45例SLE患者抗CyP与ENA多肽抗体谱测定结果分析

0　引　　言系统性红斑狼疮 ( SLE)是一种全身性的自身免疫病 ,其血清学异常常表现为产生一系列特异的自身抗体 ,如抗 Sm、抗 ds- DNA、抗 U1- RNP等 ,其中可提取的核抗原 ( ENA)多肽抗体谱的出现在 SLE的发病机制中具有重要作用。近年来 ,国外有学者发现 SLE患者存在有较高水平的亲环素 ( Cy P)自身抗体 ,并与疾病的活动性密切相关 [1]。为探讨 Cy P自身抗体与 ENA多肽抗体间的关系 ,作者以 SLE患者为研究对象 ,对二者进行了测定和比较 ,现报告如下。1　材料与方法1 .1　主要试剂　重组人 Cy PA( rh Cy PA)抗原、辣根过氧化…     

再灌注治疗对心肌梗死患者血清MMP-1、TIMP-1含量和心室重塑的影响

目的探讨再灌注治疗对急性心肌梗死(AMI)患者心室重塑、心功能、血清基质金属蛋白酶-1(MMP-1)及其组织抑制因子(TIMP-1)的影响。方法对40例AMI患者分别予以常规强化内科保守治疗(常规治疗组,n=20)和在此基础上的急诊再灌注治疗(再灌注组,n=20),分别检测AMI后1周和6个月的左室舒张末期内径(LVEDD)、左室收缩末期内径(LVESD)、左室射血分数(LVEF)及二尖瓣血流舒张早期流速与心房收缩期流速的比值(VE/VA)及血清MMP-1、TIMP-1含量。结果与常规治疗组同时点亚组比较,再灌注治疗6个月亚组的LVEDD、LVESD及MMP-1均显著降低(P<0.05);两组的LVEF和VE/VA于组间和组内比较差异无显著性(P>0.05);常规治疗6个月亚组和再灌注治疗6个月亚组的TIMP-1均明显低于相应的1周亚组(P<0.05)。结论再灌注可抑制AMI后心室重塑的进展,这可能与其下调MMP-1和T1MP-1表达有关。     

流式细胞术检测VCAM-1在急性冠状动脉综合征诊断中的应用

目的对健康对照组和急性冠脉综合征病例组血清中的血管细胞粘附分子-1（VCAM-1）进行检测,观察VCAM-1在健康对照组和病例组以及不同病例类型中的变化情况。方法使用BDAria流式细胞仪及配套试剂、标准品按使用说明进行检查。结果 VCAM-1含量在健康对照组及病例组血清中含量有显著差异（P〈0.05）,病例组内稳定性心绞痛、不稳定型心绞痛和急性心肌梗死患者VCAM-1含量也存在显著性的差异（P〈0.05）。结论 VCAM-1浓度随着稳定型心绞痛、不稳定型心绞痛和心肌梗死的病程发展而逐渐增加,VCAM-1的检测对冠脉综合征的诊断和病程的判断具有一定的临床应用价值。     

贵阳市社区人群代谢综合征多重危险因素干预前后的对比分析

目的 通过对心脑血管病社区防治示范点人群进行综合干预,来观察代谢综合征(MS)各项有关指标,评价干预效果并指导干预措施.方法 2001年按照中国预防医学科学院设计的示范点基线调查要求,对贵阳市黔灵镇社区心脑血管病综合防治示范点人群(＞15岁)的多重危险因素进行调查和综合干预.抽样方法采用三阶段固定样本随机抽取1817人.经过5年综合干预后,2006年按上述方法再次三阶段固定样本随机抽取1231人进行复查.同时对该社区人群在干预前后分别进行心脑血管病事件发生率的抽样调查.结果 干预后人群MS的患病率为9.3%,较基线时(干预前)12.0%相比有明显下降(P＜0.05).干预后MS相关因素≥1,≥2,≥3个的人群发生率与基线时比较.发生率有明显下降(P＜0.01).干预后人群高血压患病率与基线时比较有明显的下降(干预后:18.1%比干预前:23.4%,P＜0.01).人群高血压知晓率、治疗率和控制率分别从基线时的17.1%、13.0%、4.6%提高到45.7%、41.4%、14.1%(P均＜0.01).人群中代谢综合征的相关指标与基线时相比,差异有显著性,其中以腰围、血糖、胆固醇、体质量指数下降明显(P＜0.01).干预后人群心脑血管病总事件发生率明显下降(干预后:2.4%比基线时:4.1%,P＜0.01).结论 通过对社区人群心脑血管病的多重危险因素的综合干预,能明显降低人群MS的患病率及其各项主要指标,人群心脑血管病总事件发生率明显下降.     

