肿瘤热休克蛋白70-多肽复合物诱导特异性细胞毒T淋巴细胞产生的实验研究

目的　研究肿瘤细胞的热休克蛋白 70多肽复合物 (heatshockprotein 70peptide complexes ,HSP PC70 )诱导活化肿瘤特异性细胞毒T淋巴细胞 (cytotoxicTlymphocytes,CTL)的作用及该CTL的杀瘤效应。方法　利用细胞培养 ,流式细胞技术 ,蛋白质的分离纯化技术 ,电泳技术 ,Western blot检测方法 ,T淋巴细胞的诱导及体外扩增 ,酶标技术等 ,测定肿瘤HSP70 多肽复合物诱导活化小鼠体内CTL产生的作用。结果　HcaF细胞HSP PC70的自然表达率为 6 3.5 % ,热诱导后为 75 .5 % ;HcaF细胞的HSP PC70能够诱导活化肿瘤特异性的CTL ,该CTL在效靶比例为 5 0∶1、2 5∶1、12 .5∶1时于体外对HcaF细胞的杀伤效率分别为 84.2 %± 3.2 %、47.9%± 2 .6 %和 14.8%± 3.0 % ;该CTLCD3、CD8的阳性率分别为 93%± 7% ,92 %± 8% ;将活化的CTL注入荷瘤小鼠体内可见明显的治疗作用 ,注入 10 7CTL 4次后 ,10 0 %的小鼠获长期生存。结论　肿瘤来源的HSP PC70具有强大的免疫原性 ,可活化CD8 T淋巴细胞成为肿瘤特异性的CTL ,该CTL具有较高的体外杀瘤活性和良好的治疗作用。     

DNA的应激性损伤

DNA损伤可激活一系列复杂的调节DNA修复以及激活细胞周期检验点的信号网络。Yaffe等最近指出，在经过DNA损伤类抗肿瘤药物处理后，p53缺陷的肿瘤细胞依赖一个可选择的、平行的信号途径来激活细胞周期检验点。     

阿托伐他汀钙的合成研究进展

目的介绍了阿托伐他汀钙的研究背景,作用机制以及合成的研究进展。方法综合国内外报道的文献,阐述阿托伐他汀钙的合成方法。结果重点列出了3条阿托伐他汀钙的合成路线,重点分析了Paal-Knorr合成法。结论 Paal-Knorr合成法中,2种重要中间体的各种合成路线为阿托伐他汀钙的高效合成提供了新的思路。     

纯合型家族性高胆固醇血症家系基因型与表型分析

目的对1个纯合型家族性高胆固醇血症(HoFH)家系进行遗传学分析.方法前瞻性研究.选择西安市儿童医院心内科2018年10月确诊的1个HoFH家系先证者及家系成员共20人为研究对象,收集临床资料,提取基因组DNA,对先证者进行全外显子靶向捕获二代测序,并在家系内进行Sanger测序验证.对家系成员杂合突变携带者和未携带者的基因型与表型进行分析.结果先证者为7岁10月龄男性患儿,生后尾骨处皮肤可见圆形绿豆大小黄色皮肤突起,3~4岁起双侧肘关节、膝关节及跟腱处皮肤逐渐出现直径0.5~1.5 cm的黄色瘤样结节,患儿身高、体重、智力发育与同龄儿相同.家族其他成员无类似皮肤黄瘤.患儿总胆固醇(TC)18.16~21.24 mmol/L,低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)14.08~15.51 mmol/L,颈部超声提示双侧颈动脉及椎动脉弥漫性硬化斑块,心脏彩超提示主动脉瓣增厚、钙化.基因检测确定了先证者LDLR基因携带c.418G>A(p.E140K)纯合突变,分别遗传自患儿父母,二人为近亲结婚,均携带LDLR-E140K基因杂合突变.家系中携带LDLR-E140K基因杂合突变成员TC、LDL-C和载脂蛋白B分别为(8.40±0.13)、(6.79±0.01)、(1.95±0.05)mmol/L,明显高于未携带者[(4.59±0.28)、(3.35±0.39)、(0.86±0.10)mmol/L,t=7.269、4.595、6.311,P均<0.05].结论LDLR-E140K基因纯合突变致儿童HoFH,携带纯合突变的先证者临床表型最严重,携带杂合突变的家系成员均有高胆固醇血症表型,LDLR-E 140K是家族性高胆固醇血症的致病性变异.     

