人脑膜瘤细胞的原代培养

目的 建立一种人脑膜瘤细胞原代培养简单有效的方法.方法 新鲜脑膜瘤组织取自福建协和医院神经外科25例连续治疗的脑膜瘤手术病人,以胰蛋白酶消化法分离细胞,用含10%胎牛血清的DMEM培养液进行培养并传代,显微镜下观察脑膜瘤细胞生长状况.上皮膜抗原(EMA)、波形蛋白(Vimentin)对脑膜瘤细胞进行免疫组化鉴定.结果 用胰酶消化法培养脑膜瘤细胞,方法简单,细胞形态典型;EMA、Vimentin表达阳性,鉴定为脑膜瘤细胞.结论 单一的胰蛋白酶消化法是一种简单有效的脑膜瘤细胞原代培养的方法.     

疼痛治疗的潜在危险

笔者近10年来，利用“镇痛复合液”局部注射疗法，治疗了各类痛症，取得了良好效果。但是，在疼痛治疗过程中，也碰到了一些意外情况，现报告如下。     

如何在创建高效节约型医院过程中实施后勤精细化管理

随着时代的发展,我国医疗事业得到了飞速的发展。为适应社会发展的需要,面对日益激烈的市场竞争,医院只有注重高效节约型医院的创建,方能提高自身的核心竞争力。本文主要就如何在创建高效节约型医院过程中实施后勤精细化管理进行分析,旨在与同行交流,提升医院的核心竞争力,最终实现医院的社会效益和经济效益的最大化。     

小肠Crohn病伴穿孔1例

患男，50岁。因“脐周胀痛1小时伴呕吐1次”急诊入院。以往有阵发性腹痛、腹泻(水样便)史2年。查体：T72℃，急性痛苦面容。下腹稍隆起，脐周及下腹部均有压痛、肌卫、反跳痛．尤以下腹部为重。肝浊音界消失。肠鸣音亢进。实验室检查：WBC180×109／L,N0．820X线示：肠腔扩张、充气，右膈下游离气体。提示①消化道穿孔，⑧肠梗阻。手术探查见：腹腔内暗红色液体约800m1。部分空肠、回肠段高度扩张，距屈氏韧带80cm、回盲部100cm左右间呈跳跃式分布水肿、增厚的肿块，表面呈颗粒状。其中在回肠段一肿块处有一如黄豆大小的穿孔。     

NOS反义RNA重组腺相关病毒载体体内提高脑细胞耐缺血能力的实验研究

目的 探讨二种分别携带神经元型一氧化氮合酶(nNOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)反义RNA重组腺相关病毒载体(rAAV-AsnNOS和rAAV-AsiNOS)提高脑细胞耐受缺血能力的作用机制.方法 应用立体定位技术将预处理好的病毒载体转染至将要梗死侧的基底节区,转染病毒滴度为2×109mL-1,并将SD大鼠分为4组即rAAV-AsnNOS组,rAAV-AsiNOS组,rAAV-LacZ组和对照组;处理后运用MACO建立缺血模型,每组分为缺血早期和缺血晚期,流式细胞术(FCM)检测NT阳性细胞百分比和细胞凋亡率,逆转录反应系统(RT-PCR)分析nNOS、iNOS,p38MAPK,Caspase-3 mRNA的表达.结果 一定剂量的重组病毒载体转染到大鼠海马区域,无神经损伤症状;转染rAAV-AsnNOS病毒载体的脑神经细胞在缺血早期(缺血1～6 h),NT阳性细胞百分比、细胞凋亡率以及nNOS、p38MAPK和Caspase-3 mRNA表达量均较对照组、rAAV-LacZ组和rAAV-AsiNOS组降低;转染rAAV-AsiNOS病毒载体的脑神经细胞在缺血晚期(缺血24～72 h),NT阳性细胞百分比、细胞凋亡率以及nNOS、p38MAPK和caspase-3 mRNA表达量均较对照组、rAAV-LacZ组和rAAV-AsnNOS组降低,差异有统计学意义.结论 转染重组病毒载体后动物模型脑神经细胞能够耐受缺血损伤,转染rAAV-AsnNOS病毒载体的脑神经细胞能够在缺血早期抑制nNOS、p38MAPK和Caspase-3的表达,转染rAAV-AsiNOS病毒载体的脑神经细胞能够在缺血晚期抑制iNOS、p38MAPK和Caspase-3的表达,从而在缺血后抑制神经细胞凋亡的发生.     

