五灵胶囊对实验性肝硬化鼠的影响

五灵胶囊是由五灵丸改变剂型而成,用于治疗慢性肝炎疗效显著.本实验采用肝纤维化大鼠模型,观察五灵胶囊对大鼠肝纤维化作用.     

乐尔脉对脑缺血再灌注损伤大鼠海马组织炎性反应的影响

目的研究乐尔脉对大鼠脑缺血再灌注损伤海马组织炎性反应的作用。方法采用大鼠大脑中动脉阻断（middle cerebral artery occlusion,MCAO）造成局灶性脑缺血2h再灌注3d模型,采用干燥法测定脑含水量和TTC染色法测定脑梗死面积,化学法与I-125放免法测定海马组织中MDA、LD、TNF-α、IL-6含量,RT-PCR测定海马组织中COX-2、MCP-1、MMP-2、9、13mRNA的表达,Western blot检测海马组织P38与NF-κB信号通路蛋白的表达。结果乐而脉与氟桂利嗪可明显减轻脑水肿和梗死面积,降低海马组织中IL-6、TNF-α、MDA和LD含量（P〈0.05）,海马组织中MCP-1、COX-2、MMP-2、13mRNA的表达下调（P〈0.05）。Western blot测定结果显示乐尔脉和氟桂利嗪组明显降低海马组织P38MAPK和P-P38MAPK表达（P〈0.05）,同时也降低NF-κB65、P-NF-κB65、C-fos表达,增加C-jun与IκB表达（P〈0.05）,氟桂利嗪降低NF-κB65但不降低p-NF-κB65表达。结论脑缺血再灌注诱导海马组织细胞释放的细胞因子和介质活化P38MAPK与NF—KB／IκB信号转导通路级联反应,MCP-1、COX-2mRNA和MMP-2、9、13mRNA转录增加,IL-6、TNF-α、MDA、LD生成增多,导致脑水肿和脑梗死面积扩大,乐尔脉抑制脑缺血再灌注诱导海马组织细胞释放炎症介质的作用可能与降低p38MAPK和NF-κB／IκB信号通路活化作用有关。     

乐尔脉对脑缺血再灌注损伤大鼠海马组织炎性反应的影响

目的 研究乐尔脉对大鼠脑缺血再灌注损伤海马组织炎性反应的作用。方法 采用大鼠大脑中动脉阻断(middle cerebral artery occlusion,MCAO)造成局灶性脑缺血2 h再灌注3 d模型,采用干燥法测定脑含水量和TTC染色法测定脑梗死面积,化学法与I-125放免法测定海马组织中MDA、LD、TNF-α、IL-6含量,RT-PCR测定海马组织中COX-2、MCP-1、MMP-2、9、13 mRNA的表达,Western blot检测海马组织P38与NF-κB信号通路蛋白的表达。结果 乐而脉与氟桂利嗪可明显减轻脑水肿和梗死面积,降低海马组织中IL-6、TNF-α、MDA和LD含量(P<0.05),海马组织中MCP-1、COX-2、MMP-2、13mRNA的表达下调(P<0.05)。Western blot 测定结果显示乐尔脉和氟桂利嗪组明显降低海马组织P38MAPK和P-P38MAPK表达(P<0.05),同时也降低NF-κB65、P-NF-κB65、C-fos表达,增加C-jun与IκB表达(P<0.05), 氟桂利嗪降低NF-κB65但不降低p-NF-κB65表达。结论 脑缺血再灌注诱导海马组织细胞释放的细胞因子和介质活化P38MAPK与NF-κB/IκB信号转导通路级联反应,MCP-1、COX-2mRNA和MMP-2、9、13mRNA转录增加,IL-6、TNF-α、MDA、LD生成增多,导致脑水肿和脑梗死面积扩大,乐尔脉抑制脑缺血再灌注诱导海马组织细胞释放炎症介质的作用可能与降低p38MAPK和NF-κB /IκB信号通路活化作用有关。     

