5-氟尿嘧啶联合L-精氨酸治疗裸鼠人肝癌移植瘤的研究

目的观察5氟尿嘧啶联合L精氨酸对裸鼠人肝癌移植瘤的作用并探讨其作用机制。方法采用BEL7402细胞株建立裸鼠人肝癌移植瘤模型,分别给裸鼠腹腔注射生理盐水,5氟尿嘧啶,5氟尿嘧啶+L精氨酸,观察各组药物对肿瘤的抑制作用,病理学观察移植瘤的坏死程度和范围,免疫组化测定移植瘤组织内诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达。化学比色法检测诱导型一氧化氮合酶的活性。硝酸还原酶法检测瘤组织内的一氧化氮的浓度,统计分析采用SPSS10.0软件进行onewayANOVA,Bonferroni,KruskalWallisH检验。结果5氟尿嘧啶联合L精氨酸能明显增加对肿瘤生长的抑制作用,病理显示肿瘤的坏死范围增大,iNOS表达和活性增强,NO生成增加。结论5氟尿嘧啶联合L精氨酸能够抑制裸鼠人肝癌移植瘤的生长,其机制可能与诱导iNOS表达和活性增强,NO生成增加有关。     

组蛋白去乙酰化酶4在人肝癌细胞Bel7402中的表达及其意义

目的：研究组蛋白去乙酰化酶4（histone deacetyase4，HDAC4）在人肝癌细胞株Bel-7402中的表达，及其对Bel-7402细胞增殖和分化的调控作用。方法：培养Bel-7402细胞，以组蛋白去乙酰化酶抑制剂苯丁酸钠（sodium phenylbutyrate，SPB）作用于Bel-7402，RT—PCR检测用药前后HDAC4 mRNA的表达水平，倒置相差显微镜观察细胞形态改变，MTT比色法观察SPB对Bel-7402生长的抑制作用，流式细胞术分析细胞周期，免疫组化法观察Bel-7402细胞P27蛋白的表达水平。结果：SPB处理后Bel-7402中HDAC4mRNA的表达水平降低（0．88±0．13，0．12±0．04，P〈0．05）；SPB处理后Bel-7402细胞生长受到明显抑制，且与SPB剂量和作用时间相关；同时细胞形态出现成纤维细胞样改变；细胞周期阻滞于G。期[（50．6±4．0）％，（78．8±3．6）％，P〈0．05）]；P27蛋白表达水平增强（23±11，61±7，P〈0．05）。结论：SPB降低HDAC4在人肝癌细胞中的表达，从而诱导部分人肝癌细胞分化，该作用与P27蛋白水平变化有关。     

颈肩部疼痛胸闷憋气转氨酶极度升高

1 病例简介 患者，女，20岁，学生。主诉“间断头晕5d，颈背部疼痛伴胸闷、憋气3d”。5d前患者打30min篮球后感到头晕，为间断性，口服藿香正气片4片后不缓解；第3天右肩部出现疼痛，后左肩部及颈部相继出现疼痛，伴轻度乏力、出汗，无发热、恶心、呕吐，无咳嗽、咳痰等。在当地诊所服去痛片6片，疼痛未缓解。第4天颈部出现剧烈的疼痛，伴胸闷、憋气、双上肢轻度酸痛，尿呈酱油色。在当地医院检查示：丙氨酸氨基转移酶（ALT）372U／L、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）2140U／L、总胆红素（TBiL）5．12mmol／L，血脂生化指标正常；尿常规：隐血（＋＋＋）、蛋白（＋＋＋）；     

食管癌的诊断及治疗：食管早癌的诊断技术及治疗原则

近年来,消化内镜技术的发展使食管早癌的诊断率明显提高,同时也促进了胃镜下黏膜切除术（EMR）和胃镜下黏膜剥离术（ESD）产生和发展.     

组蛋白去乙酰化酶4和血管内皮生长因子受体-1对肝癌细胞株HepG2侵袭黏附的影响

目的研究组蛋白去乙酰化酶4(histone deacetylase 4,HDAC4)和血管内皮生长因子受体-1(vascular endo-thelial growth factor receptor-1,VEGFR-1)在肝癌细胞株HepG2中的表达,观察组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histonedeacetylase inhibitors,HDACI)苯丁酸钠(sodium phenylbutyrate,SPB)作用于肝癌细胞株HepG2后,HDAC4、VEG-FR-1之间的变化及对肝癌细胞株HepG2侵袭、黏附作用的影响。方法体外培养肝癌细胞株HepG2,分为对照组、实验组,对照组常规培养,实验组加入苯丁酸钠。分别以免疫细胞化学及Western-blotting检测HDAC4、VEG-FR-1蛋白的表达及蛋白表达变化;应用Transwell小室观察SPB对肝癌细胞株HepG2侵袭力的影响,应用MTT方法测定SPB对HepG2黏附作用的影响。结果体外培养人肝癌细胞株HepG2,免疫细胞化学试验及Western-blot-ting显示HepG2细胞株表达HDAC4和VEGFR-1;Western-blotting显示,实验组SPB抑制HDAC4、VEGFR-1的表达,并呈现时间及剂量依赖关系;应用Transwell小室观察经SPB作用后,实验组、对照组细胞的穿膜细胞数分别为161.80±46.80、329.20±55.99,抑制率达到50.85%,有统计学意义(P<0.01);MTT方法测定黏附作用显示SPB实验组细胞的黏附率较对照组明显下降(P<0.01)。结论 HDAC4、VEGFR-1在肝癌细胞株HepG2中表达,SPB对HDAC4、VEGFR-1的表达有抑制作用;并对HepG2细胞株有抑制其侵袭及黏附的作用。     

