人肺腺癌多药耐药细胞系的建立

目的：体外建立人肺腺癌多药耐药细胞系。方法：以泰素为诱导药，人肺腺癌细胞系SPC—Al为诱导对象，逐步增加泰素浓度冲击，以一定浓度的泰素维持培养共计24周后，光镜观察细胞形态，用MTS方法进行细胞耐药检测。结果：SPC—Al／TAX形态不规则，对阿霉素、长春地辛、足叶乙甙、顺铂、5—氟脲嘧啶、泰素(紫杉酵)六种抗癌药物有不同程度的耐药性。结论：建立了相对稳定多药耐药细胞系SPC—Al／TAX，用于研究其多药耐药性的机制及逆转等下游实验。     

益气温阳护卫法对哮喘大鼠IL-4/STAT6信号通路的影响

目的:探讨益气温阳护卫法对哮喘大鼠白细胞介素4/信号传导子及转录激活子6(IL-4/STAT6)信号通路的调节作用.方法:50只SPF级雄性SD大鼠随机分为正常对照组、哮喘模型组、益气温阳护卫组、地塞米松组和卡介菌多糖核酸组,每组10只.采用TaqMan Real time PcR测定哮喘大鼠Th细胞IL-4和STAT6的mRNA表达变化.结果:哮喘模型组IL-4和STAT6的mRNA表达显著高于正常对照组(P＜0.01),益气温阳护卫组、地塞米松组和卡介菌多糖核酸组PBMC中IL-4和STAT6的mRNA表达显著低于哮喘模型组(P＜0.01),且与正常对照组IL-4和STAT6的mRNA表达相当.结论:益气温阳护卫法能够抑制哮喘大鼠IL-4/STAT6信号通路基因的表达,该作用可能是调节Th1/Th2细胞亚群趋于平衡的重要机制.     

乙型肝炎患者血清Pre-S1抗原检测的临床分析

目的分析HBVPre-S1抗原、HBV标志物和HBVDNA的关系,并探讨其相应的临床意义。方法574例HBV感染的患者血清,用全自动酶免仪(TRITURUS)检测HBV标志物及Pre-S1抗原(Pre-S1),对其中73例采用PCR实时定量荧光检测技术作HBV DNA检测,同时对HBV标志物均阴性的正常健康人70名也进行了Pre-S1的检测。结果574例HBsAg阳性患者中,Pre-S1检出率为54.5%,HBeAg检出率为23.9%,Pre-S1的检出率较HBeAg高(P<0.01)。Pre-S1与HBV DNA的检出率差异无统计学意义(P>0.05),HBeAg与HBV DNA的检出率有差异有统计意义(P<0.01),Pre-S1与HBeAg检出率的差异有统计学意义(P<0.01)。结论Pre-S1较HBeAg更敏感地反映HBV的复制情况,与HBV活动性复制关系密切,可作为乙型肝炎(乙肝)传染性筛选的重要补充。     

前S1抗原、HBV DNA及HBeAg在乙型肝炎病毒检测中的临床意义

目的 了解乙型肝炎患者前S1抗原(Pre-S1)、HBV DNA及HBeAg的相关性,并评价它们在诊断HBV复制中的临床意义.方法 应用ELISA、荧光定量PCR法(FQ-PCR)对198例乙型肝炎患者进行Pre-S1、HBV DNA及HBV血清标志物五项(两对半)检测.结果 198例乙型肝炎患者中Pre-S1阳性107例(54.0%),HBV DNA阳性111例(56.1%),HBeAg阳性90例(45.5%),三者同时阳性72例(36.4%),Pre-S1与HBV DNA阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05).在90例HBeAg阳性样本中,Pre-S1阳性72例(80.0%),HBVDNA阳性74例(82.2%),三者具有较高的符合率.在108例HBeAg阴性样本中,Pre-S1阳性35例(32.4%),HBV DNA阳性37例(34.2%),Pre-S1与HBV DNA检出率比较,两者高度一致(χ2=0.08,P>0.05).结论 Pre-S1与HBV DNA能敏感反映HBV复制的情况,尤其可以协助诊断HBeAg阴性的乙型肝炎患者是否有HBV复制,对于判断患者的病情及指导治疗具有重要的临床意义.     

