滑膜细胞中蛋白酪氨酸激酶的克隆和鉴定

0　引言　在类风湿性关节炎 (Rheumatoid Arthritis,RA)中 ,关节内滑膜细胞 (Fibroblast- like synovial cells,FL S)的过度增生是造成关节软骨破坏和关节畸形的根本原因 ,所以研究滑膜细胞发生过度增殖的机理及找到控制其增殖的关键环节对于阻止 RA病人发生关节功能障碍具有重要意义 .目前关于滑膜细胞发生恶性增殖的机理尚不清楚 .蛋白酪氨酸激酶 (Protein tyrosine kinases,PTKs)是一大类介导细胞增殖分化和凋亡的细胞内信号分子 ,它们的活化将直接或间接导致细胞发生增殖或凋亡行为 .William s等研究发现 ,在 RA滑膜组织中蛋白酪…     

用差示PCR法筛选类风湿性关节炎滑膜细胞中的高表达基因

目的 筛选类风湿性关节炎（RA）滑膜细胞中的高表达基因,以探讨RA滑膜细胞发生肿瘤样增殖和侵蚀软骨的分子机理。方法 以骨性关节炎（osteoarthritis,OA)滑膜细胞作对照,采用差示PCR（differentially display PCR)方法,克隆RA滑膜细胞中高表达的cDNAs片段,经反向点杂交排除假阳性克隆后,将阳性克隆进行基因序列分析,结果共回收76仆差异条带,得到42个有插段的克隆,经反向点杂交后得到22个阳性克隆,对其中19个克隆进行基因序列分析表明,最长片段为501bp长,最短片段为145bp长,大部分在300bp,有13个克隆为已知基因,其中包括组织蛋白酶,其它6个克隆为未知序列,这些未知序列中除一个序列外酶,其它6个克隆为未知序列,这些未知序列中除一个序列外都为基因的非编码区,结论 差示PCR方法在筛选差异表达基因方面存在着很大的局限性,组织蛋白酶B可能与RA滑膜细胞的软骨侵蚀性有关。     

抗生素骨水泥治疗骨科感染的利与弊

目的探讨抗生素骨水泥在骨科感染中的治疗作用，促进抗生素骨水泥的合理应用。方法对近10余年来抗生素骨水泥作用的相关研究进行综述，比较抗生素骨水泥作用的利与弊。结果抗生素骨水泥使难于治愈的骨科感染得到有效的治疗，在取得了较好疗效的同时，存在发生严重并发症的风险。结论在今后抗生素骨水泥的应用中关注其存在的风险，并有针对性地制定防范策略，确保抗生素骨水泥在骨科感染治疗中安全、有效。     

不同理化性质的灌洗液对关节软骨损伤修复的作用

关节灌洗贯穿于关节镜手术的整个过程,其作用是充盈关节腔隙,保持视野清晰,为不同设备操作提供必需的环境,如电化学操作时使用低导电性的非离子型灌洗液,而射频消融则需要使用离子型灌洗液. 关节软骨再生修复能力差,一旦受损几乎不能完全修复.因此,尽可能保留及恢复关节软骨的功能和形态是关节镜手术的根本目的之一.手术过程中的各种操作均可对正常软骨造成一定损伤,影响预后,甚至加速软骨退化.手术对关节软骨造成的医源性损伤主要包括以下三个方面:(1)术中灌洗液用量大,灌注持续时间长,灌洗液的理化性质与关节液有明显不同,对关节软骨影响不容小觑[1];(2)关节镜手术操作如骨软骨移植中的取材、软骨缺损区域的刨刀清理等会对周围正常的关节软骨造成一定程度的机械性损伤[2];(3)术中使用的射频使关节软骨全层遭受热损伤,严重时可深达软骨下骨,导致局部骨或软骨坏死[3-5].     

IL-1β和TNF-α诱导RA成纤维样滑膜细胞ICAM-1和VCAM-1表达调控的机制研究

目的探讨酪氨酸激酶在白细胞介素(IL)-1β和肿瘤坏死因子(TNF)-α诱导类风湿关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞(FLS)细胞间黏附分子(ICAM-1)和血管细胞黏附分子(VCAM-1)表达中的作用。方法原代培养RA成纤维样滑膜细胞，用Western blot方法检测IL-1β和TNF-α短时间内引起RA FLS蛋白质酪氨酸磷酸化状态改变，并应用genistein，蛋白质酪氨酸激酶(PTK)抑制剂观察对ICAM-1和VCAM-1表达影响。结果IL-1β和TNF—α可以瞬时引起RA FLS蛋白质酪氨酸磷酸化程度增加：IL-1β和TNF-α在1—100U／ml之间呈浓度依赖性促进ICAM-1和VCAM-1的表达；genistein显著抑制两种炎性因子刺激下的VCAM-1表达，而对。ICAM-1的表达仅起中度抑制作用。结论IL-1β和TNF-α在RAFLS信号转导中，可以瞬时导致蛋白质酪氨酸磷酸化程度增加．在炎性因子诱导ICAM-1和VCAM-1的表达调控中蛋白酪氨酸激酶作用不同。     

释疑爬楼梯锻练

关于爬楼梯锻炼流传有好几种说法,爬楼梯锻炼好不好?适合哪种人?爬楼梯锻炼应该注意些什么?对此,本刊记者采访了中国中医科学院广安门医院老年病科的朱建贵和北京大学人民医院骨科的孙铁铮.     

