芥子碱对PC12细胞内游离钙升高的影响

目的:考察芥子碱对高钾除极和谷氨酸引起细胞外钙内流以及咖啡因和环匹阿尼酸(cyclopiazonic acid,CPA)引起细胞内钙释放所导致的PCI2细胞内游离钙升高的影响.方法:PCI2细胞用终浓度为5 μmol·L-1的钙离子荧光指示剂Fluo-3/AM于37℃避光负载孵育.细胞内游离钙([Ca2 ]i)用Victor Ⅱ1420多功能标记分析仪检测,以荧光强度(FI)表示.结果:当有外钙存在时,PCI2细胞静息[Ca2 ]i的FI值为(1188±163),75 mmol·L-1 KCl和10 mmol·L-1谷氨酸引起细胞外钙内流,使[Ca2 ]i增高,FI峰值分别增至(4270±982)和(3096±402).芥子碱(0.01,0.1,1.0,10,100 μmol·L-1)对静息[Ca2 ]i没有明显的影响,但浓度相关性地抑制高钾和谷氨酸诱发的[Ca2 ]i增高,抑制率分别为10.2%,39.5%,53.7%,71.8%.88.4%和30.3%,55.7%,68.5%,79.2%,94.1%.当无外钙存在时,PCI2细胞静息[Ca2 ]i的FI值为(813±112).咖啡因(40 mmol·L-1)和CPA(30 μmol·L-1)分别引起Caffeine-ryanodine和三磷酸肌醇(InsP3)敏感型-钙池释放而使[Ca2 ]i升高,FI值分别增至(2944±371)和(1844±332).芥子碱(0.1,1.0,10,100μmol·L-1)浓度相关性地抑制咖啡因和CPA诱发的[Ca2 ]i增高,抑制率分别为23.7%,61.9%.77.5%.88.2%和10.9%,23.8%,44.6%,68.3%.结论:芥子碱能显著抑制电压依赖性和受体依赖性钙通道开放所引起的外钙内流,且对受体依赖性钙通道的抑制作用更强.此外,芥子碱对Caffeine-ryanodine受体和InsP3敏感型钙池的内钙释放也有明显抑制作用,且对Caffeine-ryanodine受体敏感型钙池的抑制作用更强.这提示芥子碱有望成为很有研发前景的新型钙阻滞剂.     

基于瓦博格效应的肿瘤治疗新策略

综述基于瓦博格效应（Warburg effect）的肿瘤治疗新策略,包括靶向低氧诱导因子（HIF-1α）信号通路以调控HIF-1α及其下游效应分子水平、靶向癌基因和抑癌基因以改变癌细胞代谢方式、直接干预有氧糖酵解以阻断肿瘤细胞能量供应和靶向酸性微环境以抑制肿瘤的侵袭和转移等。瓦博格效应所呈现的癌细胞能量代谢的生化特征改变涉及多基因、多分子和多水平的调控,为肿瘤的靶向治疗提供了契机,靶向有氧糖酵解过程而选择性杀灭肿瘤细胞的治疗策略具有广阔的临床开发和应用前景。     

芥子碱对大鼠脑匀浆和血清中乙酰胆碱酯酶的抑制作用

目的:考察中药单体芥子碱(3,5-二甲基,4-羟基苯丙烯酰胆碱,sinapine)对大鼠血清和大鼠大脑匀浆乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE)的体外抑制作用。方法:大鼠眼球取血后断头,取大脑,匀浆,用双缩脲法测定脑组织匀浆总蛋白含量。采用乙酰胆碱脂酶试剂盒和改良Ellman比色法测定AChE的活力,检测芥子碱对大鼠血清和脑匀浆乙酰胆碱酯酶的抑制作用。结果:芥子碱明显抑制大鼠大脑匀浆AChE的活力,而对血浆AChE活性的抑制相对较弱,对脑匀浆和血清AChE的抑制IC₅₀分别为3.66和22.1μmol.L^-1,IC₅₀血清/IC₅₀脑=6.042(倍)。结论:芥子碱能显著抑制脑组织AChE活性,有可能作为中枢乙酰胆碱酯酶抑制剂(acholinesterase inhibi-tors,AChEIs)具有防治阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)的应用前景。