血液系统疾病中LRP15基因启动子区甲基化状态的研究

目的:探讨LRP15基因启动子区及第一外显子区的甲基化与血液系统疾病的关系和临床意义。方法:采用甲基化特异性PCR方法检测了9例正常人、73例急性白血病患者、8例慢性髓系白血病患者、2例慢性淋巴细胞白血病、12例血液系统良性病患者骨髓LRP15基因启动子区及第一外显子区的甲基化状况;硫化修饰结合限制性内切酶分析及硫化测序验证了一例血液系统良性病患者LRP15基因启动子区及第一外显子区的甲基化。结果:AL患者LRP15基因甲基化阳性率(71.23%)高于正常供者及慢性白血病(10%),差异有统计学意义(P<0.05)。LRP15基因在非恶性血液病患者中甲基化阳性率(55.56%)高于正常供者,硫化修饰结合限制性内切酶分析及硫化测序进一步证实了上述结论。结论:LRP15基因启动子的甲基化与不成熟的白血病细胞有关,与血液系统良性疾病也有一定关系。     

ProMACE/CytaBOM方案治疗难治性或复发性非霍奇金淋巴瘤的疗效观察

目的：探讨ProMACE/CytaBOM方案治疗难治性和(或)复发性非霍奇金淋巴瘤(NHL)的疗效。方法：采用ProMACE／CytaBOM方案治疗18例难治性和(或)复发性NHL患者，其中难治性NHL患者8例，复发性NHL患者10例。结果：5例难治性和(或)复发性NHL患者达到完全缓解(CR率为27．8％)，4例达部分缓解(PR率为22．2％)，总有效率为50．0％；目前12例仍生存，其中生存最长者26个月(2例)，仍处于CR期。毒副作用主要为消化道症状、轻度肝功能异常以及骨髓抑制。结论：ProMACE／CytaBOM方案对部分难治性和(或)复发性NHL患者仍有效，毒副作用较轻，可用于治疗对其他化疗方案无效的难治性和(或)复发性NHL。     

ZO-1基因与白血病相关性的研究及其在K562细胞中高表达意义的探讨

目的 探讨白血病细胞ZO-1基因的表达、甲基化情况及其与白血病发生的相关性.方法 应用基因组限制性酶切扫描(RLGS)技术自白血病小鼠标本中钓取ZO-1基因,用甲基化PCR方法检测自血病细胞系Molt4、HL-60、K562细胞及白血病患者原代白血病细胞及正常人外周血单个核细胞ZO-1基因甲基化水平,用RT-PCR方法检测ZO-1基因表达水平,并对高表达ZO-1基因的K562细胞进行小十扰RNA(siRNA)靶向干扰,然后用Northem blot方法验证ZO-1基因抑制效率,用CCK-8检测细胞增殖情况,膜联蛋白V(Annexin V)和碘化丙锭(PI)舣染色法观察细胞凋亡率及细胞周期.结果 采用RLGS技术从门血病小鼠标本中成功钓取ZO-1基因.原代白血病细胞及Moh4、HL-60细胞ZO-1基因呈高甲基化状态,ZO-1基因表达水平较正常人外周血细胞明显下降或不表达.正常人外周血单个核细胞ZO-1基因不发生甲基化,ZO-1基因高表达.K562细胞高表达ZO-1基因,未见ZO-1基因甲基化;去甲基化药物可以诱导Molt4及HL-60细胞重新表达ZO-1基因.经ZO-1小干扰RNA干预的K562细胞ZO-1基因的表达明显降低,但并不影响细胞的增殖及凋亡.结论 绝大多数急性白血病细胞中ZO-1基因呈高甲基化状态,表达明显降低,ZO-1基因是一个白血病相关基因.其在K562细胞中高表达的意义尚不明确.     

FLAG方案治疗初次诱导失败的急性髓系白血病的疗效观察

为了探讨FLAG方案治疗初次诱导失败的急性髓系白血病的疗效，本研究采用FLAG方案（氟达拉宾50mg，静脉点滴，30分滴完。第1-5天；阿糖胞苷1000mg／m^2，静脉点滴，第1-5天；G—CSF300μg皮下注射第0—5天）治疗19例初次诱导失败的急性髓系白血病。结果表明：19例患者中，13例达完全缓解（CR率68，4％），2例达部分缓解（PR率10．5％），总有效率78．9％。CR的患者中有5例已行异基因造血干细胞移植，目前3例均无病存活，其中存活最长的为26个月，仍处于CR期。该治疗方案毒副作用主要为骨髓抑制、中性粒细胞减少、消化道症状、轻度肝功能异常。结论：FLAG方案对初次诱导失败的急性髓系白血病疗效好，患者对毒副作用可以耐受。因此，对于初次诱导失败的急性髓系白血病患者应该及早应用FLAG方案，为患者行造血干细胞移植创造条件。     