IL-2诱导类风湿关节炎与骨关节炎T淋巴细胞STAT3 STAT5酪氨酸磷酸化状态的比较

目的观察白细胞介素(IL)-2作用于类风湿关节炎(RA)与骨关节炎(OA)外周血T淋巴细胞前后,T淋巴细胞中STAT3及STAT5的酪氨酸磷酸化活化状态,并进行比较.方法从RA与OA患者的外周血中分离培养单个核细胞,继而纯化得到T淋巴细胞,静息后,用重组人IL-2刺激,在各时相裂解细胞,收获提取蛋白,进行Western blot分析.结果在静息后,RA与OA的外周血T淋巴细胞中STAT3与STAT5均处于极低水平磷酸化的状态;在IL-2作用后,T淋巴细胞中STAT3和STAT5发生时相性的酪氨酸磷酸化,而RA的T淋巴细胞磷酸化程度较OA显著增高.结论IL-2对RA患者T淋巴细胞的STAT3和STAT5过度激活,引起T淋巴细胞中IL-2信号传导的异常放大效应,可能在RA的发病过程中发挥重要作用.     

雌激素、细胞因子与绝经后骨质疏松症

近年来的研究表明，雌激素的缺乏是绝经后骨质疏松症的发病中的重要因素。雌激素调节骨髓细胞、骨细胞产生细胞因子、生长因子调控骨改建过程。这方面的研究日益增多。本文就这一领域中的前沿进展作一综述。１雌激素是作用于骨组织的重要介质目前，已经证实在骨微环境中产...     

骨关节炎的诊治与研究进展

骨关节炎(osteoarthritis,OA)是影响人类健康最常见的关节疾患之一,人群发病率约为2%～6%,是导致50岁以上人群功能残疾、造成经济损失和影响社会发展的主要疾病之一.骨关节炎具有临床、病理和影像学多重定义;在其疾病发生与发展过程中,在全身因素和局部因素综合作用下,关节软骨发生生化、结构和代谢改变,最终出现关节软骨软化、破溃和局部剥脱以及关节边缘骨与软骨赘生物形成等病理改变,并引起相应临床症状;骨关节炎相关的滑膜炎症是软骨基质降解产物引起的继发性改变,滑膜炎性病变在骨关节炎的发生中不是旁观者,而是关节结构破坏的参与者,促进了骨关节炎的病程进展.骨关节炎的治疗目标是控制疼痛、改善关节功能和生活质量,尽可能避免治疗的毒副作用.目前,骨关节炎缺乏治愈的手段.但是,针对患者设计的个体化治疗方案可以减轻疼痛、保持或改善关节活动度,减缓关节功能的受损.应重视对患者的教育和康复治疗,特异性COX-Ⅱ抑制剂减少了胃肠道副反应事件的发生.当内科保守治疗无效,而日常活动进行性受限时,应该考虑关节镜清理、截骨术和关节置换手术等外科治疗.软骨移植、氨基葡萄糖、针对炎性因子或细胞内与炎症相关的信号分子的生物治疗手段为骨关节炎的治疗开辟了新的研究方向.     

钙黏素11在类风湿性关节炎滑膜组织中的表达及其与炎症的关系北大核心CSCD

目的探讨类风湿性关节炎(RA)滑膜钙黏素11(cadherin-11)的表达与滑膜炎症的相关性及炎性因子对RA滑膜成纤维样细胞(RAFLS)钙黏素11表达的调节效应。方法收集28例行全膝关节置换术的RA患者的滑膜,HE染色后对滑膜炎症进行Rooney评分,免疫组织化学染色检测滑膜钙黏素11的表达,分析钙黏素11表达与滑膜炎性评分及系统性炎症指标的相关性。实时定量PCR和Western blot法检测不同浓度转化生长因子β(TGF-β)或白细胞介素17(IL-17)刺激后RAFLS钙黏素11表达的变化。结果不同C-反应蛋白分层的RA患者滑膜炎性评分无统计学差异。RA滑膜衬里层及衬里下层钙黏素11的表达均与D-二聚体、衬里层厚度、新生血管增多、血管周围淋巴细胞浸润、淋巴细胞滤泡样浸润、淋巴细胞弥散浸润呈正相关,衬里层钙黏素11的表达与间质纤维化呈负相关。经TGF-β或IL-17刺激后RAFLS钙黏素11的mRNA及蛋白表达均上调。结论 RA滑膜钙黏素11的表达明显增加,与滑膜衬里层厚度、新生血管增多及淋巴细胞浸润等密切相关。TGF-β和IL-17可以诱导RAFLS钙黏素11的表达增加。