自分泌一氧化氮在氟尿嘧啶诱导人肝癌细胞凋亡中的作用研究

目的 :观察肝细胞Bel74 0 2自分泌一氧化氮 (NO)在 5 -氟尿嘧啶 (5 FU)诱导人肝癌细胞凋亡过程中的作用 ,进一步揭示 5 FU的作用机理 ,同时寻找提高 5 FU的临床疗效的辅剂。方法 :人肝癌细胞Bel74 0 2按常规条件培养于含 10 %小牛血清的无L 精氨酸 (L Arg)的DMEM (dulbecco’smodifiedeagle’smedium)培养液中。在 5 FU作用下 ,采用免疫组化法观察诱生型一氧化氮合酶 (iNOS)的表达情况 ,并在其底物L Arg存在的前提下 ,采用酶法测定硝酸盐 /亚硝酸盐 ,反映NO的生成 ,并证明其作用。用电镜观察凋亡细胞的形态 ,流式细胞仪进行凋亡细胞的定量。用L Arg的竞争性拮抗剂L NAME(Nω nitro l argininemethylester)对研究结果进行验证。应用病理彩色图文分析系统对免疫组化结果进行光密度定量分析。采用方差分析和t检验进行统计学分析。结果 :在 5 FU的作用下 ,iNOS表达增强 ,5 FU组 (0 1687± 0 0 1968) ,对照组 (0 10 4 9± 0 0 12 66) ,P <0 0 5 ,在其底物L Arg存在的前提下 ,内源性NO的浓度为 (73 0± 10 2 ) μmol/L(P <0 0 5 ) ,有显著性提高 ;人肝癌Bel74 0 2细胞株的凋亡率显著性增高为 (17 85± 0 78) % ,细胞坏死率和残渣率显著减少分别为 (32 99± 0 83) %、(3 18± 1 0 1) %。L NAME     

精氨酸及其产物在消化道肿瘤中的作用

一氧化氮作为第2信使及自由的生物活性分子,在体内有着极为复杂且不可替代的生物学作用.精氨酸作为一氧化氮产生的唯一前体,也成为研究的热点.目前的研究发现,人体内精氨酸的含量与消化道肿瘤细胞的生长和凋亡密切相关.该文就精氨酸及其产物在消化道肿瘤发生发展过程中的作用及可能的机制作一综述,介绍与此有关的研究进展.     

原发性肝细胞癌中iNOS与p16、Bax的表达及其与细胞凋亡的关系

目的：探讨在原发性肝细胞癌（HCC）中一氧化氮化酶（iNOS）的表达对p16、Bax表达的影响凋亡的关系。方法采用免疫组化的方法对HBsAg均阳性的49例HCC患者的iNOS、p16、Bax表达进行定位和半定量分析。采用TUNEL法测检测细胞凋亡。结果iNOS和Bax以棕黄色颗粒着色于细胞质和（或）细胞膜中，细胞核阴性，间质细胞着色不明显。p16以棕黄色着色于细胞核中，细胞中偶见。细胞凋亡细胞核着色，细胞阴性。p16、Bax的表达及细胞的凋亡与iNOS的表达有关。结论iNOS表达可诱导抑癌基因p16、Bax的表达和细胞凋亡的发生，从而影响HCC的分化，故在诱导HCC中iNOS的表达，有望提高肝细胞癌的临床治疗效果。     

苯丁酸钠对人肝癌细胞分化及P~(21WAF1/CIP1)表达的调控

目的:探讨苯丁酸钠诱导人肝癌细胞Bel7402,HepG2生长抑制、分化和细胞周期阻滞,以及对抑癌基因P21WAF1 /CIP1表达的影响。方法:培养Bel7402,HepG2,应用MTT比色法观察苯丁酸钠对Bel7402,HepG2的生长抑制作用,倒置相差显微镜观察细胞形态改变,流式细胞术分析细胞周期,以RTPCR检测Bel 7402,HepG2细胞中P21WAF1 /CIP1基因表达水平,WESTERN印记法检测P21WAF1 /CIP1蛋白的表达。结果:苯丁酸钠 2, 4, 8mmol·L-1处理 72h后Bel 7402, HepG2 的抑制率分别为 28. 43 %,57. 61 %, 71. 32 %和 27. 42 %, 57. 11 %, 70. 31 %处理后的细胞成纤维母细胞样改变,细胞阻滞于G期,P21WAF1 /CIP1基因和蛋白表达水平均增强。结论:苯丁酸钠抑制 2种人肝癌细胞株的生长,诱导部分人肝癌细胞分化,使细胞阻滞于G1期,苯丁酸钠能诱导P21WAF1 /CIP1基因的表达,增加P21WAF1 /CIP1蛋白的表达水平。