铝离子对K562细胞红系分化能力抑制作用

目的 研究铝离子对K562细胞红系分化能力的影响.方法 应用台盼蓝染色排除法分析铝离子对K562细胞的活力的影响;应用联苯胺染色法检测铝离子作用下K562细胞的红系分化率;利用荧光标记抗体结合流式细胞技术分析铝离子处理K562细胞的细胞表面转铁蛋白受体CD71的表达.结果 50、100和150 μmol/L铝离子作用24 ～72 h对K562细胞生长有浓度依赖性抑制作用,各浓度组作用72 h时的相对活力分别为(89.23±4.37)％、(52.78±1.58)％和(44.69±1.95)％;铝离子作用48 h对氯化高铁血红素诱导的K562细胞血红蛋白合成表现出较为明显的浓度依赖性抑制,相对于对照组细胞,各浓度组的血红蛋白合成抑制率分别为3.37％、8.61％和10.55％;经100 μmol/L铝离子处理48 h后的K562细胞表面CD71的表达水平增加27.7％.结论 一定浓度的铝离子对K562细胞的红系分化能力有抑制作用.     

血管紧张素Ⅱ和醛固酮对培养鼠心脏成纤维细胞Bcl-2蛋白表达的影响

目的 研究血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和醛固酮对培养的大鼠心脏成纤维细胞Bcl-2蛋白表达的影响,探讨其引起心肌间质成纤维细胞数目增多的原因。方法培养SD大鼠乳鼠心脏成纤维细胞,以10^-8mol／L AngⅡ或10^-8mol／L醛固酮作用于心脏成纤维细胞,24h后收集细胞涂片,进行免疫组化染色,观察Bel-2蛋白的表达情况。得到阳性结果加其拮抗剂。结果10^-8mol／LAngⅡ对心脏成纤维细胞刺激24h后,Bcl-2蛋白的表达呈阴性;10^-8mol／L醛固酮作用24h后,Bcl-2蛋白的表达呈阳性,其受体拮抗剂螺旋内酯可拮抗醛固酮的作用。结论醛固酮促进心脏成纤维细胞Bel-2蛋白的表达,提示醛固酮有可能通过抑制其凋亡的途径使心脏成纤维细胞数目增多,这一作用是通过其核受体实现的：AngⅡ无类似作用,其引起心脏成纤维细胞增多的机制需进一步研究。     

模拟微重力对K562细胞增殖和分化的影响

目的在航天飞行条件下航天员会出现"航天飞行性贫血",其分子机制尚不明确,实验观察了美国国家航空航天局(NASA)旋转式细胞培养系统模拟的微重力环境对重组人红细胞生成素(Epo)诱导K562细胞增殖分化的影响。方法利用NASA旋转式细胞培养系统模拟的微重力环境,细胞计数分析细胞增殖情况,联苯胺染色法检测血红蛋白合成情况,应用免疫荧光和流式细胞术检测血型糖蛋白A(GPA)和转铁蛋白受体CD71在细胞表面的表达情况,应用荧光染料标记的鬼笔环肽和紫杉醇分别显示纤维型肌动蛋白和微管。结果旋转培养的K562细胞的细胞增殖速度显著低于地面对照组;旋转培养还显著抑制Epo诱导的血红蛋白合成,联苯胺阳性细胞从Epo处理常规培养组的(15.0±1.2)%降为旋转培养组的(9.0±0.9)%;旋转培养还抑制GPA和CD71在细胞表面的表达。此外,旋转培养还促进微管解聚。结论结果表明,旋转培养模拟微重力环境能抑制Epo诱导的K562细胞的增殖和分化;而模拟微重力环境使细胞骨架解聚可能使定位于细胞表面的蛋白(如GPA、CD71以及Epo受体等)在运输到细胞表面的过程发生障碍,从而降低对Epo的反应能力。     

拟除虫菊酯对大鼠脑组织及肝脏生物转化酶的影响

目的 实验研究溴氰菊酯（ＤＭ）和氯菊酯（ＰＭ）对大鼠脑组织及肝脏某些生物转化酶的影响。方法 应用荧光分光光度法、二硝基苯肼比色法和Ｈａｂｉｇ法检测７－乙氧基试卤灵－Ｏ－脱乙基酶９ＥＲＯＤ０、Ｂ型单胺氧化酶９ＭＡＯＢ）和谷胱甘肽Ｓ－转移酶（ＧＳＴ）活力。结果 整体实验中，ＤＭ染毒动物肝脏ＥＲＯＤ、ＭＡＯＢ活力分别下降了４７．９４％和２２．７６％；脑组织和肝脏ＧＳＴ活力分别增加了２２．２０％和３９．５     

抗虫灵对大鼠脑组织及肝脏生物转化酶的影响

目的：研究抗虫灵对大鼠脑组织及肝脏某些生物转化酶的影响。方法：应用荧光分光光度法检测７乙氧基试卤灵Ｏ脱乙基酶（ＥＲＯＤ）活性;以二硝基苯肼比色法测定Ｂ型单胺氧化酶（ＭＡＯＢ）活性;应用Ｈａｂｉｇ法检测谷胱甘肽Ｓ转移酶（ＧＳＴ）活性。结果：体外实验中,抗虫灵对肝微粒体ＥＲＯＤ活性有明显抑制作用,并能明显抑制脑线粒体ＭＡＯＢ活性,但对脑组织胞浆ＧＳＴ活性没有明显影响。整体实验中,抗虫灵能明显抑制肝微粒体和脑线粒体ＥＲＯＤ活性,而且对多氯联苯诱导肝脏和脑组织ＥＲＯＤ的效应有明显抑制作用;抗虫灵…     

