链脲佐菌素致迟发型大鼠1型糖尿病模型的研究

目的 探讨链脲佐菌素(streptozocin,STZ)致迟发型大鼠1型糖尿病模型建立的方法.方法 将8只大鼠随机分为对照组3只,实验组5只;实验组将福氏完全佐剂(CFA)与小剂量STZ联合使用,连续3周大鼠腹腔注射,制造Wistar大鼠1型糖尿病模型,并对2组大鼠的进食量、饮水量、尿量、体重、血糖及尿糖进行密切监测,同时对实验组及对照组大鼠进行葡萄糖耐量实验(OGTT).结果 3只大鼠(60%)成模,实验组大鼠表现出多饮、多食、多尿、高血糖、高尿糖的1型糖尿病典型症状,与对照组大鼠的各项指标差异均有统计学意义(P＜0.05),且实验组大鼠表现出葡萄糖耐量异常.结论 CFA与小剂量STZ联合使用可制造Wistar大鼠1型糖尿病模型.     

人皮肤成纤维细胞系的鉴定及老化检测

目的探索和建立人皮肤成纤维细胞体外分离、培养及鉴定的方法。方法以包皮组织为材料,采用胶原酶消化,分离、培养细胞,倒置显微镜观察,同时进行免疫细胞化学鉴定和β-半乳糖苷酶染色。结果分离的成纤维细胞可在体外快速贴壁生长、增殖。波形蛋白免疫细胞化学染色95%以上为阳性。随成纤维细胞的连续传代培养β-半乳糖苷酶表达呈递增趋势。结论该方法在体外可以获得高纯度的成纤维细胞。     

重组人ALR单克隆抗体的制备、鉴定和初步应用

目的 制备抗重组人肝再生增强因子(ALR)的单克隆抗体(McAb)。方法 以基因重组人ALR二聚体(drhALR)为抗原，免疫Balb／c小鼠，制备单克隆抗体。用常规法制备抗ALR单体(mrhALR)多抗，建立夹心ELISA法测定ALR，初步确定ALR在小鼠组织的分布；用荧光免疫方法对胎鼠各组织进行ALR检测。结果 筛选出3株稳定分泌抗drhALR的单抗杂交瘤细胞株，免疫球蛋白亚类分别为IgG1、IgG2a、IgG2b，特异性高，用于rhALR的免疫印迹及ELISA检测，可同时识别rhALR单体(mrhALR)和二聚体(drhALR)；夹心ELISA法检测小鼠肝、肾、脾提取液ALR含量与鼠龄无关，各脏器的ALR含量不同，分别为肝0．36μg/g，肾0．11μg/g，脾0．05μg/g；免疫荧光检测胎鼠，各器官有不同程度ALR的存在，无器官特异性。结论 用drhALR为抗原制备的抗rhALR单克隆抗体，能够用于ALR的体内外免疫学检测，为rhALR及生化提取ALR的药理学研究及质量标准奠定了基础。     

心脑舒通片对实验性心肌梗死和脑梗死的作用

目的 :观察心脑舒通片对实验性大鼠心肌梗死、局灶性脑缺血损伤的作用 ,并与心脑舒通胶囊进行比较。方法 :用大鼠冠状动脉结扎、大鼠大脑中动脉阻断动物模型 ,以总电机械收缩期指数(EMTI)、左室射血期指数 (LVETI)、射血前期指数(PEPI)、血流动力学比率 (PEP/LVETI) ,评价在体心肌收缩性能 ;以血清天门冬氨酸转氨酶 (AST)活性、乳酸脱氢酶 (LDH )活性和心肌梗死面积 ,评价心肌损伤程度 ;以行为学检测和脑梗死面积占总面积 ,判断脑损伤程度。结果 :与模型组相比 ,心脑舒通片大、中、小剂量组实验性心肌梗死大鼠的血流动力学指标 (除外LVETI ,只有中剂量组对其改善有统计学差异 )、血清酶学指标和行为学的改变均有不同程度的改善作用 (P <0 .0 5或P <0 .0 1)。其中 ,血清酶学指标的改善以小剂量组作用较好 ,与同等临床 5倍剂量的心脑舒通胶囊组比较无明显差异(P >0 .0 5 )。与模型组比较 ,大剂量组大鼠的脑梗死面积有明显改善 (P <0 .0 5 )。结论 :心脑舒通片对实验性大鼠心肌梗死、局灶性脑缺血损伤均有治疗作用 ,与心脑舒通胶囊比较无明显差异     

