、鉴定与活性研究

目的建立一种大肠杆菌分泌表达型重组人肝再生增强因子(rhALR)的纯化工艺,并对产品进行鉴定和活性研究。方法通过沉淀、色谱等方法的条件优化,建立纯化工艺,通过电泳、HPLC、N-末端氨基酸测序、免疫杂交、同位素掺入、全波长扫描等方法对纯化产品进行鉴定和活性测定。结果建立了rhALR的纯化工艺路线,40%(NH4)2SO4沉淀,Butyl-S FF疏水色谱,CM-S FF离子交换色谱,Superdex-75分子筛色谱纯化,重组蛋白质的纯度大于95%。该蛋白质稳定存在的形式为二聚体,其单体的相对分子质量为15 000。该蛋白质结合辅酶黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD),对损伤后的肝细胞具有明显的促进作用,明显优于以包涵体形式表达的rhALR。结论从大肠杆菌分泌表达体系能分离纯化得到高纯度、具有生物学功能和活性的rhALR,是潜在的临床治疗肝病药物。     

不同厂家双嘧达莫片的溶出曲线比较研究

目的：比较国产双嘧达莫片和原研制剂的溶出曲线相似性,为全面评价国产双嘧达莫片的质量提供参考与依据。方法：采用《中国药典》2010年版二部标准,测定了国内6家企业生产的制剂以及原研制剂的溶出度及溶出曲线,并以国内制剂为受试制剂,原研制剂为参比制剂,采用差异因子f1和相似因子f2比较其溶出曲线的相似性。结果：按照《中国药典》2010年版标准,受试制剂与参比制剂的溶出度均符合规定;采用相似因子法评价,受试制剂批内溶出曲线差异较大,受试制剂与原研制剂相比也无相似性。结论：相似因子评价法能够有效地反映和控制产品的内在质量,指导厂家改进生产工艺,提高产品质量。     

国产多潘立酮片溶出曲线评价研究

目的：测定19个厂家多潘立酮片在4种溶出介质中的溶出曲线,并与原研企业产品的溶出曲线进行比较,为全面评价药品质量的有效性提供依据。方法：采用桨法,以4种溶出介质各500mL为溶出介质,转速50r?min-1,采用紫外分光光度法测定溶出量绘制溶出曲线,并用f2因子法进行比较分析。结果：仅有1家企业的样品在4种溶出介质中与参比制剂完全相似,其它企业的产品都与参比制剂存在差异。结论：我国多潘立酮片的质量与参比制剂存在着较大的差距。建议与原研厂家溶出曲线不一致的相关厂家改进制剂的处方工艺以提高药品质量。     

黄曲霉毒素免疫亲和柱重复利用的探讨

目的考察中药材类别和亲和柱处理方法对黄曲霉毒素免疫亲和柱重复利用的影响,探讨亲和柱重复利用的可能性。方法通过在不同中药材中加入黄曲霉毒素对照品,经免疫亲和柱净化一HPLC-柱后光衍生分析,考察亲和柱重复利用后的回收率;考察不同的亲和柱处理方法对回收率的影响。结果中药材类别对免疫亲和柱重复利用的影响差异很大,部分种子类中药材使用后亲和柱重复利用3次回收率无明显变化,部分根茎类使用后,亲和柱回收率降低明显,特别是G：更易受影响。亲和柱处理时有机溶剂,空气暴露和复性时间均可影响柱子重复利用。结论中药材类别和处理方法对黄曲霉毒素免疫亲和柱的重复利用均有显著影响。     

酒石酸唑吡坦红外光谱鉴别方法的探讨

目的:研究不同样品前处理方法对酒石酸唑吡坦原料药红外光谱分析的影响。方法:考察了氨水沉淀、25℃减压干燥、甲醇转晶和100℃干燥四种样品前处理方法对国内不同厂家生产的酒石酸唑吡坦原料药红外光谱分析和差示扫描量热(DSC)分析的影响。结果:红外光谱和DSC分析表明,氨水沉淀法通过将酒石酸唑吡坦转化为唑吡坦游离碱的方式消除多晶现象,25℃减压干燥和甲醇转晶均不能消除酒石酸唑吡坦的多晶现象,从而使不同厂家生产的原料药的红外光图谱在O-H、C=O和C=N的伸缩振动等区域产生差异,且DSC曲线分析均显示多个吸热峰。100℃干燥法处理后,不同厂家生产的原料药的红外光图谱和DSC曲线一致性好,且样品仍以酒石酸唑吡坦形式存在。结论:100℃干燥法能够消除酒石酸唑吡坦多晶现象对红外图谱分析的影响,是一种准确、高效的酒石酸唑吡坦的红外鉴别方法。     