植物单宁对K562细胞诱导红系分化抑制作用

目的 研究可水解单宁诃子酸和特里马素Ⅰ对氯化高铁血红素和丁酸钠诱导K562细胞红系分化的影响.方法 四甲基偶氮噻唑蓝法分析诃子酸和特里马素Ⅰ对K562细胞生长的影响,联苯胺染色法检测血红蛋白合成情况,应用免疫荧光和流式细胞术检测血型糖蛋白A(GPA)在细胞表面的表达.结果 诃子酸和特里马素Ⅰ在0.04～0.09mmol/L浓度下均可显著抑制K562细胞的生长增殖.2种单宁化合物(0.002～0.01 mmol/L)可显著抑制丁酸钠诱导的K562细胞血红蛋白合成,2种单宁化合物(0.01～0.05 mmol/L)还可显著抑制氯化高铁血红素诱导的血红蛋白合成,特里马素Ⅰ(0.01 mmol/L)还抑制丁酸钠诱导的GPA在细胞表面表达.结论 诃子酸和特里马素Ⅰ对红系分化有抑制作用.     

氢醌对K562细胞红系相关转录因子GATA-1和GATA-2表达的影响

目的 GATA转录因子在红细胞生成过程起到至关重要的作用,实验观察了氢醌在抑制K562细胞红系分化过程中转录因子GATA-1和GATA-2的mRNA表达变化。方法培养的K562细胞先经10和20μmol/L氢醌处理1周,然后经氯化高铁血红素诱导后,应用联苯胺染色法检测细胞血红蛋白合成情况,采用反转录PCR检测细胞GATA-1和GATA-2的mRNA表达水平。结果相对于溶剂对照组,K562细胞经10和20μmol/L氢醌处理1周后,氯化高铁血红素诱导的血红蛋白合成分别抑制了20.93%和39.13%;在没有经氯化高铁血红素诱导的情况下,相对于对照组,经10和20μmol/L氢醌处理1周的K562细胞GATA-1的mRNA水平分别下降了27.8%和50.0%,GATA-2的mRNA水平也分别下降了30.4%和56.5%;而经10和20μmol/L氢醌处理的K562细胞在氯化高铁血红素诱导后GATA-1的mRNA水平相对于对照组分别下降了26.3%和57.9%,GATA-2的mRNA水平也分别下降了29.4%和48.1%。结论氢醌处理可浓度依赖性地降低K562细胞红系分化潜能,而转录因子GATA-1和GATA-2的表达变化可能在氢醌抑制红系分化过程中发挥重要作用。     

5-氮杂-2’-脱氧胞苷和曲古抑菌素A对1,2,4-苯三醇调控K562细胞GATA结合蛋白1表达水平的影响

目的 GATA-1是在红系分化过程中发挥关键作用的转录因子,实验观察1,2,4-苯三醇对K562细胞GATA-1基因mRNA表达的影响,以及DNA甲基化抑制剂5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-aza-CdR)和组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A(TSA)的干预作用。方法培养的K562细胞先经5、10和20μmol/L的1,2,4-苯三醇处理72 h,然后经氯化高铁血红素诱导后,应用联苯胺染色法检测细胞血红蛋白合成情况,采用反转录PCR检测细胞GATA-1的mRNA表达水平。培养的K562细胞先经20μmol/L的1,2,4-苯三醇处理24或48 h后,或加入5-aza-CdR共同孵育48 h,或加入TSA共同孵育24 h,然后经氯化高铁血红素诱导后,采用反转录PCR检测细胞GATA-1的mRNA表达水平。结果当K562细胞经5、10和20μmol/L的苯三醇处理后,氯化高铁血红素诱导下的GATA-1mRNA表达水平分别只有对照组的91.1%、52.7%和23.2%,红系分化率分别只有对照组的93.3%、85.9%和65.5%。如果在20μmol/L的苯三醇处理24 h后加入5-Aza-CdR共同孵育48 h,氯化高铁血红素诱导的GATA-1mRNA表达水平相对于单纯苯三醇处理组有明显回升,达到对照组水平的80.0%。如果在20μmol/L的苯三醇处理48 h后加入TSA共同孵育24 h,氯化高铁血红素诱导的GATA-1mRNA表达水平相对于单纯苯三醇处理组有明显回升,达到对照组水平的78.0%。结论 1,2,4-苯三醇可引起K562细胞GATA-1基因转录抑制,而DNA甲基化和组蛋白去乙酰化的表观遗传修饰方式的改变可能参与其中。     

上工治未病--预防药学的发展与未来

我国传统医药学历来重视“不治已病治未病”，强调预防为主、防重于治的医学观点，并具体体现在未病先防。既病防变．病后防复三个方面。随着现代医学模式的转变和人们健康观的不断发展，药学研究的范畴也由过去单纯发展疾病治疗药物转变到发展预防药物和治疗药物并重。近些年来，药物在预防疾病方面显示出良好的应用前景，我国目前预防药学应从建立系统的筛选和安全性评价体系、充分利用我国宝贵的中药材资源和中医理论等两个方面为研究重点。