5-脂氧合酶在大鼠脊髓缺血组织中表达的实验研究

目的研究5-脂氧合酶（5-LOX）在大鼠不同缺血时间点脊髓组织中的表达特点。方法50只雄性SD大鼠随机分成5组,假手术组及缺血6、12、24、48h组。采用阻断左肾下5条腰动脉的方法建立大鼠脊髓缺血模型,运用改良的Tarlov评分和HE染色的方法对脊髓模型进行评价;免疫组化染色,RT-PCR方法裣测大鼠脊髓组织中5-LOX的表达。结果Tarlov评分：假手术组10只大鼠均为4分,无一发生瘫痪,缺血48h组2只为1分,余8只完全瘫痪;HE染色：假手术组神经细胞外形清楚、结构正常,缺血24、48h组出现大量神经元坏死,组织中有灶性出血,可见脊髓组织软化;免疫组化染色评分（H—score法）：5-LOX正常脊髓组织低表达,缺血6、12、24、48h组表达高于假手术组并呈递增趋势（P〈0．01）;RT—PCR检测：5-LOXmRNA在正常脊髓组织表达低,在缺血6、12、24、48h脊髓组织表达高于假手术组并呈递增趋势（P〈0．01）。结论5-LOX参与了脊髓缺血继发性的炎症反应,可作为治疗脊髓缺血的重要靶点。     

颅内压监测在重型颅脑损伤中的应用体会

目的:探讨颅内压探头在重型颅脑损伤治疗中的应用价值。方法:选择重型颅脑损伤患者90例,分为A组与B组,A组患者40例,使用颅内压探头监测,未使用颅内压探头监测的50例患者为B组,对两组的治疗效果进行对比分析。结果:A组40例应用颅内压探头监测的重型颅脑损伤患者的死亡率为17.5%,B组未使用颅内压监护的50例患者死亡率为24.0%,两组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:颅内压监测在重型颅脑损伤患者治疗中应用,可以连续动态观察颅内压、脑灌注压情况,为临床治疗提供准确的压力指标,提高重型颅脑损伤救治的成功率。     

丙泊酚用于肩关节脱位的困难复位20例

肩关节脱位在临床骨科当中是最常见的脱位，肩关节脱位时由于病人的疼痛及肌力对抗，再加上软组织粘连，致使复位困难加大。临床上将肩关节脱位复位作用力强度大、持续牵引时间长、仍未复位成功者作为困难复位。临床上常用臂丛阻滞麻醉来解决这个问题，但由于臂丛阻滞为一种神经阻滞，起效缓慢，神经阻滞麻醉的效果经常不完全或不佳，同时也存在着一定的风险。丙泊酚因其具有快速分布、半衰期短、恢复迅速、镇静效果及遗忘作用强等特点已广泛用于全麻诱导及短小手术的麻醉。     

一氧化氮合酶反义RNA重组腺相关病毒载体体内抑制脑缺血神经细胞凋亡的研究

目的 探讨二种分别携带神经元型一氧化氮合酶(nNOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)反义RNA重组腺相关病毒载体(rAAV-AsnNOS和rAAV-AsiNOS)在脑缺血时抑制神经细胞凋亡的作用机制.方法 运用MACO法建立脑缺血模型,闭塞1 h后分别经右侧颈内动脉缓慢注入重组病毒载体(rAAV-AsnNOS、rAAV-AsiNOS和rAAV-LacZ),继续闭塞大脑中动脉,每只转染病毒滴度为1×1010个病毒颗粒/ml,并于分别缺血早期(缺血5 h)和缺血晚期(缺血25 h)时处死模型,流式细胞术(FCM)检测硝基酪氨酸(NT)阳性细胞百分比和细胞凋亡率,逆转录反应系统(RTPCR)分析nNOS、iNOS,p38MAPK,Caspase-3 mRNA的表达.结果 在脑缺血早期,rAAV-AsnNOS组的NT阳性百分比、凋亡率以及nNOS、p38MAPK、Caspase-3 mRNA表达量较对照组、rAAV-LacZ组和rAAV-AsiNOS组的低均降低,差异有统计学意义;在脑缺血晚期,rAAV-AsiNOS组的NT阳性百分率、凋亡率以及nNOS、p38MAPK、Caspase-3 mRNA表达量较对照组、rAAV-LaeZ组和rAAV-AsiNOS组低,差异有统计学意义.结论 在体内缺血动物模型中,rAAV-AsnNOS和rAAV-AsiNOS重组病毒载体能够分别在缺血早期和晚期通过抑制NOS表达,从而抑制p38MAPK和Caspase-3基因的表达,抑制缺血后神经细胞凋亡的发生.