T淋巴细胞亚群及其细胞因子测定对鲍曼不动杆菌感染与定植的鉴别诊断效果

目的探讨T淋巴细胞亚群及其细胞因子测定对鲍曼不动杆菌感染与定植的鉴别诊断效果。方法选取2015年1月至2019年1月昆山市第三人民医院及昆山市第一人民医院收治的106例痰培养分离出鲍曼不动杆菌的住院患者为研究对象,依据医院获得性肺炎的诊断标准将其分为感染组(54例)与定植组(52例)。比较两组患者的临床特征、T淋巴细胞亚群及其细胞因子[白细胞介素(IL)-2、IL-4、IL-17、肿瘤坏死因子(TNF)-α、干扰素(IFN)-γ]水平,分析鲍曼不动杆菌感染的危险因素。结果感染组患者阳性标本留取前使用抗菌药物时间≥10d者比例、三代头孢使用率、真菌感染率、免疫抑制剂使用率、原发疾病为慢性肺部疾病患者比例、住ICU期间重症脓毒症发生率和病死率高于定植组患者(P0.05)。感染组患者IL-2、IL-4、IL-17、TNF-α、IFN-γ水平高于定植组患者,CD4~+/CD8~+水平低于定植组患者,差异均有统计学意义(P0.05)。Logistic回归结果显示,低CD4~+/CD8~+、高IL-17和高IFN-γ水平为鲍曼不动杆菌感染的危险因素(P0.05)。结论低CD4~+/CD8~+、高IL-17和高IFN-γ水平为鲍曼不动杆菌感染的危险因素,可作为临床鉴别鲍曼不动杆菌感染和定植的指标。     

蛋氨酸裂解酶的基因克隆及序列分析

目的：克隆蛋氨酸裂解酶（METase）中阴道毛滴虫蛋氨酸裂解酶（TVMGLl）基因，探讨重组METase（rMETase）对肿瘤细胞生长的抑制作用。方法：从培养的阴道毛滴虫提取总RNA，以此为模板，利用RT-PCR获取TVMGL1基因，琼脂糖电泳分离纯化所得目的基因并克隆至T-Vector，ABI3730自动序列分析仪分析所得基因序列。结果：PCR产物经琼脂糖电泳，目的基因片段大小与预期大小相符；序列分析所得基因序列为1191bp，与国外报导的序列相符。结论：从培养的阴道毛滴虫中成功克隆出TVMGLVI基因，为METase抗肿瘤作用的研究奠定了基础。     

高效液相色谱法同时测定芝枣宁心胶囊中两组分含量

目的建立同时测定芝枣宁心胶囊中酸枣仁皂苷A、斯皮诺素含量的高效液相色谱法。方法采用Agilent Eclipse XDB C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈(A)-水(B)为流动相,梯度洗脱,0 min(12%A)→8 min(19%A)→12 min(20%A)→26 min(36%A)→28 min(35%A)→32 min(100%A)→40 min(100%A),蒸发光散射检测器,漂移管温度为45℃,气体流量为4.00 bar,紫外检测器检测波长为335 nm。结果酸枣仁皂苷A进样量在0.31～1.55μg范围内与峰面积呈良好线性关系(r=0.998 8),平均回收率为98.67%,RSD为2.68%(n=9);斯皮诺素进样量在0.59～3.00μg范围内与峰面积呈良好线性关系(r=0.999 6),平均回收率为99.14%,RSD为2.31%(n=9)。结论该方法准确可靠、简单快速,可用于芝枣宁心胶囊的质量控制。     

头孢哌酮舒巴坦钠致过敏性休克1例的抢救护理

注射用头孢哌酮舒巴坦钠为复方制剂,其抗菌谱广,对革兰氏阳性菌、阴性菌和厌氧菌均有明显抗菌作用[1]。该药已在临床广泛应用,不良反应和过敏反应少见。2012年我科室成功抢救1例静脉输入头孢哌酮舒巴坦钠发生过敏性休克的患者,现将抢救护理体会总结如下。     

黄虎胶囊质量标准研究

目的建立黄虎胶囊的质量标准。方法采用薄层色谱法,对黄虎胶囊中虎杖、黄连、山豆根、龙胆草进行定性鉴别;采用高效液相色谱法对黄虎胶囊中大黄素进行含量测定。结果薄层色谱斑点清晰、分离良好,阴性对照品溶液无干扰;大黄素质量浓度在21.84～109.20μg/mL范围内与峰面积呈良好线性关系,r为0.999 9,平均回收率为99.32%,RSD为1.87%(n=6)。结论薄层色谱法和高效液相色谱法可同时用于黄虎胶囊的质量控制。     

