一种新的(1→3)-β-D-葡聚糖识别蛋白的鉴定及其分子克隆

目的从大黄粉虫 (Tenebriomolitor)体内鉴定出一种 (1→ 3) β D 葡聚糖识别蛋白 (Tm GRP)并对其进行分子克隆。方法通过制备一种 β 1,3 葡聚糖固定化柱 ,从大黄粉虫的体液中筛选出能与 (1→ 3) β D 葡聚糖发生特异性结合的蛋白质。利用DNA探针法和随机引物法从大黄粉虫的cDNA文库中筛选Tm GRP的全部DNA序列。结果Tm GRP是一个由 14 4 3个核苷酸编码产生的具有 4 81个氨基酸残基的蛋白质。结论Tm GRP是大黄粉虫体内的一种葡聚糖识别蛋白。     

大黄粉虫幼虫体内黑色素合成相关蛋白的鉴定

目的鉴定大黄粉虫幼虫体内与酚氧化酶(PO)诱导的黑色素合成相关的蛋白(MAPs)。方法体外诱导大黄粉虫幼虫血淋巴中黑色素合成反应,对上清液中的蛋白质进行SDS PAGE分析,比较黑色素合成前后、合成过程中及在苯硫脲存在下蛋白质的变化,对黑色素合成过程中消失的蛋白进行氨基端氨基酸序列分析。结果6条蛋白带(MAP 1~6)呈时间依赖性地从黑色素合成反应的上清液中消失,苯硫脲可阻断此反应而取消蛋白的消失;氨基端氨基酸序列分析表明MAP 1,2为已知的大黄粉虫卵黄素样蛋白,MAP 3,4,5为未知蛋白,MAP 6为已知的大黄粉虫干燥蛋白。结论大黄粉虫幼虫血淋巴中至少5种蛋白与PO诱导的黑色素合成反应特异性相关。