Survivin反义寡核苷酸协同Taxol诱导肺癌细胞株凋亡

[目的]研究Survivin反义寡核苷酸(antisense oligonucleotide,ASODN)单独或联合Taxol对肺癌细胞株Survivin mRNA和蛋白表达,细胞凋亡,生长抑制率的影响.[方法]Survivin ASODN经脂质体介导转染人小细胞肺癌细胞株NCI-H446,用RT-PCR法、Western blot法检测Survivin表达;Survivin ASODN单独、联合Taxol作用NCI-H446细胞后,用MTT法检测细胞生长抑制率,台盼兰拒染实验检测细胞死亡率,流式细胞仪检测细胞凋亡并计算两药相互作用指数(CDI).[结果]Survivin ASODN转染NCI-H446细胞后,Survivin mRNA表达和蛋白表达明显下调,其中SurvivinASODN 500nM作用72h时Survivin mRNA抑制率达62.72%,效果最佳;Survivin ASODN单独或联合Taxol作用NCI-H446细胞后发现Survivin ASODN联合Taxol作用的效果明显优于两药单独应用(P＜0.01).其联用时细胞凋亡率达73.3%,而单用时分别为43.6%和23.8%.其联用时细胞生长抑制率达80.1%,而单用时抑制率分别为50.4%和30.5%(P均＜0.01).两药联用组细胞死亡率达69.9%,高于两药单用时的41.4%和24.8%(P均＜0.01);CDI值为0.43,表明两药具有显著协同作用.[结论]Survivin ASODN能够抑制肺癌细胞株Survivin mRNA和蛋白表达并诱导肺癌细胞凋亡;Survivin ASODN能够增加Taxol的敏感性.     

纤维支气管镜活检病变组织标本和痰标本Survivin基因的检测对肺癌的诊断价值

目的明确纤维支气管镜(以下简称纤支镜)活检病变组织和痰标本中SurvivinmRNA的检测在肺癌诊断中的意义。方法应用逆转录聚合酶链反应(RT PCR)法检测41例肺癌手术标本癌组织、癌旁组织和9例良性肺疾病病变组织手术标本,80例肺癌和30例良性肺疾病纤支镜活检病变组织标本及所有(160例)患者痰标本SurvivinmRNA表达情况,并与病理组织学、刷检细胞学和痰细胞学检查结果比较。结果肺癌手术切除标本癌组织SurvivinmRNA的阳性率为70.7%(29/41),高于癌旁组织[17.1%(7/41)]和良性肺疾病组织(1/9),差异有统计学意义(χ2值分别为23.97和10.93,P均<0.05),而癌旁组织与肺良性疾病组织相比,差异无统计学意义(χ2=0.20,P>0.05);纤支镜活检肺癌组织标本SurvivinmRNA的阳性率为63.8%(51/80),高于良性肺疾病的13.3%(4/30,χ2值为22.18,P<0.05);肺癌患者癌组织SurvivinmRNA表达与否及表达水平与患者年龄、性别及肿瘤的病理分型、分级、部位及转移情况均无明显相关性(P均>0.05)。肺癌患者痰标本SurvivinmRNA的阳性率是59.5%(72/121),癌细胞的检出率是47.1%(57/121);痰Survivin mRNA检测联合痰细胞学检查诊断肺癌的敏感性为80.2%(97/121),高于单独痰细胞学及单独痰SurvivinmRNA检测的敏感性(P均<0.05)。手术标本、纤支镜活检标     

普通型向重型演变的新型冠状病毒肺炎病人的危险因素分析

目的 探讨新型冠状病毒肺炎（COVID-19）病人普通型向重型演变的临床危险因素。 方法 收集24例普通型向重型演变COVID-19病人的临床资料（演变组）,分析临床特征、血液检验、炎性指标、胸部CT影像学特征及抗病毒治疗,并与同期41例普通型病人（普通型组）的临床资料进行比较,分析COVID-19病人普通型向重型演变的可能危险因素。 结果 临床特征,演变组在合并基础疾病和呼吸频率上与普通型组比较差异有统计学意义（P<0.05）,但在性别、年龄和临床症状上2组病人差异无统计学意义（P>0.05）。血液学检验结果分析,演变组淋巴细胞计数和血浆白蛋白明显低于普通型组（P<0.05）,演变组血糖和尿素明显高于普通型组（P<0.05）。但在白细胞计数、血小板计数及丙氨酸氨基转移酶差异均无统计学意义（P>0.05）。演变组炎性指标明显高于普通型组（P<0.05）。COCID-19普通型病人影像学表现为双肺磨玻璃阴影、斑片状影及实变影,双肺弥漫性磨玻璃阴影伴支气管充气征,两肺大面积实变影伴肺间质改变更易向重型演变,临床应重视。两种抗病毒药物联合和三种药物联合,在演变组和普通型组间差异无统计学意义（P>0.05）。 结论 COVID-19普通型向重型演变的可能危险因素有合并基础疾病、呼吸频率、淋巴细胞计数、血糖、白蛋白、尿素水平、炎症因子和影像学表现。     

