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1.
目的:探讨己酮可可碱(PTX)通过Hedgehog信号通路抑制日本血吸虫病肝纤维化的作用机制。方法:PMA诱导单核细胞THP-1分化成巨噬细胞,用可溶性日本血吸虫虫卵抗原(SEA)刺激活化THP-1源性巨噬细胞,留取培养上清用于检测其活化状况。CCK-8检测培养上清及PTX对肝星状细胞LX-2的活性影响。设空白对照组、上清刺激组(加入活化的巨噬细胞培养上清)、PTX干预组(加入活化的巨噬细胞培养上清和PTX)。收集以上3组LX-2培养上清及细胞,上清用于ELISA检测TGF-β蛋白表达,细胞用于提取总RNA后RT-PCR检测TGF-β,shh,gli-1的基因表达。结果:SEA可活化THP-1源性巨噬细胞,其活化后培养上清可活化LX-2细胞。上清刺激组TGF-β,shh,gli-1的基因表达空白对照组明显上调,而PTX干预组相对于上刺激组则明显降低。结论:Hedgehog信号通路可能在血吸虫肝纤维化形成过程中起重要作用,己酮可可碱可通过该通路对血吸虫肝纤维化的形成起抑制作用。 相似文献
2.
RP—HPLC同时测定通脉口服液中4种活性成分的含量 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:建立同时测定通脉口服液中丹参素、原儿茶醛、葛根素和阿魏酸4种有效成分含量的反相高效液相色谱方法。方法:采用Lichrospher C18色谱柱(4.6mm×250mm,5.0μm);流动相为0.05%甲酸水溶液(A)-乙腈(B),线性梯度洗脱[0~10min,10%B;10~20min,10%B→27%B;20~30min,27%B→35%B],流速1.0mL·min^-1;柱温为30℃;检测波长分别为250nm(葛根素),281nm(丹参素和原儿茶醛),323nm(阿魏酸)。结果:丹参素、原儿茶醛、葛根素和阿魏酸浓度分别在0.745~149,1.79~357,1.58~315,0.775~155μg·mL^-1范围内均呈良好线性关系(r≥0.9998);各组分低、中、高浓度的平均加样回收率均在98.2%~101%之间,RSD均小于3.2%(n=18);重复性良好,RSD均小于1.5%(n=6);通脉口服液中丹参素、原儿茶醛、葛根素和阿魏酸的含量分别为(23.9±0.2)mg·支^-1、(3.58±0.02)mg·支^-1、(39.0±0.1)mg·支^-1和(1.29±0.02)mg·支^-1。结论:本文方法简便可靠,重复性好,可全面反映通脉口服液中各味药的质量,适用于通脉口服液质量控制。 相似文献
3.
摘 要 目的:测定自制复方川脊片中原儿茶酸和芍药苷两种成分的溶出度。方法: 采用《中国药典》2010年版二部附录ⅩC第二法,以pH 6.8缓冲液为溶出介质,转速为50 r·min-1,HPLC法测定其溶出度。结果:复方川脊片中原儿茶酸和芍药苷分别在5.27~105.50(r=0.999 9),86.04~1 721.00μg·ml-1(r=0.999 9)范围内线性关系良好,各组分平均回收率均在98.76%~99.85%之间,RSD均小于1.68%(n=6);3批样品在90 min溶出度均大于95%。结论:自制复方川脊片有较好的溶出度,本文建立的溶出度检测方法可作为该制剂的质控方法。 相似文献
4.