不同部位皮下裸小鼠移植瘤特点比较

裸小鼠先天性无胸腺 ,主要的缺陷为 :11号染色体上有一个隐性突变基因 ,毛发生长发育异常 ,表现为全身形似无毛 ,呈裸体外表 ,无胸腺 ,仅有胸腺残迹或异常的胸腺上皮 ,这种上皮不能使T细胞正常分化 ,缺乏成熟T细胞的辅助、抑制及杀伤功能 ,因而细胞免疫力低下 ,不能执行正常T细胞功能。为了比较不同皮下部位裸小鼠移植瘤特点 ,笔者选用了 2 6只SPF级BalB/CA nu品系 3～ 4周龄的裸鼠做实验 ,现报告如下。1　材料和方法1.1　材料裸小鼠 2 6只 ,均为雄性 (中国医学科学院动物繁育场提供 ) ,体重 18～ 2 0 g ,人肺腺癌细胞系 (购于上海细胞…     

孕妇产前血液指标常规检测结果及意义

目的:探讨孕妇产前血液指标常规检测结果及意义。方法:血常规用BECKMANCOUTERACTdiff检测;生化肝、肾功能用BECKMANCOULTERCX9检测;乙肝三对、抗HIV、抗HCVET用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测;梅毒抗体用甲苯胺红不加热血清实验检测。结果:孕妇产前血液指标常规检测能够发现各项异常指标;结论:孕期进行血液指标常规检测能够做到早发现、早诊断、及时处理异常情况,以提高围产期的保健质量。     

肺癌A549细胞中RNAi抑制MeCP2表达的实验研究

目的：探讨RNA干扰下调MeCP2基因后对人肺癌A549细胞RASSF1A和C/EBPα基因表达及细胞增殖能力的影响。方法：根据MeCP2的碱基序列设计并合成短发夹RNA（shRNA）,构建质粒表达载体,用阳离子脂质体法体外转染A549细胞,筛选出稳定转染的细胞株,RT-PCR法检测MeCP2抑制效果及RASSF1A和C/EBPα表达,MTT法检测转染后细胞增殖能力。结果：成功构建了靶向MeCP2的真核表达载体pSilencer-MeCP2/Ⅰ和pSilencer-MeCP2/Ⅱ,与空白组和阴性组相比,pSilencer-MeCP2/Ⅰ和pSilencer-MeCP2/Ⅱ组均可有效抑制MeCP2基因mRNA的表达,抑制率分别为47.6%和70.3%。且在上述两组中C/EBPα表达分别上调约115%和135%、细胞增殖能力明显减弱,与空白组和阴性组比较差异具有统计学意义（P〈0.05）,而RASSF1A的表达在各组细胞中未见明显变化（P〉0.05）。结论：肺癌A549细胞中MeCP2基因的表达可被RNA干扰载体有效抑制,进而导致细胞中部分与增殖和凋亡相关基因的表达改变,细胞增殖能力减弱。     

TIL治疗消化道肿瘤伴癌性腹水的价值

长期以来 ,对于晚期消化道肿瘤 ,尤其是伴癌性腹水的病人 ,临床治疗效果很差。近几年 ,应用肿瘤浸润性淋巴细胞 ( Tumor infiltration lymphocyte,简称 TIL)过继性免疫治疗肿瘤受到广泛关注 ,本研究采用癌性腹水中提取淋巴细胞 ,经 IL- 2体外诱导、扩增后 ,再回输到患者体内 ,取得了较好的临床效果。1　材料和方法1 .1　病例选择9例晚期消化道肿瘤伴癌性腹水患者 ,住院期间仅依赖经常抽腹水来缓解腹胀等症状。男性 5例 ,女性 4例。年龄 50～ 68岁 ,平均 59岁。其中胃癌 4例 ,结肠癌 3例 ,肝癌 1例 ,胰腺癌 1例。1 .2　 TIL制备[1]在无菌…     

甲基化结合蛋白与抑癌基因失活

通常认为肿瘤的发生与体细胞基因突变有关,但近年的研究发现它与基因表观遗传学改变也密切相关.DNA甲基化是基因表观遗传学改变最常见的类型.甲基化的DNA通过与多种甲基化结合蛋白结合使基因转录失活,这在许多肿瘤抑癌基因失活中起重要作用.     

应用MTS法检测人肺腺癌细胞系SPC-A1的增殖

检测细胞增殖是医学领域一项重要的研究方法 ,其中有苔盼蓝染色法、四甲基偶氮唑盐 (ＭＴＴ)法。ＭＴＳ法是近年发展起来的用于检测细胞增殖的新方法 ,本文应用ＭＴＳ法检测肺癌细胞增殖 ,旨在评价这种方法检测细胞增殖的可靠性。1　材料和方法1)　试剂 :ＭＴＳ/ＰＭＳ ,购美国Ｐｒｏｍｅｇａ公司 ,避光 -2 0℃冷冻保存。2 )　细胞系 :人肺腺癌细胞系ＳＰＣ Ａ1,购自上海细胞生物学研究所。3)　方法 :ｓｐｃ Ａ1在含 10 %小牛血清 ,青霉素和链霉素各 10 0 μｇ/ｍｌ的ＲＰＭＩ 16 4 0培养液中 ,置于 37℃ 5 %ＣＯ2 饱和湿度培养箱 ,待细胞长…