反义碱性成纤维细胞生长因子Nudt6基因在小鼠内耳的表达

[目的]探讨反义碱性成纤维细胞生长因子Nudt6基因在小鼠内耳的表达。[方法]采用初生乳鼠内耳组织提取总RNA,逆转录后获得小鼠内耳细胞cDNA,根据基因编码区序列设计的引物进行PCR扩增,通过PCR产物分析和DNA测序确定Nudt6是否在小鼠内耳细胞表达。[结果]采用小鼠内耳组织总RNA,RT-PCR扩增出Nudt6基因部分编码区,扩增产物测序证实小鼠内耳中有Nudt6基因的表达。[结论]Nudt6基因在内耳有表达,为Nudt6与bFGF蛋白在内耳的互作关系提供了进一步的证据。Nudt6可能与bFGF在耳聋的预防、治疗中起作用。     

PJ综合征疾病基因STK11/LKB1转录调控的生物信息学分析

目的初步了解STK11／LKB1的转录起始位点信息，分析其可能的候选启动子区段，为以后进行STK11／LKB1的转录调控研究作准备。方法通过检索网上数据库资料，获得STK11／LKB11的转录本信息；运用MethPrimer和FirstEF两种程序，对包含STK11／LKB1基因“第一外显子”、“第一内含子”及其5’UTR区上游的gDNA片段序列，分别进行CpG岛分析和第一外显子预测；利用PromoterInspector等预测程序，对STK11／LKB1的启动子进行预测。结果目前已知的STK11／LKB1转录本中，5’UTR区最长的序列为BC007981(GenBank登录号)；STK11／LKB1基因属于典型的CpG岛相关基因，现有的“第一外显子”之5’上游已不再有外显子，已有的5’UTR区基本已基本接近STK11／LKB1的转录起始位点；在BC007981的5’上游约200bp到400bp内很可能存在有启动子。结论STK11／LKB1已有的5’UTR区基本已基本接近STK11／LKB1的转录起始位点，在BC007981的5’上游数百bp内很可能能找到具有启动活性的区段从而有利于进行下一步的转录调控研究。实验明确其真实的转录起始位点应已相对容易，     

β-catenin和COX-2在大肠癌中的表达及临床意义

目的探讨β-catenin和COX-2在大肠癌中的表达及临床意义。方法采用免疫组化技术检测153例大肠组织标本中β-catenin和COX-2的表达水平,并对其临床意义和相互关系进行统计学分析。结果β-catenin在细胞膜上的丢失与腺癌的分化程度、Dukes分期及淋巴结转移具有相关性(P<0.05);COX-2的过表达与腺癌的Dukes分期、淋巴结转移和浸润程度具有相关性(P<0.05);β-catenin的异位表达与COX-2的过表达没有相关性。结论细胞膜上β-catenin的表达减少在分化程度低、Dukes分期晚及有淋巴结转移的患者中更明显。COX-2的表达水平在Dukes分期晚、浸润程度及有淋巴结转移的患者中增高更明显。腺癌中β-catenin的异位表达可能不是COX-2过表达的主要原因。β-catenin和COX-2可能是Dukes分期和判断淋巴结转移风险的一个较好的指标。     

两种核酸染料的应用比较研究

目的 研究GoldView核酸染料对于凝胶中DNA/RNA的染色效果及其取代EtBr用于常规电泳后凝胶中核酸染色的可能性。方法 将电泳后的SSCP凝胶和琼脂糖凝胶放入两种核酸染液中轻摇浸染30～45min，并注意避光，300nm紫外灯下观察并照相记录。结果 GoldView染色后，dsDNA呈绿色荧光，ssDNA呈红色荧光，可检测到少至5ng的dsDNA，灵敏度与EtBr大致相当。结论 GoldView是一种安全、灵敏的EtBr替代品，可用于常规核酸染色。     

阳性脂质体在基因治疗中的前景

基因治疗的目的是将遗传物质导入细胞并使之得到适宜水平的表达，以纠正机体的遗传缺陷．恢复细胞的正常功能或杀死癌细胞及致病微生物。目前广泛应用的病毒及相关载体不能很好的满足临床要求。是基因治疗急需解决的关键技术。阳性脂质体是一种有效的基因传递载体，在基因治疗研究中有着广泛的前景，并已经进入临床试验，用于人类基因治疗。     

阳性脂质体在基因治疗中的前景

基因治疗的目的是将遗传物质导入细胞并使之得到适宜水平的表达 ,以纠正机体的遗传缺陷 ,恢复细胞的正常功能或杀死癌细胞及致病微生物。目前广泛应用的病毒及相关载体不能很好的满足临床要求 ,是基因治疗急需解决的关键技术。阳性脂质体是一种有效的基因传递载体 ,在基因治疗研究中有着广泛的前景 ,并已经进入临床试验 ,用于人类基因治疗     

23 COX-2和 HER-2在结直肠癌中的表达及其意义

为研究COX 2和HER 2在结直肠癌中的表达及其临床意义以及两者的相互关系，笔者采用免疫组化法检测123例结直肠腺癌及其中的25例淋巴结转移灶组织、12例远癌肠黏膜组织、15例结直肠腺瘤性息肉组织COX 2和HER 2的表达情况。结果示，COX 2在远癌组织、腺瘤性息肉、腺癌中的高表达率分别为0%，33.3％，81.3％，三者差异有统计学意义（P<0.001）;腺癌中COX 2的高表达与Dukes分期、淋巴结转移和浸润层次有关;HER 2的高表达在腺癌（67.5％）与腺瘤性息肉（80.0%）之间差异无统计学意义，但均高于远癌肠黏膜（33.3%）（P<0.05）;HER 2的胞膜高表达与浸润层次有关;在淋巴结转移灶中COX 2和HER 2具有相关性(χ2=3.949，P<0.05，c=0.3693）。提示 COX 2在正常组织、腺瘤性息肉及腺癌中的表达逐步上调;COX 2可能是结直肠癌发生的早期事件;COX 2的高表达及HER 2胞膜的高表达均与肿瘤侵袭性增高有关。     

丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶基因真核表达载体的构建及抑瘤功能研究

PJ综合征(Peutz-Jeghers syndrome)是一种常染色体显性遗传疾病。临床表现以唇、颊黏膜、指(趾)黑色囊性斑、多发性胃肠息肉以及肿瘤易患性增加为特征。其疾病基因丝氨酸／苏氨酸激酶(STKⅡ／LKBⅠ)基因于1998年被克隆,基因所编码的STKⅡ／LKBⅠ蛋白在细胞内广泛表     

三氧化二砷诱导人膀胱癌T24细胞凋亡的实验研究

目的探讨三氧化二砷(As2O3)诱导人移行细胞膀胱癌细胞株T24细胞凋亡的作用。方法用MTT法、TUNEL法、透射电镜、琼脂糖凝胶电泳等方法观察As2O3诱导T24细胞凋亡的作用。结果As2O3可有效地抑制T24细胞增殖,随着药物浓度增高其抑制作用增强,且细胞出现典型的凋亡变化。DNA琼脂糖凝胶电泳出现凋亡特征性梯形条带。TUNEL法呈阳性结果。透射电镜下可见细胞核仁消失,染色质浓缩聚集于核膜下。对照组均未见上述变化。对凋亡相关基因Bcl-2免疫组化染色发现其表达下调,同时凋亡主要效应分子Caspase 3被激活。结论As2O3可有效诱导膀胱癌细胞凋亡,通过下调Bcl-2基因表达是其作用机制之一。