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采用连续延伸PCR方法克隆到粗糙脉孢菌(Neurospora crassa)漆酶基因,并将其克隆到表达载体pPIC9k,重组质粒经线性化、电激转化Pichia pastoris KM71,部分阳性克隆的PCR结果表明:漆酶基因已整合到巴斯德毕赤酵母染色体上,重组菌经甲醇诱导后3~5d产漆酶量最高,为2-3U/mL。 相似文献
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目的了解昆山市1950--2002年肠道传染病流行动态特征,为政府部门制订预防控制措施提供科学依据。方法对昆山市1950--2002年疫情年报资料及人口数据进行统计分析。结果1950--2002年肠道传染病年平均发病率为468.43/10万,其中发病率最高的痢疾80513例,发病率为310.05/10万;其次肝炎、伤寒、霍乱、脊髓灰质炎分别报告为28262、12158、388、322例,平均发病率为108.83/10万、46.82/10万、1.49/10万、1.24/10万;脊髓灰质炎己连续27a无病例报告,同时近5年肝炎发病占据第1位,维持较高发病率水平。结论昆山市肠道传染病近5年一直维持在86.48/10万-121.60/10万的较高水平,应重点加强肝炎、痢疾等主要肠道传染病的预防和控制及综合防治工作力度。 相似文献
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利用PCR扩增技术以嗜热脂肪芽孢杆菌IAM11001染色体DNA为模板,扩增得到嗜热脂肪芽孢杆菌过氧化氢酶编码基因perA。再与经EcoRⅠ酶切的温控表达载体pBV220连接,构建重组质粒,并转化宿主大肠杆菌JM109,得到耐热过氧化氢酶基因工程菌,然后对该工程菌在LB培养基和半合成培养基中的发酵条件进行了优化。结果表明:在LB培养基中,诱导时期和酶合成最佳诱导时间均为5h,最大产酶量达到72.9U/mL;在半合成培养基中,于30℃培养4h,再于42℃诱导培养6h,产酶量最高达到131U/mL。 相似文献
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目的 研究昆山市男男同性性行为人群(men who have sex with men,MSM)艾滋病高危行为特征、人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)同伴检测等情况,为制定和完善艾滋病防控政策提供参考和依据。方法 通过昆山市MSM社区的非政府组织招募调查对象开展专题调查及HIV同伴检测,收集MSM行为特征及HIV感染情况信息。采用χ2检验评估性行为特征的影响因素。结果共招募531名MSM。最近6个月,明确有肛交或口交史的且2名以上男性性伴者占47.39%(200/422),与异性发生过性行为者占70.38%(297/422)。与男性肛交时每次使用安全套者占56.33%(227/403),与异性发生性行为时每次使用安全套者占47.81%(142/297)。MSM人群最近一次通过社会公益小组/志愿者检测者占52.73%(280/531),HIV初筛阳性率为2.64%(14/531)。结论 MSM人群艾滋病高危性行为发生率较高,是艾滋病疫情传播的主要人群,社会公益组织/志愿者是MSM人群艾滋病防控的重要力量。 相似文献
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利用PCR技术从大肠杆菌(既cherichia coli)中扩增出1.16kb的编码1,3-丙二醇氧化还原酶同工酶的基因yqhD,将其连接到温控表达载体pHsh,得到重组哉体pHsh-yqhD,重组载体在大肠杆菌JM109中得到高效表达。SDS-PAGE分析显示:融合表达产物的相对分子质量均为43000,同核酸序列测定所推导的值相符。对含有yghD的基因工程菌进行表达研究表明:42℃诱导4h,1,3-丙二醇氧化还原酶同工酶的酶活力达到100IU/mg,而对照菌株的酶活力仅为0.5IU/mg。 相似文献
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根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)可以将它的Ti质粒的一段T-DNA序列转化到广泛的宿主细胞并能整合到宿主染色体中.作者利用根癌农杆菌转化系统成功地实现了产甘油假丝酵母(Candida glycerinogenes)乳清苷酸脱羧酶基因(Ura3)对酿酒酵母(Saccharamyces cerevisiae)W303-1A的Ura3缺陷遗传互补转化,转化率约为3.2个转化子/10^5个酵母细胞.通过转化子PCR和表型验证说明了T-DNA已经整合进入酵母染色体,并能够稳定地进行遗传表达. 相似文献
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小陈今年28岁,正是令人羡慕的年纪,但近几年来却一直处于烦恼之中,原本丰腴动人的她,如今变得消瘦异常,而且动不动就生气发火,到底是什么原因改变了她?这一切都要从8年前说起。 相似文献
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