建立现代化诊断学模拟实验中心的实践

目的探讨诊断学教学改革新方法的效果。方法建立现代化诊断学模拟实验中心:检体诊断模拟实验室、器械诊断模拟实验室、实验诊断示教室的教学新方法与传统的教学方法进行比较。结果改革后学生学习兴趣增加、考试成绩明显提高,与改革前比较差异有显著性(P<0.05)。结论建立现代化诊断学模拟实验中心,加强学生实际操作技能,势在必行。     

乙双吗啉治疗银屑病致急性粒细胞白血病3例

乙双吗啉治疗银屑病致急性粒细胞白血病３例杨艳丽李殿明丁可例１男性，３６岁，军人。因头晕、乏力１月伴牙龈出血１０ｄ，于１９９２年１１月４日来我院就诊。１年前患银屑病间断服用乙双吗啉，开始用药３０ｇ，病情好转停药，以后间断用药达１年，总量约８０ｇ。体检：...     

凋亡抑制基因survivin反义寡核苷酸联合bcl-2反义寡核苷酸诱导肺癌细胞株凋亡的实验观察

目的：探讨凋亡：抑制基因survivin反义寡核苷酸单用或联用bcl-2反义寡核苷酸对肺癌细胞株的作用，探讨其在抗癌方面的作用。方法：①实验于2002-08／2003-04在蚌埠医学院免疫学实验室完成。将对数生长期NCI—H446细胞分为6组：空白对照组，脂质体10mg／L组（仅加空脂质体），NSODN 500nmol／L组（该3组均为对照组），survivin反义寡核苷酸500nmol／L组，bcl-2反义寡核苷酸5μmol／L，survivin反义寡核苷酸500nmol／L＋bcl-2反义寡核苷酸5μmol／L组（分别在脂质体介导下转染不同寡核苷酸，48h后收取细胞进行以下检测）。②在脂质体介导下，以survivin的反义寡核苷酸作用于肺癌细胞株NCI-H446和SPC—A1，于72h用反转录聚合酶链反应检测survivin mRNA表达。凋亡指数：（静止期／DNA合成前期）占整个细胞周期的百分比；增殖指数=（DNA复制期＋合成后期／有丝分裂期）占整个细胞周期的百分比。②survivin反义寡核苷酸单独或联合bcl-2反义寡核苷酸作用NCI—H446后，用四甲基偶氮唑盐法检测细胞生长抑制率并计算两药相互作用指数，锥虫蓝拒染实验检测细胞死亡率。（3）计量资料差异性比较采用方差分析和q检验。结果：①两种肺癌细胞株皆表达survivin基因。survivin反义寡核苷酸作用细胞株后，出现生长抑制和细胞凋亡，细胞survivin mRNA明显下调，反义寡核苷酸500nmol／L作用72h后NCI—H446和SPC—A1细胞survivin mRNA抑制率分别达62．72％和67．43％。②四甲基偶氮唑盐法检测结果显示，survivin反义寡核苷酸和bcl-2反义寡核苷酸单独应用对NCI—H446细胞均有生长抑制作用；联合应用survivin反义寡核苷酸和bcl-2反义寡核苷酸的细胞生长抑制率为64．9％，优于单独应用（单用bcl-2反义寡核苷酸为34．2％）（P〈0．01），两药相互作用指数为0．708。锥虫蓝拒染实验显示，survivin反义寡核苷酸500nmol／L＋bcl-2反义寡核苷酸5μmol／L组细胞死亡率为62．1％，高于两药单用时的31．4％和41．4％。流式细胞仪检测凋亡显示，与各对照组相比，survivin反义寡核苷酸和bcl-2反义寡核苷酸均可诱导细胞凋亡，凋亡率分别为43．6％和30．7％，两者联用凋亡率提高到58．6％（p〈0．01）。结论：①survivin反义寡核苷酸能抑制肺癌细胞株survivin基因表达，并诱导细胞凋亡和抑制生长。②survivin反义寡核苷酸联合bcl-2反义寡核苷酸具有显著协同抗癌作用。     

以血液系病变为首诊的系统性红斑狼疮20例临床分析

目的：探讨系统性红斑狼疮(SLE)的血液系统改变。方法：20例以血液系统病变为首诊的SLE患，分析其临床表现、体征及外周血象、骨髓象改变。结果：20例患中贫血16例，白细胞减少10例，血小板减少12例，骨髓细胞学检查示：缺铁性贫血(IDA)2例，再生障碍性贫血(AA)1例，溶血性贫血(HA)3例，环形铁粒幼细胞性贫血1例，原发性血小板减少性紫癜(ITP)2例，余骨髓象为非特异性改变。结论：以血液系统改变为首发或突出症状的SLE患，早期临床症状不典型，故对于年轻女性，若伴有骨髓象示ITP、AIHA或血细胞减少而骨髓细胞形态无异常，应进行免疫学筛选及随访，警惕SLE可能。     