温热低周波并超短波综合治疗急性肌纤维织炎132例

一、资料与方法急性肌纤维织炎患者 12 8例 ,男 56例 ,女 72例 ;年龄 2 3～56岁 ;病程 1～ 2d。共分 3组 :超短波组 46例 ,其中颈肩部肌纤维织炎 2 6例 ,腰部肌纤维织炎 2 0例 ;温热低周波组 40例 ,其中颈肩部肌纤维织炎 2 8例 ,腰部肌纤维织炎 12例 ;综合治疗组 42例 ,颈肩部肌纤维织炎 2 8例 ,腰部纤维织炎 14例。 3组在性别、年龄结构上基本相同。(1)超短波组 :采用上海产CDB I型超短波电疗机 ,波长7.3 74m ,输出最大电流 3 0 0mA ,最大功率 70 0W ,频率40 .68MHz ,2个 16cm× 2 3cm的电极 ,间隙 3～ 5cm。患者取仰卧位 ,2个电极板于…     

化疗联合G-CSF动员的骨髓及外周血CD34+细胞表达粘附分子的变化

探讨化疗合G－CSF动员前，后患骺髓及外周血CD34^ 细胞表达CD44，CD49d，CD62L及趋化因子CXCR4的动态变化，用免疫荧光直接三角标记和流式细胞术测定G－CSF动员前，后骨髓及外周血CD34^ 细胞的CD44，CD49d，CD62L及趋化因子CXCR4的表达，观察输注各表达亚群细胞数与移植后造血重建的关系。结果发现，动员后骨髓中CD34^ CD44^ 和CD34^＋CD49d^ 细胞的百分比较动员前明显降低, 而外周血中二的比例则显升高；动员前，后骨髓中CD34^＋CD62L^＋和CD34^＋CXCR4^ 细胞的变化并不明显，而外周血中前明显增加，后则显减少。输入CD44^＋，CD49d^ ，CD62L^ 及CXCR4^ 的CD34^＋细胞的量与移植后血中中性粒细胞和血小板恢复的时间未表明有显的相关，结论：G－CSF动员可下调骨髓CD34^＋细胞的CD44，CD49d，CD62L及CXCR4的表达，从而进入外周血循环，输注这些细胞的临床意义有待累积更多病例的分析。     

急性白血病Id4基因启动子区甲基化状态研究

本研究探讨正常人和不同疾病状态急性白血病（AL）患者Id4基因启动子区甲基化状态差异。采用甲基化特异性聚合酶链反应（MS—PCR）对正常人和AL患者骨髓进行Id4基因启动子区甲基化状况检测。结果表明：Id4基因在正常骨髓中呈完全性非甲基化状态，初治AML和ALL患者中Id4基因甲基化比例分别为84％和86％。8例复发难治的AL患者中Id4基因全部甲基化，14例Id4基因甲基化的完全缓解ALL患者中有8例在12个月内复发，而9例Id4基因非甲基化的完全缓解ALL患者中12月内复发仅1例；Id4基因呈甲基化状态的完全缓解的AML患者中12个月内复发率为62．5％，而在非甲基化的患者中12个月内复发率仅为10％，两者差异有显著性意义。完全缓解的ALL患者甲基化比例为64．3％，而完全缓解的AML患者甲基化比例为28．6％，两者差异有显著性意义。39例初治AL中。有33例Id4基因呈甲基化状态，8例复发难治的AL患者的Id4基因均呈甲基化状态，58例完全缓解的AL中。有24例Id4基因呈甲基化状态。结论：与正常人不同，AL患者中Id4基因都发生了不同程度的甲基化改变，缓解状态患者的甲基化比例低于非缓解状态患者，Id4基因甲基化模式的改变与AL的发生密切相关。     