抗肿瘤抗生素R588的研究 Ⅰ.抗肿瘤抗生素产生菌链孢囊菌R588的生物特性

初步研究了洋红霉素Ⅰ产生菌链孢囊菌-R588的发酵、抗菌谱及生物特性(形态、培养特征、生化反应、细胞化学组分),认为菌株R588与洋红霉素产生菌链孢囊菌 C-31751相似。定名为紫红链孢囊菌R-588(Streptos porangrum violaceorubrum Ruan and Zhang R-588)。     

糙叶败酱药材中异白花败酱醇的定性定量分析

目的:建立糙叶败酱药材中异白花败酱醇的定性和定量分析方法。方法:采用薄层色谱(TLC)法定性鉴别糙叶败酱药材中的异白花败酱醇;采用反相高效液相色谱法测定其含量,色谱柱为Agilent Eclipse plus C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-磷酸水溶液(pH2.5)=7:93,流速为1.0mL.min-1,检测波长为210nm,柱温为30℃。结果:糙叶败酱药材中异白花败酱醇的TLC鉴别特征明显,专属性好;异白花败酱醇的进样浓度在0.2～1.2mg.mL-1范围内与峰面积积分值呈良好线性关系(r=0.9997),平均加样回收率为98.8%,RSD=2.84%(n=9)。结论:所建分析方法准确、可靠,可用于糙叶败酱的质量控制。     

大鼠胚胎小脑提取液神经营养活性成分的分析

本实验观察了不同胎龄大鼠的小脑提取液（ｃｅｒｅｂｅｌｌｕｍ ｅｘｔｒａｃｔｓ, ＣＥ）对体外培养小脑及脊髓神经细胞的影响。并采用聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ ＰＡＧＥ）法鉴定了各胎龄的ＣＥ 的蛋白成分差异。制备不同蛋白浓度的１４、１６、１８、２０ ｄ 胎鼠（Ｅ１４,Ｅ１６,Ｅ１８,Ｅ２０）及新生１ ｄ 鼠（Ｐ１）的ＣＥ,加入原代培养的Ｅ１８ 胎鼠小脑及脊髓神经细胞悬液中,２４ ｈ 后以微量快速自动比色法检测细胞活性,发现实验各胎龄鼠的ＣＥ均能促进培养小脑及脊髓神经元的存活,并有蛋白浓度依赖关系,各胎龄都有各自不同的最适浓度,Ｅ１４、Ｅ１６ 和Ｅ１８ 的ＣＥ 显示了更强的神经营养活性,与对照组及其它实验组相比有极显著性差异（Ｐ＜ ０．００１）。以蛋白浓度为０．４ ｇ／Ｌ的Ｅ１８ 的ＣＥ培养新生３ ｄ 鼠（Ｐ３）脊髓细胞的结果表明,此ＣＥ可促进培养脊髓神经元的成熟和分化,抑制胶质细胞的增殖。电泳结果表明,Ｅ１６ 与Ｅ１８ 的ＣＥ中含有Ｐ１ 的ＣＥ中所没有的蛋白带,分子量分别约为２５．８ ｋＤ、４５．１ ｋＤ、８９．１ｋＤ 和１７９．５ ｋＤ,为寻找新的神经营养因子提供了线索。     

首发精神分裂症患者倒背数字作业的fMEI研究

目的利用功能磁共振成像(fMRI)探讨首发精神分裂症患者倒背数字作业激发图像的特点.方法 36例符合ICD-10诊断标准的(首发)精神分裂症患者及18名健康志愿者进行以倒背数字作业(backward digit span task, BDST)作为刺激模式、采用组块(block)设计的fMRI检查,经工作站处理后获功能图像.用阳性和阴性症状量表(PANSS)评价精神分裂症患者精神症状的严重程度. 结果 (1)健康志愿者与精神分裂症患者激活脑区的范围均较广泛,健康志愿者的左侧额上回、双侧额中回、左侧额下回、左侧中央前回、左侧顶上小叶、左侧缘上回、左侧颞下回及左侧枕颞外侧回等脑区均有明显激活.两组激活的脑区在额叶、颞叶、顶叶、枕叶及扣带回的分布,以及各脑区内部分布的差异均没有显著性(P>0.05).(2)健康志愿者与精神分裂症患者激活计数左侧额上回分别为16和11,左侧额下回分别为15和12,左侧中央前回分别为16和17,左侧颞下回分别为14和12,左侧顶上小叶分别为14和14,左侧缘上回分别为14和7,左侧枕颞外侧回分别为14和7,右侧中央前回分别为13和7,右侧枕颞外侧回分别为11和8,两组上述部位激活计数的差异均有显著性(P均＜0.05).(3)健康志愿者与精神分裂症患者左侧额叶背外侧的激活平均体积分别为(362±296)个体素和(79±101)个体素,差异有非常显著性(P=0.001);右侧顶叶后下部的激活平均体积分别为(448±273)个体素和(193±236)个体素,差异有显著性(P=0.039). 结论早期精神分裂症患者可能存在工作记忆缺陷,包括激活信息的保持及执行控制过程,激活信息的保持缺陷可能与左侧额叶腹外侧及顶叶后下部的功能低下有关,而执行控制缺陷可能与左侧额叶背外侧的功能低下有关.