血清CEA、D-D、ALB、NLR与非小细胞肺癌的相关性及联合诊断价值分析

目的 分析血清癌胚抗原(CEA)、D-二聚体(D-D)、清蛋白(ALB)、中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)与非小细胞肺癌(NSCLC)的相关性,评估其诊断价值.方法 收集NSCLC患者92例,根据病理类型(鳞癌组、腺癌组)、临床分期(Ⅰ+Ⅱ+Ⅲ期、Ⅳ期)、卡氏评分(KPS)(非依赖组:KPS 80～100分、半依赖组KPS:50～70分)进行分组,比较各组CEA、D-D、ALB、NLR的差异,并进行统计学分析.结果 NSCLC患者中,腺癌组血清CEA、D-D水平显著高于鳞癌组(P<0.05);Ⅳ期患者血清CEA、D-D、NLR水平显著高于Ⅰ+Ⅱ+Ⅲ期患者,ALB水平显著低于Ⅰ+Ⅱ+Ⅲ期患者(P<0.05);半依赖组D-D、NLR水平显著高于非依赖组,ALB水平显著低于非依赖患者(P<0.05).Spearman相关显示NSCLC患者病理类型与CEA、D-D水平呈正相关(P<0.05);临床分期与CEA、D-D、NLR水平呈正相关,与ALB水平呈负相关(P<0.05);KPS评分与CEA、D-D、NLR的水平呈负相关,与ALB水平呈正相关(P<0.05).ROC曲线分析显示血清CEA+D-D联合检测较CEA、D-D单独检测对诊断NSCLC患者鳞/腺癌的灵敏度最高,依次为72.50％、58.80％、62.70％;血清CEA+D-D+NLR+ALB联合检测较CEA、D-D、ALB、NLR单独检测对评估NSCLC临床分期的灵敏度(依次为87.00％、68.10％、79.70％、82.60％、79.70％)及特异性(依次为78.30％、78.20％、52.00％、53.60％、69.60％)最高.D-D+NLR+ALB联合检测较D-D、ALB、NLR单独检测对评估身体功能状态的特异性最高,依次为84.50％、72.40％、44.10％、82.80％.结论 血清CEA、D-D、ALB、NLR与NSCLC患者病情密切相关,联合检测可用于患者病理类型、临床分期及身体功能状态的鉴别诊断.     

血清碱性磷酸酶和血清钙水平测定对原发性肺癌骨转移的临床诊断价值

目的:探讨血清碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、血清钙水平测定对原发性肺癌骨转移的临床诊断价值.方法:收集确诊为原发性肺癌患者342例,其中发生骨转移者120例,无骨转移者222例,于入院第2天清晨空腹抽取静脉血2 mL,采用全自动生化分析仪对所有患者进行血清ALP、血清钙检测,并计算校正血钙水平.结果:不同病理类型肺癌骨转移发生率差异有统计学意义(P<0.05).肺癌骨转移组血清ALP、校正血钙水平均明显高于无骨转移组(P<0.01).多发骨转移组(骨转移数≥2)ALP水平均明显高于单发骨转移组及无骨转移组(P<0.01);多发与单发骨转移组校正血钙水平均明显高于无骨转移组(P<0.01),但多发骨转移组与单发骨转移组校正血钙水平差异无统计学意义(P>0.05).血清ALP与校正血钙在肺癌骨转移诊断中的灵敏度分别为40.8%、60.0%,特异度分别为79.7%、75.2%,联合检测血清ALP及校正血钙水平时灵敏度及特异度均较高,分别为78.3%、61.7%.结论:不同病理类型肺癌患者骨转移发生率不同;单独或联合检测血清ALP及校正血钙对诊断肺癌骨转移有较高的灵敏度及特异度,有一定的辅助诊断价值.     

let-7a1和let-7c在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的探讨人类微小RNA let-7a1和let-7c在肺癌组织中的表达及与临床病理特征之间的关系。方法收集53例肺组织手术标本及临床资料,其中包括肺癌组织44例（收集其癌组织和癌旁正常组织）和良性肺疾病组织9例。并收集病人吸烟史、肿瘤TNM分期、病理分化程度及有无淋巴结转移等。采用Trizol法提取总RNA,采用荧光定量PCR检测let-7a1和let-7c的表达,分析其在肺癌组织、癌旁正常组织及良性肺疾病组织中的表达差异及与临床特征的关系。结果肺癌组织中let-7a1和let-7c的相对表达量均低于癌旁正常组织和良性肺疾病组织（P < 0.05）;癌旁正常组织中let-7a1和let-7c的相对表达量均低于良性肺疾病组织（P < 0.05）。let-7a1表达与分化程度、吸烟和TNM分期有关（P < 0.05~P < 0.01）,与淋巴结有无转移无关（P>0.05）。let-7c表达与淋巴结转移、分化程度有关（P < 0.01）,与吸烟、TNM分期无关（P>0.05）。结论let-7a1和let-7c基因在肺癌组织中相对表达量降低,并且随临床分期进展、淋巴结转移呈明显下降趋势,提示两者与肺癌的发生、发展及转移密切相关,let-7a1和let-7c可能成为肺癌早期诊断生物标志因子,并可能成为肺癌的靶向治疗新的靶点,为高危人群的早期干预提供实验依据。