柴胡及五灵丸对慢性肝损伤小鼠的影响

目的 观察柴胡与五灵丸对慢性肝损伤的作用，方法 采用四氯化碳（CCl4）、D－氨基半乳糖（D－GlaN）和脂多糖（LPS）与卡介苗（BCG）多次注射造成3种慢性肝损伤模型，给予同剂量的柴胡及五灵丸，测定血清转氨酶（ALT、AST）、胆碱酯酶（CHE），匀浆ALT与CHE、谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）、碱性磷酸酶（ALP）、一氧化氮（NO）、白介素2（IL－2）、白介素6（IL－6），HE染色观察肝组织形态学。结果 柴胡与五灵丸能有效地降低CCl4所致慢性肝损伤小鼠血清与匀浆ALT，升高血清CHE，降低GSH与MDA，但无降瘀胆作用，五灵丸降瘀胆显（P＜0.01），HE显示受损的肝细胞有较好的恢复作用，对D－GlaN升高的血清ALT有显抑制作用，升高CHE，降低MDA，但不降GSH，HE显示五灵丸修复损伤的肝组织不如柴胡，两药对免疫性肝损伤升高的ALT，AST有显降低作用（P＜0.01），使IL－2升高，柴胡抑制IL－6与NO，五灵丸显升高IL－6与NO。结论 两药对三种慢性肝损伤模型有不同程度的作用，对CCl4所致慢性肝损伤五灵丸优于柴胡，对D－GlaN所致慢性肝损伤柴胡优于五灵丸。     

五灵胶囊对LPS诱导枯否细胞释放细胞因子的影响

目的:探讨五灵胶囊对枯否细胞(Kupffer cells, KC)释放细胞因子介导肝细胞(hepatocellular cells, HC)损伤的作用. 方法:分离并纯化HC与KC并建立LPS及D-GlaN损伤肝细胞模型,观察五灵胶囊对2种损伤模型的作用以及对LPS诱导KC释放细胞因子介导肝细胞损伤的作用. 结果:五灵胶囊2个剂量能有效地阻滞LPS,D-GlaN损伤肝细胞以及降低LPS诱导KC释放TNF-α,IL-6,IL-8水平,抑制KC释放细胞因子损伤肝细胞. 结论:五灵胶囊遏制KC大量释放细胞因子是治疗慢性肝炎作用机制之一.     

五灵胶囊对四氯化碳致大鼠慢性肝损伤保护作用

用ＣＣｌ４致大鼠慢性损伤,研究了五灵胶囊对慢性肝损伤的保护作用。病理学检查显示,五灵胶囊能保护肝细胞,减轻肝纤维化程度。酶谱检测显示,五灵胶囊可降低肝损伤大鼠血清中ＣＯＴ,ＣＰＴ,ＡＬＰ,ＭＡＯ的活性。结果表明,五灵胶囊对慢性肝损伤有明显的保护作用。     

正交试验探讨五灵胶囊配伍对慢性肝损伤小鼠的影响

目的:观察五灵胶囊组方及交互配伍对慢性肝损伤小鼠药效学作用,探讨五灵胶囊复方的配伍意义.方法:采用L16(215)正交试验设计,用四氯化碳(CCl4)多次皮下注射,饮用10%乙醇溶液并以高脂低蛋白饲料饲养制备小鼠肝纤维化模型,分别给予受试药物治疗10 d,酶法测定血清丙氨酸氨皋转移酶(ALT)和胆碱酯酶(CHE),化学法测定肝匀浆丙二醛(MDA)含量.结果:F值检验显示:五灵胶囊4成分交互配伍对慢性肝损伤小鼠ALT、CHE和MDA有不同作用,单味灵芝、五味子+灵芝、柴胡+灵芝、五味子+柴胡+灵芝、丹参+柴胡+灵芝及全方能显著降低MDA;配伍组五味子、柴胡、五味子+丹参+柴胡及全方能显著降低ALT;配伍组五味子、丹参、柴胡+灵芝、丹参+柴胡+灵芝及全方能显著升高CHE.结论:全方能降低MDA和ALT酶活性,又能改善肝功能,试验支持五灵胶囊组方合理性.     

