基因芯片技术在实验室中的应用

基因芯片技术是融微电子学、生物学、物理学、化学、计算机科学为一体的高度交叉的新技术，一旦被广泛应用于临床，它将在一些重症传染病、恶性肿瘤、自身免疫性疾病、神经性疾病等方面，发生巨大的革命性变革，基因技术在疾病的诊断、检测及治疗用药等方面有广阔的应用、研究价值。其原理是采用光导原位合成或显微印刷等方法，将大量DNA探针片段有序地固化于支持物的表面，然后与已标记的生物样品中DNA杂交，再对杂交信号进行检测分析，就可得出该样品的遗传信息。基因芯片技术主要包括4个基本环节：芯片微阵列制备、样品制备、生物分子反应和信号的检测及分析。目前，基因芯片技术在国内外都取得了较大的进展，该技术可用于寻找新基因，DNA测序，基因表达及基因组图的研究、基因诊断、药物筛选、给药个性化、农作物优育和优选、环境检测和防治、食品卫生监督以及司法鉴定等等。基因芯片技术为21世纪生物医药铺平道路，将为整个人类社会带来深刻广泛的变革，促进人类早日进入生物信息时代。     

天津市河西区食源性疾患样品检验结果

食源性疾患的发生与社会经济、文化和人民饮食习惯有关，更和食品的生产、运输、贮存各环节的卫生条件有关。为探讨河西区食源性疾患发病的规律及其特点，现将本区1999～2001年的食源性疾患的检验结果进行分析，为制定预防和控制食源性疾患工作提供参考。 一、材料和方法 1．样品来源1999～2001年本区因食源性疾患所送检的样品的种类包括熟肉制品、凉拌菜、水产……     

肠道门诊中病原性弧菌的分离鉴定及流行病学调查

我们于 2 0 0 0年 5～ 10月随机对天津市河西区卫生防病中心下属医院肠道门诊的 985例急性腹泻病患者进行针对弧菌科细菌的调查。培养基为碱性蛋白胨水 ,4号琼脂平板 ,ＴＣＢＳ琼脂平板 ,ＭａＣ琼脂平板 ,ＳＳ琼脂平板 ,氨苄西林(ＡＳＢＡ2 0 )血琼脂平板。通过对 985例腹泻患者的病原学调查 ,共分离出弧菌科细菌 16种 182株 ,检出率为 18.5 %。182株病原性弧菌构成比分别为弧菌属 :副溶血性弧菌2 2 .0 % (40株 )、霍乱弧菌小川型 0 .5 % (1株 )、霍乱弧菌Ｏ139群 1.1% (2株 )、霍乱弧菌非Ｏ1群 12 .6 % (2 3株 )、海鱼弧菌 7.7% (14株 )、…     

食品中有害残留物检测样品前处理技术研究进展

目前,在我国食品中有害残留物问题已经引起人们的普遍关注,加强食品中有害残留物检测是确保我国食品安全的重要举措之一。本研究总结归纳了分析样品前处理技术在食品安全检测中的应用,主要包括食品中的农药残留、兽药残留、工业用甲醛、多环芳烃残留检测中需要的样品前处理技术,并对样品前处理技术的研究方向进行展望。     

疾病预防控制机构实验室自我完善的途径和措施

疾病预防控制中心检测实验室管理体系有效运行依赖于自我完善机制的建立,它能使实验室自我发现问题,解决问题,实现管理体系的持续改进。实验室检查管理体系运行有效性和符合性的主要途径有内部审核、管理评审、质量控制。文件标准化管理是实验室质量管理体系建立和运行的基础,对保证体系的有效性和符合性起着重要的作用。通过对实验室加强体系管理可为全面提升实验室管理水平提供依据。     

诺如病毒抗原的异硫氰酸荧光素标记-酶联免疫吸附检测法

目的建立基于FITC-抗FITC放大系统的检测人粪便中诺如病毒抗原的ELISA方法,用于筛查或辅助诊断诺如病毒感染。方法以诺如病毒特异性单克隆抗体1包被微孔板,用异硫氰酸荧光素(FITC)标记配对的诺如病毒特异性单克隆抗体2,以辣根酶标记的抗FITC抗体作为示踪物,建立检测人粪便中诺如病毒抗原的ELISA方法,使用商业化酶联免疫法试剂盒和分型试剂进行比对分析。结果该方法的捕获抗体鼠抗诺如病毒单克隆抗体1的最佳包被量为1∶2 000,FITC标记的检测抗体鼠抗诺如病毒单克隆抗体2的最佳稀释度为1∶1 000,辣根酶标记的抗FITC抗体最佳稀释度为1∶1 200;临界值为0.368;板间和板内变异系数均小于5%;灵敏度和特异性均大于95%;对拜发酶联免疫法试剂盒与本方法进行了一致性(Kappa)检验,表明两种检测方法所得结果之间一致性良好(k=0.986)。收集231份住院腹泻患儿粪便标本经该方法检测,46份呈诺如病毒阳性,阳性率为19.91%;经酶联免疫法试剂盒(德国拜发公司)检测,45份呈阳性。与分型试剂盒(欧佩沦公司)比较,阳性符合率为91.3%(42/46),阴性符合率为97.9%(185/189)。结论基于FITC-抗FITC放大系统的ELISA方法适用于人粪便中诺如病毒抗原的监测,特异性和灵敏度较好,有助于诊断由诺如病毒引起的急性腹泻。     

实验室的质量控制

职业体检实验室是疾病预防控制中心实验室的一部分,必须严格执行操作规程和规范,及时、准确地提供科学、公正的检验检测数据,坚持质量第一,做好质量控制工作.现将我们在日常工作中开展实验室质量控制活动归纳以下几点体会,供大家参考.     

应用LAMP同时快速检测沙门菌和志贺菌的效果评价

目的探讨环介导等温扩增（LAMP）方法同时快速检测沙门菌和志贺菌的应用价值。方法通过通用增菌培养,应用LAMP方法和分离培养法分别对76份食堂从业人员粪便标本进行沙门菌和志贺菌检测。结果LAMP方法检出1份标本沙门菌阳性,阳性率为1．32％;分离培养法检出1份都柏林沙门菌,阳性率为1．32％;2种方法的检测结果一致。LAMP方法可在3h内检出沙门菌、志贺菌,而分离培养法需要3-5d,鼠伤寒沙门菌LAMP方法的灵敏度为170CFU／ml,福氏志贺菌LAMP方法的灵敏度为190CFU／ml,与常见的食源性致病菌均无交叉反应。结论与分离培养法相比,LAMP方法特异性高,灵敏度高,不需要特殊仪器,能够在简易的实验条件下,快速、简便地同时检测沙门菌和志贺菌,LAMP方法适用于基层疾病控制实验室开展沙门菌和志贺菌的快速筛查检测。     

红细胞己糖激酶连续监测法实验探讨

报道了简便、快速、准确的微量红细胞己糖激酶连续监测法。己糖激酶对葡萄糖的米氏常数为１．８×１０￣（－４）ｍｏ１／Ｌ。指示酶６－磷酸葡萄糖脱氢酶的最适浓度为２０Ｕ／ｍｌ。最适ｐＨ为８．２５。延迟时间为６０秒，线性反应时间从６０秒至１２分钟。线性范围为０～３６．０Ｕ／ｇ　Ｈｂ。批内ｒｖ５．１５％，批间ＣＶ６．８９％。天津地区健康成人红细胞己糖激酶活性参考范围为０．７５～１．７１Ｕ／ｇＨｂ，脐血为０．９～１．５Ｕ／ｇＨｂ，低底物浓度百分比为（５５．３±４．３）％。