芳香烃受体在体外高糖环境诱导心肌肥大过程中的表达

目的:观察高糖环境诱导心肌细胞肥大过程中芳香烃受体(AhR)的表达情况,并探讨其可能的作用机制。方法:以体外培养的大鼠心肌细胞H9c2为研究对象,实验分为正常糖浓度组、高糖组、DMSO组和白藜芦醇(AhR拮抗剂)组。免疫荧光染色观察AhR的表达情况,罗丹明标记的鬼笔环肽染色细胞骨架并计算细胞表面积,DCFH-DA法检测细胞内活性氧簇(ROS)的生成水平,实时荧光定量PCR及Western blot法检测AhR、CYP1A1、心钠素(ANP)和脑钠素(BNP)的表达情况。结果:正常糖浓度环境下,AhR的表达主要定位于细胞质,高糖刺激时转入细胞核内。高糖刺激可促使心肌细胞肥大、心肌细胞内ROS生成增加,白藜芦醇阻滞AhR后,心肌肥大得到明显改善,同时ROS生成水平明显减少。与正常糖浓度组及白藜芦醇组相比,高糖组的AhR、CYP1A1、ANP和BNP mRNA及蛋白表达水平明显升高,上述指标高糖组与DMSO组相比差异无统计学显著性,而白藜芦醇组明显低于DMSO组。结论:在高糖诱导的心肌肥大过程,心肌细胞的AhR表达增加可能参与维持正常糖代谢过程;高糖环境可激活AhR转入细胞核内,上调CYP1A1的表达,并促进ROS的生成,这可能是高糖诱导心肌肥大的重要机制之一。     

基于3个甲基化调控的长链非编码RNA建立结肠腺癌的风险模型

  目的  本研究通过挖掘癌症基因组图谱(the cancer genome atlas, TCGA)数据库和基因表达公共数据库(gene expression omnibus, GEO),鉴定结肠腺癌(colon adenocarcinoma, COAD)中甲基化调控的长链非编码RNA(long non-coding RNA, lncRNA)并判断其预后价值。   方法  从TCGA数据库下载COAD患者的表达谱数据、DNA甲基化数据以及相应的临床数据。从GEO数据库下载GSE39582队列表达谱数据。使用R 4.0软件,通过“edgeR”和“limma”包筛选差异表达基因并通过Spearman秩次相关判断基因表达值和甲基化值的相关性。使用Cox回归模型构建风险模型。   结果  通过对TCGA和GEO数据库的联合分析,鉴定出23个甲基化调控的lncRNA。单因素Cox分析鉴定出4个甲基化调控的lncRNA(LINC00675、LINC01082、LINC01207和RP1-170O19.14)与COAD患者的总生存期(overall survival,OS)相关。采用逐步Cox回归分析构建风险模型,风险评分=(-0.148 19×表达量_LINC01082)+(-0.120 50×表达量_LINC01207)+(-0.120 46×表达量_{RP1-170O19.14})。   结论  本研究基于甲基化调控的lncRNA构建COAD患者的风险模型,可以促进对COAD患者OS的个体化预测。     

Kv1.5在心房颤动中的作用研究进展

心房颤动是临床上最常见的心律失常,有较高的发病率及病死率,严重威胁人类健康。国内外研究表明,Kv1.5钾通道在人类心房肌细胞特异性表达,是心房肌细胞超速延迟整流钾电流的分子基础,此电流在心房复极过程中发挥重要作用,是心房颤动药物治疗的重要靶点。现对Kv1.5在心房颤动中的作用研究进展进行阐述。     

运动员骨关节损伤体外细胞成骨分化机制探讨

目的 通过体外实验探讨P物质受体NK1(NK1-R)在骨髓间充质干细胞（大鼠骨髓基质干细胞，ST2）中的表达及其与成骨分化标记物的关系。方法 将骨髓间充质干细胞（ST2）细胞株接种于培养皿传代培养，培养基为高糖DMEM培养基（含10%FBS），放置于5%CO2细胞培养箱中37°C孵育72 h传代，至第三四代时使用。实验组加入含10-6mol/L浓度的P物质的成骨诱导培养液，对照组为不含P物质的成骨诱导培养液，培养7天，分别在第1,3,5,7天收获细胞进行NK1受体的免疫细胞化学染色，分析其阳性表达率。同一批细胞在1,3,5,7天收获细胞培养液，用ELISA检测ALP、OCN（骨钙素），分析其表达量的变化。结果 细胞免疫化学显示第1天时NK1受体即开始表达，第3,5天表达上升，1周时NK1受体明显表达，其存在于细胞膜和细胞质，主要存在于细胞质中，成骨分化标记物中成骨分化早期标记物ALP第1,3,5,7天表达量为1.695 ng/ml,5.013 ng/ml,7.94 ng/ml和9.932 ng/ml，随着时间推移表达量逐渐增加，成骨分化晚期标记物OCN在1,3,5天表达量很少，分别为1...