RAPD技术监控肺炎克雷伯菌流行株的初探

据我国首届全国医院内感染管理学术会议公布，由肺炎克雷伯菌引起医院内感染发病率占住院病人的４％～１８％，国外也报道该菌的医院内感染发病率已居第三位，且耐药菌株逐年增多，呈多重耐药现象，故使用一种可靠的特异分型方法对院内感染进行监控，以预防其流行是当务之急。我们课题组曾应用ＲＡＰＤ技术对８９株克雷伯菌ＤＮＡ多态性进行了研究，在此基础上，本文分析了１９９７年１１月１３日至２７日从齐齐哈尔医学院第一附属医院儿科两个病房收集的７株肺炎克雷伯菌ＤＮＡ的相似性，即从ＤＮＡ分子水平上分析这些菌株的亲缘关系，以达…     

耐万古霉素肠球菌临床微生物学及流行病学特征

在过去的 10年间由肠球菌引起的医院感染越来越受到重视 ,据美国最新调查资料表明由肠球菌引起的医院感染已居第 2位 ,在所有医院感染病因中占 12 % [1] 。动态流行病学调查还表明该菌引起的医院感染正在逐年上升。1　 耐药特征及机制　　肠球菌对许多抗生素如 β 内酰胺、氨基糖苷类抗生素、林可霉素及磺胺类药物等显示固有耐性 ,对 β 内酰胺类抗生素耐药性的机制主要是细菌胞壁上青霉素结合蛋白对青霉素亲和性降低所致 ,对氨基糖苷类的耐药性主要是由于该药低浓度时渗透进入菌体的能力较差。尽管体外证明肠球菌对某些磺胺类药敏感 ,但肠…     

教学用真菌标本简易制备法

学生实验观察真菌的形态结构,一般采用在玻片上作真菌小培养后观察。小培养虽然可清楚地观察到真菌的菌体、菌丝和孢子的形态,但需特制“钢圈”等设备,且标本又不能长期保存。为了满足教学实验的需要,我们创用一     

用RAPD技术分析甲型溶血性链球菌DNA

目的 应用ＲＡＰＤ技术分析甲型溶血性链球菌ＤＮＡ多态性并对其分型。方法 随机设计１７ｂｐ和１０ｂｐ两条引物,采用近年来建立起来的ＲＡＰＤ技术对３０株甲型溶血性链球菌ＤＮＡ进行扩增,扩增产物经凝胶电泳后得到指纹图。结论 甲型溶血性链球菌ＤＮＡ用ＲＡＰＤ技术分析,把该菌进一步分型且方法操作简单,结果准确、稳定。     

随机引物扩增技术对变形菌DNA多态性分型研究

目的建立变形菌随机扩增DNA多态性分型技术,应用于临床菌株流行病学调查. 方法优化随机扩增DNA多态性指纹技术(RAPD)的实验条件,利用RAPD技术成功地检测21株变形菌DNA指纹图谱. 结果 21株变形菌分为18型别,其中16株奇异变形菌分为13个型,5株普通变形菌分为5个型. 结论 RAPD分型技术可简便、快速为变形菌提供分型标志,是分子流行病学研究的有效方法.     

产生超广谱β-内酰胺酶的肺炎克雷伯菌的药物敏感性及其基因型研究

目的研究产生超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的肺炎克雷伯菌基因型及其药敏特征。方法对2003年12月～2004年12月哈尔滨地区临床分离的74株产ESBLs肺炎克雷伯菌，测定菌株对常用β-内酰胺类和非β-内酰胺类抗菌药物的敏感性，并采用SHV型和TEM型特异性引物检测ESBLs的基因型。结果产ESBLs细菌对头孢吡肟、氨曲南、阿米卡星和环丙沙星的敏感率依次为71．6％、20．3％、54．1％、31．1％，对头孢哌酮／舒巴坦的敏感率为54．1％，69株（93．2％）对亚胺培南敏感。74株产ESBLs细菌中携带blaSHV和6kTEM基因的阳性例数分别是45例（60．8％）和23例（31．1％）。结论哈尔滨地区产ESBLs肺炎克雷伯菌对常用β-内酰胺类和非β-内酰胺类抗菌药物的敏感性降低，临床上需慎用酶抑制剂复合物及第4代头孢菌素，亚胺培南仍是治疗产ESBLs菌感染的首选药物。产ESBLs肺炎克雷伯菌blaSHV的流行频率高于blaTEM.     

6例急性心肌梗死致心脏骤停复苏成功的护理

心脏骤停是指病人过去有或无心脏病史,意外地发生心脏射血功能的突然停止,导致脑血流的中断,随之出现意识丧失、呼吸停止、瞳孔散大,即可发生临床死亡,因此心脏骤停为心脏急救中最严重的一种情况,如不及时抢救或措施不利,常致死亡.     

大批车祸伤员院前急救的护理体会

医院是突发卫生事件医疗救治的主战场,急诊急救则是应对突发卫生事件的前沿.近年来,随着社会发展,交通发达,车辆增多,车祸发生率不断提高,大型车祸起数也在上升,由此造成的损伤直接威胁人民群众的生命安全.因此对大批伤员及时、准确、有效的院前急救,不仅可以有效地挽救病人生命,还可以大大降低创伤病人的致残率.2004年2005年我院收治大型车祸18起,现结合工作实践,谈谈大批伤员院前急救的护理体会.     

随机引物扩增DNA多态性技术在分析金黄色葡萄球菌和肺炎杆菌多态性中的应用

金黄色葡萄球菌和肺炎杆菌是医院内感染的主要条件致病菌 ,常常引起院内感染及暴发流行。本实验以一条含 10bp的随机引物将 5 2株肺炎杆菌和 2 8株金黄色葡萄球菌的DNA进行随机引物扩增DNA多态性 (RAPD)扩增 ,进行多态性分析 ,得到不同的带谱 ,在肺炎杆菌中存在很强的多态性 ,出现了 41种带型 ,通过肺炎杆菌间相似系数计算 ,绘制出表达菌株亲缘关系的系统树 ,图中可见各菌间的相似系数 ,5 2株菌分成 7个型 ;金黄色葡萄球菌出现了三条特征带。本实验说明RAPD技术能够追溯传染源 ,进行分子流行病学研究     

应用脉冲凝胶电泳研究伤寒与鼠伤寒沙门菌染色体结构差异

[目的]比较伤寒沙门菌与鼠伤寒沙门菌染色体结构差异,追溯其进化根源,以便对其进行流行病学研究。[方法]用I-CeuI脉冲凝胶电泳技术对哈市几所医院分离的12株伤寒沙门菌和3株鼠伤寒沙门菌进行染色体结构分析,并构建I-CeuI物理图。[结果]两型沙门菌染色体经酶切电泳后均产生7个片段;其染色体总长度分别为4765kb和4725kb。[结论]实验中全部沙门菌染色体结构大致相同,但伤寒沙门菌染色体中存在插入与删除序列,推测可能是两者感染宿主与致病性不同的原因。