高效液相色谱法同时测定丹参药材水溶性和脂溶性成分的含量 总被引:5,自引:2,他引:3
目的 建立丹参药材水溶性成分中丹参素、原儿茶醛、丹酚酸B和脂溶性成分中二氢丹参酮I、隐丹参酮、丹参酮I、丹参酮IIA的含量测定 方法 . 方法 采用高效液相色谱法测定,色谱柱为汉邦C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相A为0.1%甲酸 水(V/V),流动相B为乙腈,线性洗脱梯度为0~10 min,B相10%~20%,10~27 min,B相20%~33%,27~30 min,B相33%~70%,30~50 min,B相70%~85%;柱温:20 ℃;流速:1 mL8226;min-1;进样量:10 μL;检测波长:280 nm. 结果 丹参素、原儿茶醛、丹酚酸B、二氢丹参酮I、隐丹参酮、丹参酮I和丹参酮IIA在0.037 2~118.000 0,0.017 4~8.900 0,0.141~450.000,0.018 8~56.800 0,0.049 7~158.000 0,0.021 5~78.500 0,0.096 2~308.000 0 mg8226;L-1浓度范围内均呈良好线性关系 (R2≥0.999 2);各成分的平均加样回收率均在98.5%~101.5%,RSD均<1.98%(n=6);日内日间精密度良好,RSD均<2.16%. 结论 该 方法 简便、准确、重复性好,可用于丹参药材的含量测定. 相似文献
5.
目的:建立HPLC-MS法测定大鼠血浆中辛伐他汀及其代谢物辛伐他汀酸的浓度。方法:血浆样本加入适量内标和醋酸铵缓冲液,以甲基叔丁基醚萃取后采用LC-MS进行分析。色谱柱采用Inertsil ODS-3柱(150 mm×2.1 mm,5.0μm);流动相由乙腈-2.5 mmol.L-1醋酸铵(含0.1%甲酸)(75∶25)组成,柱温35°C;流速0.3 mL.min-1;采用电喷雾离子源(ESI),以多反应监测方式(MRM)进行定量分析。辛伐他汀和内标洛伐他汀在正离子模式下定量分析离子对分别为m/z 419.2→m/z199.2和m/z 405.2→m/z 199.2;辛伐他汀酸和内标洛伐他汀酸在负离子模式下定量分析离子对分别为m/z 435.2→m/z319.2和m/z 421.4→m/z 319.2。结果:辛伐他汀和辛伐他汀酸在5.0~6 400 ng.mL-1内线性关系良好(r>0.999),最低定量限为0.1 ng.mL-1,提取回收率为87.91%~99.77%,日内、日间精密度均不高于8.95%。结论:该方法分析速度快、灵敏、准确,为临床进一步研究辛伐他汀提供了基础。 相似文献
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目的 建立HPLC-MS/MS测定刺五加提取物、贯叶连翘提取物主要活性成分在大鼠血浆中药物浓度的方法,应用于刺五加提取物、贯叶连翘提取物及其联用时主要活性成分在大鼠体内的药动学研究,并使用DAS 3.2.8软件对主要活性成分的药动学参数进行非房室模型拟合。方法 以Welch Ultimate XB-C18(2.1 mm ×100 mm,4.6 μm)为色谱柱,乙腈(含0.1%甲酸)-0.1%甲酸水溶液(含5 mmol·L-1乙酸铵)为流动相,以300 μL·min-1的流速进行梯度洗脱,采用电喷雾离子源进行正负离子同时扫描,多反应监测模式进行监测。结果 所建立的方法精密度、准确度良好,提取回收率基本符合生物样品分析方法要求。结论 药动学结果表明,相比于单独给药,联合用药后刺五加苷E tmax缩短,金丝桃素ρmax升高、t1/2延长。该药动学结果表明,刺五加提取物、贯叶连翘提取物联用时,很可能通过增加金丝桃素血药浓度、缩短刺五加苷E的达峰时间,从而在体内产生协同抗抑郁作用。 相似文献
