北沙参多糖分离纯化及经肠道菌群降解对体外免疫细胞增殖的影响

目的 分离纯化北沙参多糖并探讨经肠道菌群降解对体外免疫细胞增殖的影响.方法 采用水提醇沉法制得北沙参多糖,经DEAE-52阴离子交换柱分离纯化.紫外分光光度法分析北沙参多糖及蛋白质含有量,糖腈化衍生化-GC法分析北沙参多糖的单糖组成.采用高效凝胶渗透色谱测定降解前后多糖的保留时间.MTT法分析北沙参多糖及肠道菌群降解产物对小鼠巨噬细胞、脾淋巴细胞增殖活性的影响.结果 北沙参多糖经DEAE-52阴离子交换柱分离可得2种多糖组分,分别命名为D1、D2.其质量分数分别为72.99%、80.04%,蛋白质含有量分别为0.03%、0.14%.其中,D1组分只含有葡萄糖,D2组分由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、葡萄糖、半乳糖组成.高效凝胶渗透色谱法测得降解后多糖较D1、D2多糖的保留时间明显增加.MTT法测得北沙参多糖在经小鼠肠道菌群降解后对巨噬细胞、脾淋巴细胞的增殖作用优于降解前.结论 北沙参多糖在肠道菌群作用下降解为分子量较小的多糖,在经小鼠肠道菌群降解后对巨噬细胞、脾脏细胞的增殖作用增强.     

柴胡桂枝汤挥发油的GC-MS分析及对人肺腺癌A549细胞体外增殖的抑制作用研究

目的:研究复方柴胡桂枝汤挥发油的组成成分,并评价其对人肺腺癌A549细胞体外增殖的抑制作用。方法:根据2015年版《中国药典》(四部)通则2204挥发油测定法中甲法提取柴胡桂枝汤中的挥发油。采用气相色谱-质谱联用法(GC-MS)结合Kováts指数分析其挥发油成分,并采用峰面积归一化法计算各成分的相对含量。以不同质量浓度顺铂(4、8、16、32、64 mg/L)为阳性对照,采用MTT法检测不同质量浓度柴胡桂枝汤挥发油(25、50、100、200、400 mg/L)作用48 h后对A549细胞体外增殖的抑制作用;另设阴性对照组(加细胞但不加药物)。结果:从挥发油中共分离出71个成分,鉴定出其中59个成分,其峰面积之和占总峰面积的84.99%。其中,相对含量较高的成分为芳姜黄烯(17.65%)、β-甜没药烯(9.57%)、β-罗勒烯(7.05%)、α-姜黄烯(5.35%)、2,5-二甲基苯甲醛(4.24%)、异丁酸芳樟酯(2.70%)、α-雪松烯(2.48%)、δ-杜松烯(2.07%)。与阴性对照组比较,4~64 mg/L顺铂组和25~400 mg/L柴胡桂枝汤挥发油组细胞的增殖率均显著降低(P<0.05);顺铂和柴胡桂枝汤挥发油对A549细胞体外增殖的半数抑制浓度分别为10.150、73.526 mg/L。结论:柴胡桂枝汤挥发油中主要以芳姜黄烯、β-甜没药烯、β-罗勒烯、α-姜黄烯等成分为主,其对A549细胞的体外增殖具有一定的抑制作用。