血流感染肺炎克雷伯菌中CRISPR-Cas系统的分布及其与毒力基因和耐药的关系

的 了解血流感染肺炎克雷伯菌中CRISPR-Cas系统的分布特征并分析其与毒力基因和耐药的关系。方法 收集非重复血流感染肺炎克雷伯菌248株，使用Vitek2-Compact全自动微生物分析系统进行菌株鉴定及药物敏感性分析，PCR检测CRISPR-Cas系统3个相关基因(CRISPR1、CRISPR2和cas1)、筛查6种常见高毒力荚膜血清型(K1、K2、K5、 K20、K54和K57)、12种毒力基因及检测13种耐药基因，用χ2检验比较携带有CRISPR-Cas系统菌株与不携带CRISPR-Cas系统菌株毒力及耐药差异。结果 CRISPR-Cas系统的检出率为29.8%(74/248)；K1型是携带CRISPR-Cas系统肺炎克雷伯菌的主要荚膜血清型，占 28.4%(21/74)；除kpn基因外，携带CRISPR-Cas系统菌株的毒力基因检出率均大于不携带CRISPR-Cas系统菌株，其中7种差异有统计学意义；除对氨苄西林耐药率达100%外，携带有CRISPR-Cas系统菌株的其他抗菌药物耐药率均小于不携带有CRISPR-Cas系统菌株，其中13种差异有统计学意义；携带CRISPR-Cas系统菌株的耐药基因阳性率小于不携带CRISPR-Cas系统的菌株，且blaKPC、blaSHV、qnrS基因差异有统计学意义。结论 高毒力荚膜血清型肺炎克雷伯菌中主要为K1型携带CRISPR-Cas系统，携带CRISPR-Cas系统的肺炎克雷伯菌相对于不携带CRISPR-Cas系统菌株的毒力基因阳性率高，耐药率低，耐药基因的阳性率低。CRISPR-Cas系统可能能降低耐药基因在肺炎克雷伯菌中的水平传播，尤其是在K1型肺炎克雷伯菌。     

环介导等温扩增(LAMP)技术的研究进展与展望

环介导等温扩增(LAMP)是2000年报道的一种新的核酸扩增技术,此技术在恒温条件下即可完成核酸的扩增。因具有成本低、耗时少、技术要求低等优点,近年来已被广泛用于病毒、细菌、寄生虫等各种病原体的相关研究。本文就这一技术的研究进展和展望作如下综述。     

隐球菌抗原-胶体金免疫层析法在隐球菌性脑膜炎和隐球菌性肺炎诊断中的应用价值

目的探讨胶体金检测隐球菌荚膜多糖抗原对隐球菌性脑膜炎和隐球菌性肺炎的诊断价值。方法选取2017年1月-12月南昌大学第一附属医院548例疑似隐球菌性肺炎患者与414例疑似隐球菌性脑膜炎患者为研究对象,分析应用胶体金免疫层析法检测患者隐球菌荚膜多糖抗原对隐球菌性脑膜炎和隐球菌性肺炎诊断的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值。结果 962例患者经病理活检或培养阳性或墨汁染色确诊为隐球菌性肺炎36例,隐球菌性脑膜炎38例;胶体金免疫层析法诊断隐球菌性肺炎的敏感性和特异性分别为91.67%和99.61%,阳性预测值和阴性预测值分别为94.29%和99.42%;诊断隐球菌性脑膜炎的敏感性和特异性分别为97.37%和99.73%,阳性预测值和阴性预测值分别为97.37%和99.73%。结论胶体金免疫层析法具有准确率高、快速简便的特点,可作为隐球菌性脑膜炎和隐球菌性肺炎的辅助诊断,具有一定的临床应用价值。     