GC-MS研究含天然麝香小金丸与含人工麝香小金丸特征化学成分

目的:建立GC-MS法分析小金丸中的特征成分。方法:采用无水乙醇超声提取小金丸中的挥发性成分,再采用气相色谱-质谱联用技术和自动质谱解卷积定性系统(AMDIS)对其特征成分进行定性分析。结果:共鉴定出53个化学成分,含天然麝香小金丸中鉴定出30个化合物,而含人工麝香小金丸中鉴定出23个化合物。含天然麝香小金丸中检测出7个特征成分,分别是棕榈酸乙酯;乙酸脱氢异雄甾酮;3-乙基-3-羟基-雄甾烷-17-酮;去氢表雄酮;雄甾酮;3,17-二酮雄甾烷;3,17-二醇雄甾烷,其相对质量分数分别为0.11%,1.12%,2.80%,1.59%,0.56%,1.99%,1.22%。特征成分中的甾体类化合物来自于天然麝香,酯类化合物可能是天然麝香中的某些化合物与其他药物配伍反应生成的物质。结论:该方法特征性强、方法简便、重复性好,为区分含天然麝香小金丸和含人工麝香小金丸提供参考依据。     

HPLC法同时测定黄花獐牙菜根中8种成分

目的建立同时测定黄花獐牙菜Swertia kingii根中獐牙菜苷、龙胆苦苷、异荭草苷、1,3,7,8-四羟基酮-1-O-β-D-葡萄糖、当药醇苷、1,3,7,8-四羟基酮、去甲基雏菊叶龙胆酮和1,5,8-三羟基-3-甲氧基酮8种成分的HPLC方法。方法采用Agilent Zorbax ODS(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,乙腈-0.5%磷酸水梯度洗脱,体积流量为1.0 mL/min,检测波长254 nm,柱温30℃。结果獐牙菜苷、龙胆苦苷、异荭草苷、1,3,7,8-四羟基酮-1-O-β-D-葡萄糖、当药醇苷、1,3,7,8-四羟基酮、去甲基雏菊叶龙胆酮和1,5,8-三羟基-3-甲氧基酮分别在3.84~96.00μg/mL(r=0.999 6)、3.36~84.00μg/mL(r=0.999 2)、5.92~148.00μg/mL(r=0.999 8)、4.81~118.00μg/mL(r=0.999 2)、4.32~108.00μg/mL(r=0.999 3)、4.16~104.00μg/mL(r=0.999 2)、5.12~128.00μg/mL(r=0.999 4)、4.80~120.00μg/mL(r=0.999 6)与峰面积积分值呈良好的线性关系;平均回收率分别为99.59%、98.95%、98.61%、99.63%、99.31%、99.50%、99.80%、98.50%,RSD分别为0.99%、3.37%、1.87%、1.93%、1.21%、1.62%、0.54%、1.87%。结论所建方法简便、高效、准确,重复性好,可用于对黄花獐牙菜的质量控制,有利于对该植物的综合利用开发。     

黄花獐牙菜中的(口山)酮类化学成分研究

目的 研究黄花獐牙菜Swertia kingii根的化学成分。方法 采用硅胶、Sephadex LH-20等柱色谱法进行分离纯化,并根据化合物理化性质和MS、NMR等波谱数据鉴定其化学结构。结果 从黄花獐牙菜根部95%乙醇提取部位分离得到10个化合物,分别鉴定为去甲基雏菊叶龙胆酮（1）、β-谷甾醇（2）、1,3,7-三羟基（口山）酮（3）、当药醇苷（4）、1,3,7-三羟基-8-甲氧基（口山）酮（5）、1,5,8-三羟基-3-甲氧基<（口山）酮（6）、1,3,7,8-四羟基（口山）酮-1-O-β-D-葡萄糖（7）、1,3,7,8-四羟基（口山）酮（8）、1-羟基-3,7,8-三甲氧基（口山）酮（9）和1,2,6,8-四羟基<（口山）酮（10）。结论 除化合物2外,其余化合物均为首次从该植物中分离得到。     

小鼠Bax的基因克隆及其原核表达

目的 克隆小鼠Bax基因全长编码区,并原核表达小鼠Bax基因全长序列,为从转录水平探讨Bax基因与肿瘤的关系奠定基础.方法 取小鼠骨髓细胞,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)从细胞中获得Bax基因,构建重组表达质粒pet28a/Bax;酶切鉴定挑选阳性重组质粒转化大肠埃希菌ROS,测序鉴定后经IPTG 25 ℃诱导6 h,SDS-PAGE电泳判断以包涵体形式存在的带有His标签的融合蛋白,Western blot鉴定.结果 扩增获得的Bax基因CDS区全长579 bp,编码192个氨基酸残基,与GenBank中发表的序列完全一致.成功构建了原核表达载体pet28a/Bax,并在工程菌ROS中获得大量表达.结论 获得了小鼠Bax基因,并成功原核表达和制备出小鼠Bax融合蛋白,为进一步研究其生物学功能奠定了基础,并为寻找多种肿瘤性疾病的有效治疗途径提供新思路.