流式微球分析技术检测人心肌钙蛋白T方法的建立

目的建立流式微球分析技术（cytoometric bead assay,CBA）检测人肌钙蛋白T（cTnT）方法。方法用鼠抗人的cTnT的单克隆抗体包被在已激活的羧基化聚苯乙烯微球上,然后再用包被好的微球与检测标本进行抗原抗体免疫反应,并加入羊抗人cTnT的多克隆抗体和异硫氰酸荧光素（FITC）标记的驴抗羊的IgG,室温避光免疫反应一定时间后洗涤一次,上流式细胞仪检测FITC的荧光强度,以此测定标本中cTnT含量。结果通过正交试验,在100μl反应体系中,微球含量大约为1.25×106,选择10μg的鼠抗人cTnT单克隆抗体为最佳加入量,加入标本和抗体后,选择避光反应时间为120 min,洗涤选择一次,选择8μg/ml羊抗人cTnT多克隆抗体和20μg/ml FITC标记驴抗羊IgG为最佳工作浓度;方法检测灵敏度为16.0 pg/mL,线性范围是16-5 000 pg/mL,批内重复性变异系数为5.2-11.3%,回收率是94.7-111.5%,高浓度的胆红素、胆固醇和甘油三脂无明显干扰,与Roche Elecsys的电化学发光法有较好的相关性。结论自建CBA检测cTnT技术性能较好,可在临床工作中推广使用。     

流式微球联合检测炎症性因子IL-6、TNF-α和MCP-1方法学的建立和评价

目的 建立流式微球分析技术联合检测人血清中细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和单核细胞趋化因子-1（MCP-1）的方法并对其进行系统性评价。方法 分别将三种选择好一定浓度的捕获抗体（IL-6、TNF-α和MCP-1鼠抗人单克隆抗体）包被在三种已激活的不同荧光强度编码的羧基化聚苯乙烯微球上,用正交试验对试验条件进行优化选择,并应用CLSI的有关规则进行方法学评价。结果 实验选择各种捕获单克隆抗体的加入量为10礸,各种生物素标记的羊抗人单克隆抗体的稀释倍数为1:540,第一次反应时间为2h、洗涤二次,PE标记亲和素的稀释倍数为1:1000,第二次反应1h洗涤一次。方法学评价显色： IL-6线性范围是1.13—3333.33 pg/mL,批内变异系数为1.98%—2.31%,批间变异系数为3.52%—4.17%,准确度相对偏倚为0.19%—0.66%,回收率是95.4—101.5%,灵敏度为1.13 pg/mL; TNF-α线性范围是1.07—1111.11 pg/mL,批内变异系数为2.67%—2.90%,批间变异系数为4.27%—4.91%,准确度相对偏倚为0.85%—1.53%,回收率是97.3—104.2%,灵敏度为1.07 pg/mL; MCP-1线性范围是7.07—3333.33 pg/mL,批内变异系数为2.63%—2.92%,批间变异系数为3.70%—4.23%,准确度相对偏倚为0.15%—1.06%,回收率是95.2—104.3%,灵敏度为7.07 pg/mL.高浓度的甘油三酯、胆固醇和胆红素对三种因子有一定的干扰率,低浓度的甘油三酯、胆固醇和胆红素对三种因子干扰较小。分别与ELISA方法比较无显著差异。结论 自建的IL-6、TNF-α和MCP-1流式微球联合检测技术,可拓展流式细胞分析技术,值得临床推广使用。     