高毒力肺炎克雷伯菌中CRISPR-Cas系统的分布及其与毒力和耐药的关系

目的了解高毒力肺炎克雷伯菌中CRISPR-Cas系统的分布特征,并探究其与毒力和耐药的关系。方法收集非重复高毒力肺炎克雷伯菌61株,使用VITEK 2-Compact全自动微生物分析系统进行菌株鉴定及药物敏感性分析,PCR检测CRISPR-Cas系统4个相关基因(Cas1、Cas3、CRISPR1和CRISPR2)、筛查荚膜血清分型基因K1/K2、14种毒力基因及14种耐药基因,用χ2检验比较CRISPR-Cas系统阳性菌株与阴性菌株毒力基因及耐药差异。大蜡螟毒力实验分析比较两组细菌的毒力差异,并且采用多位点序列分型(MLST)分析所有高毒力肺炎克雷伯菌分子分型与CRISPR-Cas系统的关系。结果CRISPR-Cas系统阳性检出率为34.4%(21/61),所有CRISPR-Cas系统阳性的菌株均为ST23型K1菌株,除毒力基因kpn、repA外,CRISPR-Cas系统阳性的高毒力肺炎克雷伯菌携带毒力基因阳性率均大于对应的阴性菌,其中5种毒力基因差异具有显著统计学意义。除耐药基因blaNDM-1、qnrB外,CRISPR-Cas系统阳性高毒力肺炎克雷伯菌的8种耐药基因阳性率均小于对应的阴性菌株,差异具有显著统计学意义。CRISPR-Cas系统阳性高毒力肺炎克雷伯菌感染大蜡螟平均半数生存时间少于对应的阴性菌感染,差异具有统计学意义。MLST结果表明高毒力肺炎克雷伯菌CRISPR-Cas系统分布与分型密切相关。结论CRISPR-Cas系统阳性高毒力肺炎克雷伯菌主要为ST23型K1菌株,CRISPR-Cas系统阳性肺炎克雷伯菌相对于阴性菌株的毒力强,毒力基因阳性率高,耐药率低,耐药基因的阳性率低。临床上应警惕CRISPR-Cas系统阴性ST11型“碳青霉烯类耐药高毒力肺炎克雷伯菌”的暴发,此类细菌进化获得毒力质粒pLVPK毒力强、高度耐药、传播性强,可能成为危害公共健康并难以控制的超级细菌。     

带蒂肠片修复肝外胆管缺损8例报告

带蒂肠片修复肝外胆管缺损８例报告内蒙古乌海市人民医院外二科（０１６０００）苑海明，王秀琴，杜芳玲一般资料：本组８例，男２例，女６例，年龄３５～６５岁，平均４７岁。行胆囊切除误伤肝总管２例，胆总管３功能科医师例，其中有３例在手术台上当即发现行带蒂肠片修...     

重症医学科血流感染耐碳青霉烯类高黏液型肺炎克雷伯菌的临床及分子特征

目的分析医院重症医学科(ICU)血流感染患者检出的耐碳青霉烯类高黏液型肺炎克雷伯菌(CR-HMKP)的临床及分子特征。方法2016年1月-2018年12月从ICU血流感染患者中分离40株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CR-KP),通过拉丝试验分为14株CR-HMKP菌和26株CR-非HMKP菌,分析菌株的临床和药敏资料,采用PCR检测菌株的耐药基因、毒力基因及血清荚膜分型,多位点序列分型(MLST)和脉冲场凝胶电泳(PFGE)方法分析细菌的分子流行病学特征。结果CR-HMKP在CR-KP中的检出率为35.0%。CR-KP感染患者均接受两种或两种以上侵袭性操作和联合使用多种抗生素。CR-HMKP菌株感染患者60岁以上的占比、糖尿病患病率、死亡率比CR-非HMKP菌株感染患者高,且差异有统计学意义(P<0.05)。CR-KP菌株均为多重耐药(MDR)菌,CR-HMKP菌株对庆大霉素、妥布霉素、阿米卡星的耐药率比CR-非HMKP菌株低,且差异有统计学意义(P<0.05)。碳青霉烯酶基因以KPC为主(95.0%),rmtB基因在CR-HMKP菌株的检出率小于CR-非HMKP菌株,且差异有统计学意义(P<0.01)。CR-HMKP菌株中仅检出1株K2型菌株,rmpA、iutA、rmpA2三种毒力基因在CR-HMKP菌株的检出率均大于CR-非HMKP菌株,且差异有统计学意义(P<0.01)。PFGE和MLST显示CR-HMKP分为A、B型,A型(n=13,92.9%)均为ST11型,B型(n=1,7.1%)为ST65型。结论ICU血流感染患者分离的CR-HMKP菌株以ST11型为主,均为MDR菌,携带多种耐药基因与毒力基因,且患者死亡率高,应加强防控。CRHMKP与CR-非HMKP对氨基糖苷类抗生素的耐药情况有差别,临床在治疗过程中应区别对待。     

