乙肝表面抗原阳性反应血清的乙肝病毒核酸检测分析

[目的]探讨HBsAg血清学阳性反应标本的HBV核酸检测状况. [方法]留取血站6个月志愿者标本6 000例,酶联免疫检测(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)HBsAg阳性标本70例,将阳性标本分组:国产进口两种酶免试剂检测同时强阳性反应标本30例(S/CO≥5);国产进口两种酶免试剂检测同时弱阳性反应标本22例(S/CO<5);单一进口酶免试剂检测阳性反应标本17例;单一国产酶免试剂检测阳性反应标本1例.采用核酸检测技术(Nucleic Acid Test,NAT)对70例酶联免疫检测阳性反应标本进行HBV核酸检测. [结果]两种酶免试剂检测同时强阳性标本(S/CO≥5)组NAT检测结果30例均为阳性;两种酶免试剂检测同时弱阳性标本(S/CO<5)组NAT检测结果20例阳性,2例阴性;单一进口试剂检测阳性标本NAT检测结果10例阳性,7例阴性;单一国产试剂检测阳性标本,1例NAT检测结果为阴性. [结论]HBsAg阳性反应血清的HBV核酸检出率与S/CO值的高低和两种酶联免疫试剂检测结果符合度有一定关联,核酸扩增技术对现行血筛试剂有一定补充作用.     

四氯化碳造成急性肝损伤大鼠模型的实验研究

目的评估建立四氯化碳(CCl4)造成大鼠急性肝损伤模型的效果。方法健康SPF级SD大鼠40只,随机分为模型组(n=30):腹腔注射50%CCl4橄榄油溶液3 ml/kg.只;对照组(n=10)腹腔注射生理盐水溶液3ml/kg.只。比较造模后24、72 h、1周3个时间点模型鼠外周血AST/ALT水平及造模后24、48 h模型鼠存活率,观察造模后24 h模型鼠肝脏组织病理改变。结果造模后24、72、1周3个时间点急性肝损伤模型鼠ALT/AST水平为(198.45±15.02)/(498.2±29.83)、(154.27±11.82)/(373.58±20.45)、(88.4±6.8)/(224.7±29.55),明显高于对照组相应时间的ALT/AST(P0.01),造模后24 h和48 h模型组实验动物存活率分别为40%和10%,对照组实验动物存活率均为100%(P0.01),病理切片显示模型鼠肝脏呈急性肝坏死表现。结论所构建的CCl4造成大鼠急性肝坏死造模体系适宜实验需求。     

治疗性血浆置换在神经系统疾病中的应用

血浆置换的概念始于1914年,随着新的高选择性血浆分离技术的推广,血浆置换应用得日益广泛。1980年代中期我国开始应用治疗性血浆置换(theraputic plasma ex-change,TPE)治疗各种重症疾病。传统的TPE是将患者血浆非选择性地分离,再将去除血浆后的血液有形成分以及所需补充的白蛋白(或血浆)、平衡盐液等回输到患者体内,以达到治疗目的。随着血浆体外处理技术的发展,特别是各种新型特异性材料的应用,TPE的安全性和选择去除特异性得到了极大的提高,促进了TPE在各种疾病中的应用。笔者对TPE在神经系统疾病中的应用进展做一简要介绍。1 TP…     

间充质干细胞及其在肝脏疾病治疗中的应用

干细胞已成为当今再生医学和组织工程医学的研究热点.尤其是间充质干细胞( MSCs)因其来源于成体组织,具有多向分化潜能及免疫逃逸等特性,成为细胞移植治疗的理想种子细胞.综述了间充质干细胞的生物学特性及其在肝脏疾病治疗中的应用.     

树突状细胞表达分子DC-SIGN在HIV-1感染传播中的作用

DC SIGN是一种特异性表达于树突状细胞 (DC)表面的Ⅱ型跨膜蛋白 ,它可以通过识别人HIV 1包膜糖蛋白gp12 0介导DC与HIV 1特异性粘附 ,并增强HIV 1感染力 ,在HIV 1水平和垂直传播过程中起重要作用。分析DC SIGN影响HIV 1传播过程的分子机制有利于探讨HIV 1感染的免疫和基因治疗 ,本文拟就有关问题作一综述。     