蛋白质组学技术在药物性肝损伤生物标志物研究中的应用

临床前药物性肝损伤的评价存在灵敏性低和特异性差的问题,常产生假阴性结果和出现意外的毒性,是导致药物终止开发甚至退市的重要原因之一。在药物肝毒性临床前研究中,可以利用蛋白质组学技术的快速、灵敏、高通量等优点,寻找和发现新的肝毒性生物标志物,使药物开发过程更为安全有效。本文对肝毒性生物标志物的研究现状,蛋白质组学在生物标志物的发现及验证等方面的技术发展进行了综述分析,并且着重归纳了该技术在中药致肝损伤方面的生物标志物研究中的应用。与传统评价方法相比,蛋白质组学技术对于发现新型肝潜在毒性生物标志物具有不可替代的优势。随着蛋白质组学技术结合其他组学技术的发展,其在药物肝毒性早期筛选、生物标志物的临床桥接等方面将取得突破性的进展。     

组织工程皮肤的研究进展

组织工程皮肤是由细胞或细胞外基质或由两者共同结合组成的皮肤产品,是应用生命科学和工程学的原理与技术将种子细胞与适当的支架材料相结合构建出的用于修复、维护和改善损伤皮肤组织功能和形态的生物替代物。从结构来分,可以分为三类：一是培养的表皮膜;二是真皮替代物;三是具有表皮、真皮的复合皮替代物。     

中药血清药理研究方法中几种血清预处理方法对消除正常血清活性的比较

本文比较了正常血清与经乙醇、丙酮、甲壳素及５６℃灭活血清在豚鼠离体气管螺旋条上抗Ａｃｈ及抗Ｈｉｓ活性的差异,结果显示,经乙醇、丙酮、甲壳素预处理的血清均可非常明显地降低血清的抗Ａｃｈ的作用,丙酮预处理亦能明显降低血清的抗Ｈｉｓ作用,而５６℃灭活血清不能降低其抗Ａｃｈ和抗Ｈｉｓ的作用。     

组织工程皮肤支架材料的研究和发展

组织工程化皮肤是指由细胞或细胞外基质或由两者共同结合组成的皮肤产品,是应用生命科学和工程学的原理与技术将种子细胞与适当的支架材料相结合构建出的用于修复、维护和改善损伤皮肤组织功能和形态的生物替代物。组织工程支架材料在人工皮肤的构建中起着重要作用,支架材料的研究及其优选是人工皮肤的重要研究内容之一,按化学性质可将其分为合或类与生物类,它们各有优缺点,现分别将其研究现状及其发展作一综述。     

分泌抗甲肝病毒基因工程单抗的rCHO细胞无血清培养研究

在分析antiHAVIgGCHO细胞对筛选的培养基中氨基酸利用的基础上,对基础培养基进行初步优化。再采用统计学正交分析方法,在初步优化的基础培养基中添加胰岛素、转铁蛋白等促细胞生长因子,研制了一种适于分泌抗甲肝病毒基因工程单抗的rCHO细胞悬浮生长用无血清培养基,经Spinner转瓶实验,细胞生长和抗体表达与进口同类产品相当,且成本低廉,可用于大规模悬浮培养。     

山豆根水煎液致大鼠亚急性肝脏毒性研究

目的:给予质量可控的山豆根(RRST)水煎液致大鼠肝脏毒性,并探讨其毒性作用机制.方法:采用代表性好、来源固定的药材,取山豆根饮片加6倍量水,浸泡30 min,武火煮沸,换文火煎煮60 min,共煎煮2次,合并2次的滤液浓缩至生药2 g·mL-1,得山豆根水煎液储备液,并对其苦参碱及氧化苦参碱进行测定,对其质量进行控制.动物实验:选用Wistar大鼠30只,随机分为空白对照组(灌胃给予蒸馏水)、阳性对照组(灌胃给予10％ CCl4)、低剂量组(灌胃给予1 g·kg-1山豆根水煎液)、中剂量组(灌胃给予4 g·kg-1山豆根水煎液)和高剂量组(灌胃给予16 g·kg-1山豆根水煎液),每组6只.连续给药14d,第15天ip 25％乌拉坦麻醉,腹主动脉取血,离心取血清测定丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆红素(TBil)、总胆汁酸(TBA),采用酶联免疫吸附法(ELISA)法测定炎症因子白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子(TNF-α).摘取肝脏,称重,计算脏器指数,病理制片,进行组织病理学检查.取部分肝组织加冷生理盐水制成10％肝匀浆,离心,取上清波,测定肝组织中的超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)活性,丙二醛(MDA)含量.结果:大鼠连续给予不同剂量山豆根水煎液7d后,高剂量组出现活动减少,四肢无力;14 d后,与空白对照组相比,高剂量组ALT,ALP,TBA值升高(P＜0.05),病理组织学检查发现高剂量组的肝细胞肿大,并伴有炎症浸润.高剂量组及阳性对照组的IL-6,TNF-α含量升高(P＜0.05及P＜0.01),SOD活性降低,MDA含量升高(P＜0.05),SOD/MDA含量显著降低(P＜0.01).结论:山豆根具有肝脏毒性,给予大鼠16 g·kg-1山豆根水煎液可导致明显的肝损伤,且其损伤机制与炎症因子的作用和脂质过氧化有关,与四氯化碳的肝毒性具有一定的相似性.