流式微球联合检测炎症性因子IL-6、TNF-α和MCP-1方法学的建立

目的建立流式微球联合检测技术检测人血清中IL-6、TNF-α和单核细胞趋化因子-1(MCP-1)的方法并对其进行性能评价。方法以包被在3种羧基化聚苯乙烯微球上的IL-6、TNF-α和MCP-1单克隆抗体作为捕获抗体,相应的生物素化单克隆抗体作为检测抗体,用双抗体夹心法检测血清标本中的IL-6、TNF-α和MCP-1含量。用正交试验对试验条件优化选择,用CLSI的有关规则进行方法学评价。结果检测IL-6、TNF-α、MCP-1的线性范围分别为1.52～3 333.33 pg/mL、1.52～1 111.11 pg/mL、4.57～3 333.33 pg/mL;灵敏度分别为1.13 pg/mL、1.07 pg/mL、2.52 pg/mL;低值、高值批内变异系数(CV)分别为1.98%和2.31%、2.90%和2.67%、2.92%和2.63%;批间CV分别为3.52%和4.17%、4.91%和4.27%、4.23%和3.70%;准确度相对偏倚分别为2.19%～3.66%、1.85%～2.53%、3.06%～5.15%;回收率分别为95.4%～101.5%、97.3%～104.2%、95.2%～104.3%;三酰甘油、胆固醇和胆红素对本法基本无干扰;本法与Flow Cytomix试剂盒检测结果无显著差异。用本法检测血清中IL-6、TNF-α、MCP-1参考值分别为2.68～6.16 pg/mL、4.10～8.80 pg/mL、23.27～82.73pg/mL。结论流式微球联合检测血清IL-6、TNF-α、MCP-1的分析性能良好,可实现IL-6、TNF-α、MCP-1的联合检测。     

脂蛋白脂肪酶A2与冠状动脉狭窄的相关性研究及临床意义

目的 探讨血清脂蛋白脂肪酶A2(Lp-PLA2)水平与冠状动脉粥样硬化性狭窄相关性及其临床诊断价值.方法 180例行冠状动脉造影患者分为冠心病组86例、非冠心病狭窄组64例和冠脉造影及体检正常对照组30例;依据冠脉造影结果计算Gesini积分;采用单因素方差分析探讨不同狭窄组与对照组间临床基线资料和脂蛋白脂肪酶A2差异,采用Spearman相关性分析Gesini积分与血清脂蛋白脂肪酶A2 (Lp-PLA2)水平,并绘制其ROC曲线,评价其临床诊断价值.结果 冠心病组、非冠心痛狭窄组与对照组在性别、年龄、吸烟、高密度脂蛋白胆固醇、载脂蛋白A中差异有统计学意义;Spearman相关性分析Lp-PLA2与Gesini积分相关(r=702,P=0.000),Lp-PLA2诊断冠脉狭窄的ROC曲线显示:诊断临界值、曲线下面积、敏感度、特异度分别为15.66 ng/mL、0.938、85.2％、93.3％.结论 Lp-PLA2与Gesini积分相关,可作为评估冠状动脉狭窄及严重程度的指标.     

用流式细胞术检测冠心病患者血清P选择素的方法与应用评价

目的 评价流式细胞术（FCM）检测冠心病患者血清P选择素（P-selectin）的方法学和临床应用效果。 方法 参考美国CLSI系列文件,用FCM检测75例冠心病患者血清P-selectin,对方法的精密度、准确度、分析灵敏度、分析测量范围等进行评价,并与ELISA法比较。以80例健康人为对照,观察本法的临床应用价值。 结果 P-selectin含量在39.1和10 000.0 ng/L时,批内变异系数（CV）分别为4.2%和9.0%,批间CV分别为4.6%和11.0%,准确度相对偏倚分别为2.7% 和5.3%;检测灵敏度为7.9 ng/L,分析测量范围为7.9 ng/L~103 928.0 ng/L,结果与ELISA法进行比较无显著差异（P＞0.05）。ROC曲线下面积为0.924,P＜0.05。根据ROC曲线,以9 855.2 ng/L为cut off值,诊断冠心病的敏感性为85.3%,特异性为83.8%,阳性似然比为5.3,阴性似然比为0.18,阳性预测值为85.9%,阴性预测值为97.1%,Youden指数为0.691。检测结果有助于冠心病患者分层。 结论 FCM检测血清P-selectin的分析性能良好,其水平对冠心病的诊断和分层有一定的应用价值。