他克莫司滴眼液的抑菌效力测定研究

摘 要 目的：建立测定他克莫司滴眼液抑菌效力的方法。方法: 参照中国药典2015年版抑菌效力检查法,以金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、白色念珠菌和黑曲霉为试验菌株,对他克莫司滴眼液样品进行菌落计数方法适用性试验。按验证的方法测定各时间点存活的菌数,计算1 ml供试品中各试验菌所加的菌数及各间隔时间的菌数,并换算成lg值。结果:他克莫司滴眼液中抑菌剂的抑菌效力能达到中国药典2015年版“A”的标准。结论:采用该方法可有效测定他克莫司滴眼液的抑菌效力。     

UPLC法测定阿奇霉素片溶出度

摘 要 目的：建立UPLC法测定阿奇霉素片的溶出度。方法: 采用UPLC法测定阿奇霉素片溶出度,同时将所建方法的测定结果与药典方法进行比较。结果: 阿奇霉素浓度在13.86～332.59 μg·ml-1范围内与峰面积呈良好的线性关系（r=0.999 9）,平均回收率为99.9％,RSD为0.67％（n=9）。采用此法检测3批样品的溶出度,结果分别为99.6％,100.4％,102.8％,与药典方法所得结果一致。结论: UPLC法更简便快速、更科学且专属性强,可替代药典方法。     

复方三嗪芦丁片质量分析

目的：评价了复方三嗪芦丁片的质量现状及存在的问题。方法：按照法定标准对检品进行了检验,并进行了探索性试验研究。结果：按照法定标准检验,27批次样品均符合规定。按照探索性研究方法检测,合格率仅为26%。结论：本品质量状况较差,现行质量标准有待提高。     

阿奇霉素片溶出曲线一致性评价研究

摘要：目的 建立阿奇霉素片溶出曲线测定方法,评价国产仿制阿奇霉素片与原研药在4种不同pH的溶出介质中的体外溶 出行为。方法 采用桨法,转速为75r/min,分别以pH2.0盐酸溶液、pH4.5磷酸盐缓冲液、pH6.0磷酸盐缓冲液和pH6.8磷酸盐缓 冲液为溶出介质,溶出介质体积为900mL;采用UPLC法测定阿奇霉素溶出度,并计算累积溶出量,绘制溶出曲线;评价溶出 曲线的相似度。结果 在4种不同pH的溶出介质中,国产和原研阿奇霉素片均在15min内溶出量达到了85%以上,说明两批国内 仿制产品与原研药溶出行为基本一致,判定相似。结论 本方法适用于阿奇霉素片仿制药的溶出曲线测定,可为阿奇霉素片的 质量一致性评价提供参考。     

重组人粒细胞集落刺激因子宿主蛋白质含量的测定

目的根据重组人粒细胞集落刺激因子 (rhG CSF)的生产工艺 ,建立宿主蛋白质 (HCP)含量的测定方法。方法用不含rhG CSF基因的空质粒转染E .coli宿主 (BL2 1) ,按rhG CSF的生产工艺进行发酵、纯化、制备HCP。常规法免疫家兔 ,制备抗HCP多抗血清 ,经纯化后 ,过碘酸钠法标记辣根过氧化物酶 (HRP) ,建立双抗夹心酶标记免疫吸附测定 (ELISA)法测定HCP在rhG CSF原液中的含量。结果所建HCP测定方法能够测定 7.8～ 2 5 0ng/ml范围内的HCP。结论重组蛋白质药物宿主蛋白质含量测定应依据不同的工艺 ,制定不同的方法。