微小RNA - 184促进滋养层细胞凋亡而引起复发性流产的研究

目的 探究微小RNA - 184（miR - 184）在调控女性滋养层细胞凋亡中的作用及其分子机制，为复发性流产的预防和治疗提供新思路。 方法 采用复发性流产绒毛膜组织和滋养层Swan 71细胞，采用含过表达miR - 184的质粒转染Swan 71细胞后，流式细胞仪测定细胞凋亡率，CCK8测定细胞增殖，实时荧光定量PCR和western blot法测定细胞中miR - 184、Noxa1和MCL1的表达水平。同时也在复发性流产组织中测定上述分子的表达水平。采用t检验比较两组数据的差异，采用重复测量方差分析比较两组增殖曲线。结果 与人工流产组相比，复发性流产组中miR - 184上调6.24倍（t = 3.59，P＜0.05），Noxa1上调2.19倍（t = 2.55，P＜0.05），MCL1下调80.3%（t = 2.63，P＜0.05）。与对照组相比，过表达miR - 184的滋养层细胞凋亡率增加6%（t = 4.62，P＜0.05），细胞增殖下降（F = 10.52, P＜0.05），Noxa1表达上调1.94倍（t = 7.20，P＜0.05），MCL1表达下调55.7%（t = 7.20，P＜0.05）。结论 miR - 184在复发性流产组织中高表达，其通过活化Noxa1/MCL1凋亡通路而诱导滋养层细胞凋亡，最终引发流产，为miR - 184参与调控复发性流产的发生发展提供了实验依据。     

LncRNA NEAT1抑制女性滋养层细胞增殖的研究

目的 探究lncRNA NEAT1调控女性滋养层细胞增殖的作用和机制，为理解由于滋养层细胞增殖障碍而导致的妊娠疾病提供科学依据。方法 以女性绒毛膜滋养层细胞Swan 71为研究对象，采用小干扰RNA和过表达质粒分别转染细胞24h或6h，采用逆转录-实时荧光定量PCR验证干扰和过表达效率，采用逆转录-实时荧光定量PCR和Western blot分别检测lncRNA NEAT1对P21和CDK2的mRNA和蛋白表达水平的影响，通过EdU方法检测lncRNA NEAT1对滋养层细胞增殖的影响，采用两独立样本t检验法进行两组间数据的比较。结果 将lncRNA NEAT1敲低至28.5%（t=7.526，P=0.0172）后，P21的mRNA和蛋白表达水平分别下调至54.1%（t=5.178，P=0.014）和53.8%（t=6.262，P=0.0033）、CDK2的mRNA和蛋白水平分别上调至4.24倍（t=12.86，P=0.006）和2.79倍（t=8.236，P=0.0037），滋养层细胞增殖能力增强；过表达lncRNA NEAT1至169倍（t=10.81，P=0.0085）后，P21的mRNA和蛋白水平分别上调至2.89倍（t=9.435，P=0.025）和1.89倍（t=7.077，P=0.0058），CDK2的mRNA和蛋白水平分别下调至35.6%（t=9.109，P=0.0028）和31.1%（t=12.64，P=0.0062），滋养层细胞增殖能力减弱。结论 LncRNA NEAT1可促进P21并抑制CDK2的表达，进而抑制女性滋养层细胞的增殖能力，揭示了lncRNA NEAT1可能作为由于抑制滋养层细胞增殖功能而导致的妊娠疾病的重要调控分子。