脐血混合培养纯化人间充质干细胞及生物学特性研究

目的探讨体外分离、混合培养纯化人脐血间充质干细胞的适宜体系,观察该人脐血间充质干细胞生物学特性。方法收集孕足月新生儿脐血,每3份脐血[(70—100)ml/份]混合;采用1.077 g/ml的淋巴细胞分离液(Ficoll)以1 500 r/min密度梯度离心法分离脐血中的单个核细胞,在Mesencult培养基中贴壁培养筛选人脐血间充质干细胞,显微镜下观察细胞生长形态变化,细胞计数并绘制细胞生长曲线,流式细胞仪检测细胞抗原表达,分析细胞周期;体外诱导脐血间充质干细胞成脂、成骨分化。结果密度梯度离心法所获得的单个核细胞,在培养基中培养约3—5 h开始出现贴壁生长,24 h后贴壁细胞增多,呈明显纺锤状,10 d后开始出现细胞克隆,3周后呈漩涡状生长。原代培养时间为15 d,P1代倍增时间为26 h。流式细胞仪鉴定:贴壁生长的细胞表达CD29、CD44和CD105,不表达CD34、CD45。分化潜能鉴定体外培养细胞可以成脂、成骨分化。结论所贴壁培养出的细胞的生长形态、流式表形、分化潜能具有人脐血间充质干细胞生物学特征,混合培养可以提高间充质干细胞培养成功率,实验中采用的培养体系适宜人脐血间充质干细胞的分离培养。     

COBAS S201核酸检测系统在献血者血液筛查中的应用

目的 采用罗氏COBAS S201核酸检测系统,调查东莞市现行血液筛查系统的残余风险,以评估开展核酸检测（nucleic acid amplification technique,NAT）的必要性和可行性.方法 对2008年7月31日至2009年3月31日期间经ELISA检测阴性的40 018份献血者血液样本,采用罗氏COBAS S201检测系统进行HBV DNA,HCV RNA,HIV RNA检测.COBAS S201检测为阳性的献血者样本,分别采用COBAS Ampliprep/Taqman平台做核酸定量检测和罗氏ECL电化学发光检测系统作乙肝＂两对半＂实验,以帮助分析判定样本的感染状态.结果 发现31例核酸反应性样本,阳性率为0.77‰,其中有17例为HBV核酸反应性,残余风险为1/2354～1/1291,COBAS S201核酸检测系统的临床特异性为99.97%.结论 现行的血液筛查策略为两遍ELISA检测,但仍然存在输血传播疾病的风险.COBAS S201系统操作安全简便,包含罗氏专利技术的防污染技术,可确保检测结果准确可靠,适合于对献血者血液常规筛查.     

自动和手工制备浓缩血小板的质量评价

目的比较自动和手工两种方法制备浓缩血小板的质量及其影响因素。方法将200冽献血者（献血前72小时内未服用过阿斯匹林类药物，采血顺畅）随机分为两组：自动分离制备组和手工分离制备组。采用全自动五分类血细胞计数仪检测血小板计数、红细胞混入量，进行血小板质量评价。结果手工分离制备组制备的血小板计数：（5．31±0．20）×10^10／L，自动分离制备组血小板计数为7．57±0．20×10^10／L；手工分离制备组红细胞混入量为（2．50±0．293）×10^10／L，自动分离制备组红细胞混入量为（1．07±0．03×10^10／L。经统计学分析，自动与手工制备组两项指标均具有统计学差异。自动分离组和手工分离组单袋体积分别为49．55±0．45ml和51．85±0．71ml。没有统计学差异。结论自动分离制备组所制备浓缩血小板与手工组比较．无论是血小板数量还是红细胞混入量．自动分离制备组的效果相对比较好。     

现行常规采血流程对HIV RNA筛查的影响评估

目的了解样本采集、运输和储存等过程对HIV病毒核酸检测的影响，评估在现行常规采血流程条件下进行HIV RNA NAT（nucleic acid amplification techniques）筛查的可行性。方法采用Roche公司AmpliScreen HIV筛查试剂，确定本实验室条件下的检测灵敏度；模拟实际采血流程，设计不同的保存时间、保存温度和溶血程度等样本保存条件，验证以上因素对检测灵敏度的影响。结果本实验条件下Roche公司AmpliScreen HIV筛查试剂检测灵敏度为10IU／ml，4℃条件下血浆保存72h对检测灵敏度无显著影响，溶血对HIV RNA筛查有严重影响。结论现行常规采血流程可以适合HIV RNA NAT筛查。     

治疗性血细胞单采术的临床应用

治疗性血细胞单采是指分离和去除患者血液中某些病理性成分,回输其正常成分的一种见效迅速、安全的治疗技术[1],根据治疗性血细胞单采术中移走细胞的种类可将血细胞单采术分为白细胞单采术、红细胞单采术和血小板单采术三类。传统血细胞单采术多采用离心式血液分离机,按各种细胞成分比重的不同,经过离心把血液中不同成分分离开。近年来,类似于G1吸附柱和Asahi滤器的革新技术被用于血液成分单采术,这种将膜滤式、吸附柱式及传统离心式三种血液分离机的特性相结合进行的技术革新,使G1吸附柱和Asahi滤器可以在去除病理性细胞成分的同时去除血…