归延胶囊对脑缺血再灌注时相点大鼠皮层神经细胞凋亡的影响

目的:观察归延胶囊(当归、莪术和延胡索)对脑缺血再灌注(CI/R)时相点大鼠皮层神经细胞凋亡的影响,探讨治疗CI/R损伤的作用机制.方法:采用大鼠脑中动脉阻断制备局灶性CI/R模型,缺血2 h再灌注6 h、24 h、48 h、3 d、10d、30 d,取脑组织,干湿重量法测定脑含水量,TTC染色检测梗死面积,TUNEL检测神经细胞凋亡,RT-PCR检测损伤侧脑皮层组织Fas、Bax、Caspase mRNA表达,Western Blot检测损伤侧脑组织Fas、Fas-1、Bax、BCl-2、Caspaase-3、9蛋白表达.结果:归延能有效地改善CI/R所致的脑皮层病理组织学损伤,降低各时相点脑梗死面积,降低再灌注48 h、3 d、10 d脑含水量,减少再灌注48 h、3 d、10 d、30 d脑皮层神经细胞凋亡数,下调各时相点损伤侧Fas、Bax、caspase-3、9 mRNA及蛋白表达.结论:归延抑制脑皮层神经细胞凋亡的作用机制町能是通过调节Bcl-2/Bax、Fas/FasL和caspase-3的活性而实现的,     

五灵胶囊对脂多糖诱导枯否细胞内核转录因子-κB表达的作用

目的:通过体内、体外实验探讨五灵胶囊(WL)对免疫性肝脏炎症反应的作用机制。方法:制备卡介苗(BCG)+免疫佐剂+脂多糖(LPS)诱导小鼠免疫性肝损伤模型,WL灌胃给药12d,处死小鼠分离血清并制备肝组织蛋白;予大鼠WL 10、6.25g/kg灌胃4d,腹主动脉取血并制备含药血清;另取SD大鼠分离原代肝细胞和原代枯否细胞(KCs);采用Transwell小室下层培养KCs,含药血清-KCs条件培养上清对小室上层肝细胞作用。酶法测定免疫性肝损伤小鼠血清AST、ALT及条件培养上清中AST、ALT和LDH-L活性。取KCs培养成单层并同步化24h,PDTC和WL分别干预KCs 24h,再加入60μg/L的LPS诱导12h,Real-time PCR检测LPS诱导KCs表达MCP-1、IL-1、TNF-αmRNA水平,Western Blot检测免疫性肝损伤肝组织中和体外培养KCs表达TNFRⅠ、NF-κBs亚蛋白及IκKβ、IκB。结果:WL明显降低免疫性肝损伤小鼠血清ALT、AST活性并抑制肝组织内活化NF-κB信号通路;含药血清Ⅰ、Ⅱ组明显抑制活化KCs分泌促炎因子损伤肝细胞,WL抑制LPS诱导KCs表达NF-κBs信号通路蛋白,下调MCP-1、IL-1、TNF-αmRNA表达。结论:WL治疗慢性肝病炎症反应的作用机制与下调活化NF-κBs信号通路蛋白,阻滞KCs释放过量促炎因子所致肝细胞损伤相关。     

五味子及其与丹参 灵芝 柴胡配伍对慢性肝损伤的影响

目的 观察五味子和五味子与丹参、柴胡、灵芝配伍对慢性肝损伤的治疗作用。方法 采用四氯化碳（CCl4)和D－氨基半乳糖（D－GlaN)多次注射造成两种慢性肝损伤模型,给予同一剂量的药物,测定血清谷丙转氨酶（ALT）、胆碱酸酶（CHE）、肝匀浆ALT、CHE、谷胱苷肽（GSH）、丙二醛（MDA）和碱性磷酸酶（ALP）,HE染色观察肝组织形态学。结果 五味子对CCl4慢性肝损伤所至的血清与匀浆ALT显著降低（P＜0.01),CHE升高（P＜0.01),ALP与MDA下降（P＜0.01)。五味五＋丹参对慢性肝损伤酶的作用与五味子相似,组织形态学结果与生化结果基本一致。五味子＋柴胡与五味子＋灵芝的作用弱于前者,但病理组织形态学结果不支持二者的治疗作用。对D－GlaN所致慢性肝损伤五味子能加强枯否细胞的吞噬功能,增加蛋白合成,消除MDA对细胞的损伤,改善细胞代谢。五味子＋丹参的生化结果与组织形态学结果显示其治疗作用强于五味子,对纤维组织增生的抑制作用是其特点。五味子＋灵芝虽有降ALT和升高CHE作用（P＜0.05,P＜0.01),但对匀浆CHE无效,而组织形态学显示受损的肝细胞无改善。五味子＋柴胡对酶的作用较差,组织形态学显示受损的肝细胞无明显改善。结论 五味子对两种慢性肝损伤有较好的治疗作用,五味子与丹参配伍的作用强于五味子,对纤维组织增生有明显抑制作用是其特点。