ZO-1基因与白血病相关性的研究及其在K562细胞中高表达意义的探讨

目的 探讨白血病细胞ZO-1基因的表达、甲基化情况及其与白血病发生的相关性.方法 应用基因组限制性酶切扫描(RLGS)技术自白血病小鼠标本中钓取ZO-1基因,用甲基化PCR方法检测自血病细胞系Molt4、HL-60、K562细胞及白血病患者原代白血病细胞及正常人外周血单个核细胞ZO-1基因甲基化水平,用RT-PCR方法检测ZO-1基因表达水平,并对高表达ZO-1基因的K562细胞进行小十扰RNA(siRNA)靶向干扰,然后用Northem blot方法验证ZO-1基因抑制效率,用CCK-8检测细胞增殖情况,膜联蛋白V(Annexin V)和碘化丙锭(PI)舣染色法观察细胞凋亡率及细胞周期.结果 采用RLGS技术从门血病小鼠标本中成功钓取ZO-1基因.原代白血病细胞及Moh4、HL-60细胞ZO-1基因呈高甲基化状态,ZO-1基因表达水平较正常人外周血细胞明显下降或不表达.正常人外周血单个核细胞ZO-1基因不发生甲基化,ZO-1基因高表达.K562细胞高表达ZO-1基因,未见ZO-1基因甲基化;去甲基化药物可以诱导Molt4及HL-60细胞重新表达ZO-1基因.经ZO-1小干扰RNA干预的K562细胞ZO-1基因的表达明显降低,但并不影响细胞的增殖及凋亡.结论 绝大多数急性白血病细胞中ZO-1基因呈高甲基化状态,表达明显降低,ZO-1基因是一个白血病相关基因.其在K562细胞中高表达的意义尚不明确.     

自体造血干细胞移植治疗急性髓系白血病77例

背景:急性髓系白血病采用化疗方案效果欠佳,而异基因造血干细胞移植虽然是最有效的治疗方法,但寻找到HLA相合的供者概率较低,且易发生严重并发症。目的:评价自体造血干细胞移植对急性髓系白血病的改善效果。设计、时间及地点:回顾性病例分析,于1989-01/2007-03在解放军总医院血液科完成。对象:选取急性髓系白血病患者77例,中位年龄27.6岁,均同意行自体造血干细胞移植,实验经医院医学伦理委员会批准。单次造血干细胞移植72例,其中自体外周血造血干细胞移植21例、自体骨髓移植51例;移植前CR1期69例,CR2期2例,CR3期1例。双次造血干细胞移植5例,其中均为自体骨髓移植1例,其余4例分别为首次进行骨髓移植和第2次进行自体外周血造血干细胞移植,移植前均为CR1期。方法:骨髓移植患者按单个核细胞(0.8～1.5)×108/kg采集骨髓细胞,外周血干细胞移植患者在联合化疗后行粒系-巨噬集落刺激因子动员,当白细胞>5.0×109L-1时采集造血干细胞。骨髓移植及外周血干细胞移植患者回输单个核细胞中位数分别为2.62×108/kg,4.03×108/kg。25例患者行TLI预处理方案,47例患者行TBI预处理方案,5例患者行不含TBI的高剂量化疗预处理方案。9例患者给予移植后治疗,接受VP/MM维持化疗3例,接受白细胞介素2 干扰素α免疫维持治疗4例,三者联合维持化疗2例。移植后每3个月进行随访,定期检测血常规、骨髓象等变化。主要观察指标:移植后造血重建情况、存活情况以及维持治疗对患者骨髓功能的影响。结果:所有患者均获得髓系造血重建。72例单次自体造血干细胞移植患者无病存活42例,其中移植前CR1期41例,CR3期1例,至今无病存活率58.3%;5例双次自体造血干细胞移植患者至今无病存活4例。定期进行血象和骨髓象复查,均未发现移植后维持治疗对患者骨髓功能有明显影响,患者对维持治疗的耐受性良好。结论:自体造血干细胞移植治疗急性髓系白血病安全有效,可改善难治急性髓系白血病患者预后。     

硼替佐米用于3例初治多发性骨髓瘤的诱导化疗及自体干细胞移植预处理

目的探讨硼替佐米应用于初治多发性骨髓瘤患者的诱导化疗及自体外周血造血干细胞移植预处理方案的可行性和效果。方法对3例初治多发性骨髓瘤患者给予PAD（硼替佐米＋表柔比星＋地塞米松）方案化疗4疗程,后进行PMD（硼替佐米＋马法兰＋地塞米松）方案预处理的自体外周血造血干细胞移植。动员方案为环磷酰胺＋硼替佐米＋地塞米松联合G-CSF 5-10μg/（kg.d）。结果3例患者在4疗程PAD方案化疗后达VGPR,干细胞采集顺利,移植后造血功能顺利重建,移植后中性粒细胞和血小板临床植入的时间分别为14、16、16d和25、29、22d。结论万珂应用于初治多发性骨髓瘤患者的诱导治疗及自体外周血造血干细胞移植的预处理,安全有效,值得临床进一步研究探索。