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摘 要 目的:建立LC MS/MS法测定大鼠肝微粒体酶孵育体系中伊立替康活性代谢物(SN 38)及其次级代谢产物(SN-38G)的浓度,并对体外孵育条件进行优化。 方法: 采用蛋白沉淀法,用甲醇(含0.1%的甲酸)溶液处理孵育样本后,直接采用 LC-MS/MS 法测定分析。色谱柱采用ZORBAX Eclipse XDB C18柱(2.1 mm×50 mm,3.5 SymbolmA@m),柱温35 ℃,流动相由乙腈 0.1%甲酸水(23∶77 )组成,流速0.3 ml·min-1;采用电喷雾离子源(ESI),以多反应监测方式(MRM)进行定量分析。通过单因素法对各孵育条件进行优化。 结果: SN 38、SN 38G分别在2.3 ~920 ng·ml-1、2.5~1 000 ng·ml-1 内线性关系良好(r≥0.997 2);日内、日间精密度RSD均小于14.6%(n=6);回收率均在74.1%~123.4%之间,RSD均小于13.5%(n=6)。最佳的孵育体系为:肝微粒体蛋白浓度为0.3 mg·ml-1,孵育时间为 30 min。 结论:本研究所建立的 LC–MS/MS法分析快速、灵敏、准确,适于体外孵育体系中SN 38与SN 38G浓度的测定,并为葡萄糖醛酸转移酶1A1(UGT1A1)体外活性测定提供方法学基础。 相似文献
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摘 要 目的:建立同时测定百蕊颗粒中紫云英苷和山奈酚2种有效成分含量的HPLC MS/MS检测方法。方法: 采用Ultimate XB C18 (100 mm×2.1 mm,5 μm)色谱柱;流动相为0.1%甲酸水溶液(A) 0.1%甲酸乙腈(B),梯度洗脱,流速0.3 ml·min-1;柱温为40℃;采用电喷雾离子源(ESI),以多反应监测方式(MRM)进行定量分析。紫云英苷和山奈酚在负离子模式下定量分析离子对分别为m/z 447.2→m/z 284.0和m/z 285.1→m/z 187.1。结果:紫云英苷和山奈酚的浓度分别在9.86~1 970 ng·ml-1(r=0.999 5)和8.73~437 ng·ml-1(r=0.999 6)范围内均呈良好线性关系;紫云英苷和山奈酚低、中、高平均加样回收率分别为99.23%、99.65%、99.23%和98.24%、99.13%、99.69%,RSD分别为1.84%、1.37%、1.21%和1.38%、0.96%、1.47%(n=6)。结论:本文方法简便可靠,重复性好,可同时测定百蕊颗粒中紫云英苷和山奈酚的含量,适用于百蕊颗粒质量控制。 相似文献
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目的:采用cocktail 探针药物法研究辣椒素在体外对大鼠肝微粒体CYP 450四种亚型的影响。方法:分为试验组和对照组,试验组采用大鼠肝微粒体孵育体系、探针药物和系列浓度的辣椒素(对照组仅加入缓冲液)共同孵育20 min,反应终止后用HPLC方法检测代谢产物的生成量以代表酶的活性。采用Graphpad prism 5.0计算辣椒素对各亚型的IC50值。将辣椒素与大鼠肝微粒体分别预孵育0,5,10,15,20,30 min,计算不同预孵育时间下各亚型的相对活性百分比。结果:辣椒素对大鼠肝微粒体CYP1A2、CYP2C11、CYP2E1和CYP3A2的IC50值分别为36.21,17.19,51.64,18.86μmol·L-1。预孵育没有增强辣椒素对CYP450的抑制作用。结论:辣椒素在体外对大鼠肝微粒CYP1A2、CYP2C11、CYP2E1和CYP3A2具有抑制作用,且未呈现出预孵育时间依赖性。 相似文献
10.
目的:建立HPLC-MS/MS法测定大鼠血浆中金丝桃素的浓度。方法:血浆样本加入适量内标,经乙腈直接沉淀蛋白后采用HPLC-MS/MS进行分析。色谱柱采用Ultimate C18柱(150 mm×2.1 mm,5.0μm);流动相由乙腈-5 mmol·L^-1醋酸铵(含0.1%甲酸)(90∶10)组成,柱温35℃;流速0.5 ml·min^-1;采用电喷雾离子源(ESI),以多反应监测方式(MRM)进行定量分析。金丝桃素和内标吡格列酮在负离子模式下定量分析离子对分别为m/z 503.2→m/z 405.1和m/z 355.0→m/z 41.9。结果:金丝桃素在0.1-13.2 ng·ml^-1线性关系良好(r〉0.99),最低定量限为0.1 ng·ml^-1,提取回收率为84.19%-98.71%,日内、日间精密度均不高于18.47%。结论:该方法分析速度快、灵敏、准确,为临床进一步研究金丝桃素提供了基础。 相似文献