血流感染肺炎克雷伯菌pLVPK毒力质粒的分布及与耐药的关系

目的 了解血流感染肺炎克雷伯菌中pLVPK毒力质粒的分布情况，分析其与荚膜血清分型及耐药之间的关系。方法 收集医院2016年1月-2017年6月所有非重复血流感染的肺炎克雷伯菌96株，使用Vitek-Compact全自动微生物分析系统进行菌株鉴定及药物敏感性分析；PCR方法检测6种常见高毒力荚膜血清型、7种常见毒力基因、13种常见耐药基因及毒力质粒pLVPK相关基因，使用χ2检验进行统计学分析。结果 血流感染肺炎克雷伯菌株中携带pLVPK毒力质粒率39.6%。其中毒力质粒pLVPK阳性菌株K1荚膜血清分型率显著高毒力质粒pLVPK阴性菌株(P<0.05)，而在其他非高毒力荚膜血清分型上，毒力质粒pLVPK阳性菌株显著低于毒力质粒pLVPK阴性菌株(P<0.05)。pLVPK毒力质粒阳性菌株的毒力基因携带率均显著高于pLVPK毒力质粒阴性菌株(P<0.05)。而pLVPK毒力质粒阳性菌株在耐药性则显著低于pLVPK毒力质粒阴性菌株(P<0.05)，其中pLVPK毒力质粒阳性菌株对blaKPC、blaTEM、blaCTX-M、qnrB及acc(6')-Ib-cr基因的携带显著低于pLVPK毒力质粒阴性菌株(P<0.05)。结论 pLVPK毒力质粒主要集中在K1荚膜血清分型血流感染肺炎克雷伯菌株，pLVPK毒力质粒与毒力基因的携带成正相关，而pLVPK毒力质粒也直接影响了血流感染菌株的耐药性及耐药基因的携带。     

侵蚀艾肯菌引起肝脓肿及邻近皮下组织脓肿1例

正侵蚀艾肯菌(Eikenella corrodens)是人类黏膜表面的常居菌之一,当机体免疫力低下、黏膜表面外伤导致防御能力破坏,可入侵周围组织而发生感染,引起心内膜炎、脑膜炎、骨髓炎、化脓性关节炎、肺炎及手术后软组织脓肿等~([1])。我们自1例肝脓肿及邻近皮下组织脓肿患者的穿刺液中分离出侵蚀艾肯菌,现报道如下。     

十二指肠Brunner腺瘤致黄疸1例误诊分析

1 病例介绍 患者男,57岁.因全身黄染、黑便20天,于1993年11月18日入院.B超检查:肝内外胆管扩张,胆囊增大,B超诊断:胆管末端梗阻.CT检查:肝内胆管不扩张,肝外胆管明显扩张,扩张的胆总管于胰头段突然消失,胆囊肿大;CT诊断:壶腹部癌.GPT25u,TTT 3u,HBsAg(-),总胆红素51.30μmol/L.直接胆红素41.04μmo1/L.于1993年11月29日行剖腹探查,发现十二指肠降部靠近乳头2cm处有带蒂肿瘤约3.5×1.5×2.5cm,压迫乳头致胆总管扩张约1.5cm.行胰十二指肠切除。病理回报十二指肠Brunner腺瘤.术后曾出现胰漏.经引流、抗炎、支持,补液治疗好转出院,出院1年内常感上腹部不适、隐痛.来院复查予对症处理.     

尿液分离高黏液表型肺炎克雷伯菌的毒力基因检测及生物膜形成测定

目的检测尿液分离肺炎克雷伯菌的高黏液(HM)表型、荚膜血清型及主要毒力基因,并测定其生物膜形成情况。方法收集尿路感染患者分离的肺炎克雷伯菌89株,黏液丝试验检测HM表型。PCR筛查6种常见高毒力荚膜血清型(K1,K2,K5,K20,K54,K57)和10种常见毒力基因(magA,rmpA,rmpA2,aerobactin,wcaG,mrkD,iroN,fimH,uge和ureA),利用微孔板法检测生物膜的形成情况。结果 89株尿源性肺炎克雷伯菌中,除K5型外,其他5种常见高毒力荚膜血清型均有检出,共检出14株黏液丝试验阳性菌株,占15.73%;HM表型与非HM表型菌株中高毒力荚膜血清型的检出率分别为85.71%(12/14)和6.67%(5/75),差异有统计学意义(χ~2=42.730,P0.001);毒力基因以fimH、uge、ureA和mrkD的流行最为广泛,且在HM表型与非HM表型菌株中分布一致,差异无统计学意义,另外6种毒力基因在HM表型菌株的检出率均大于非HM表型菌株(P0.05);HM表型菌株对常用抗菌药物的耐药率均低于非高黏菌株,差异有统计学意义(P0.05),共发现2株产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)的HM表型菌株,且其中1株对碳青霉烯类耐药;89株肺炎克雷伯菌株有55株形成生物膜,阳性率为61.80%,HM表型菌株和非HM表型菌株形成生物膜的阳性率分别为35.71%(5/14)和66.67%(50/75),两者比较差异有统计学意义(χ~2=4.790,P=0.029)。结论致尿路感染的高黏表型肺炎克雷伯菌存在强毒力和(或)生物膜阳性菌株,必须高度重视,避免广泛流行。