鸭乙型肝炎病毒聚合酶结合模拟肽真核表达载体的构建

目的：构建与鸭乙型肝炎病毒聚合酶(DHBV P)特异性结合的模拟肽的重组真核表达质粒，为进一步将重组质粒转染原代培养鸭肝细胞研究模拟肽的作用奠定基础。方法：以噬菌体肽库中筛选出来的能特异性结合DHBV P的模拟肽基因为模板，扩增模拟肽基因片段，并应用基因重组技术构建其真核表达载体pEGFP-N1-模拟肽基因(pEGFP-N1-M)。结果：经鉴定，目的基因片段以正确的方向插入载体pEGFP-N1中，序列正确，对码正确。结论：成功构建了重组真核表达质粒pEGFP-N1-M。     

NBS1功能研究进展

NBS1基因突变可导致一种以染色质不稳定为特征的Nijmegen断裂综合征(NBS)。研究发现NBS1蛋白可与Mre11和Rad50蛋白形成一个Mre11-Rad50-NBS1复合物,在DNA的复制和DNA双链断裂的修复等过程中均起重要作用。本文对NBS1的结构及其在DNA的复制、维持染色质稳定以及DNA损伤应激反应中的作用进行综述。     

BOPPPS教学模式推进以学生为中心的病理学课堂教学实践

为了更好地推进以学生为中心的病理学课堂教学改革,激发学生课堂学习的主动性和积极性,及时检测和反馈学生学习目标完成情况,在病理学教学中通过教学设计将BOPPPS教学模式"导入—目标—前测—参与式—后测—总结"各元素运用到病理学教学中:如通过临床案例导入课堂内容,细化明确学习目标,采用问题设计、案例讨论、小组讨论等多种形式积极引导学生参与到课堂思考与讨论,并对学生的课堂学习和课后练习作出及时反馈和总结。教学实践证明BOPPPS教学模式使病理学课堂教学过程更加完善,推进了以学生为中心的课堂教学改革,有效提高了病理学课堂教学效果。     

扶正抑癌方含药血清诱导结肠癌lovo细胞凋亡的实验研究

[目的]观察扶正抑癌方含药血清对结肠癌lovo细胞凋亡的影响,探讨其抗肿瘤的机制。[方法]制备大鼠含药血清后,以5-Fu作为阳性对照,MTT法测定含药血清对lovo细胞增殖的抑制率,TUNEL法和流式细胞法检测细胞凋亡率,免疫组化检测caspase-8、caspase-9的表达水平。[结果]两种方法均提示扶正抑癌方含药血清能诱导lovo细胞凋亡,与阴性对照组相比,差异具有统计学意义。含药血清处理后细胞caspase-8和caspase-9表达不同程度增高。[结论]扶正抑癌方含药血清能诱导结肠癌lovo细胞凋亡,可能是通过caspase途径作用。     

2-乙酰氨基芴诱导γH2AX焦点的形成

目的探讨DNA损伤剂2-乙酰氨基芴(2-AAF)是否可诱导γH2AX焦点的形成及γH2AX作为检测DNA损伤的一个新的特异指标的可能性。方法用2-AAF处理中国仓鼠CHL细胞,应用免疫荧光方法检测γH2AX焦点的形成,并通过中性彗星实验验证DNA损伤的程度。结果0.1,1,5和20mg·L-1的2-AAF都可使细胞核内γH2AX焦点数量及有γH2AX焦点生成的细胞数量增加,但只有20mg·L-12-AAF处理的细胞才出现明显的彗尾增长及有彗尾的细胞数量增加。另外,磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)家族抑制物渥曼青霉素可抑制2-AAF诱导的γH2AX焦点形成。结论2-AAF可通过激活PI3K家族成员使H2AX磷酸化,进而诱导γH2AX焦点的形成。γH2AX检测DNA损伤的敏感性优于彗星实验,因此,γH2AX有可能成为衡量DNA损伤程度的良好指标。     

基于校网络课程平台的病理学教学改革

网络课程中心平台是提高教学效果、促进教学改革有利的辅助手段.借助网络课程中心平台容量大、交互性强的优势,结合病理学学科特点,将病理变化图片与病案有机结合,开展学生课前网上自学与课堂讨论并进的教学改革；同时注重老师与学生的网络互动,从而全面提升了病理学的教学效果.     

扶正抑癌方含药血清对结肠癌lovo细胞侵袭转移能力及TGF-β_1与TβRⅡ蛋白表达的影响

目的:观察扶正抑癌方含药血清对结肠癌lovo细胞侵袭转移能力及TGF-β_1和TβRⅡ蛋白表达的影响,以探讨扶正抑癌方降低结肠癌转移的机制。方法:lovo细胞体外培养,制备大鼠不同浓度含药血清后,MTT测定不同浓度含药血清对细胞增殖的影响,以5-Fu作为阳性对照药;通过细胞迁移实验检测细胞运动能力,肿瘤细胞体外侵袭实验检测细胞侵袭能力,SABC免疫组化法检测TGF-β_1和TβRⅡ的蛋白表达。结果:高浓度含药血清24 h对lovo细胞作用有效,与对照组和空白组相比,扶正抑癌方含药血清能显著降低细胞的运动能力和侵袭能力,免疫组化提示扶正抑癌方含药血清能降低lovo细胞TGF-β_1的蛋白表达和提高TβRⅡ的蛋白表达,差异具有统计学意义(P0.01)。结论:扶正抑癌方含药血清能有效抑制lovo细胞的增值和降低其侵袭力和运动能力,初步认为其作用机制与降低lovo细胞TGF-β_1的表达和升高βRⅡ的蛋白表达有一定的相关性。     

扶正抑癌方含药血清对结肠癌lovo细胞E-cad、N-cad和Snail蛋白表达的影响

[目的]通过观察扶正抑癌方含药血清对结肠癌lovo细胞E-cad、N-cad和Snail蛋白表达的影响,探讨扶正抑癌方对结肠癌细胞EMT的影响,从而进一步明确扶正抑癌方抑制结肠癌转移的机制。[方法]lovo细胞体外培养,制备大鼠不同浓度含药血清后,MTT法测定不同浓度含药血清对细胞增殖的影响;免疫荧光法检测E-cad、N-cad的表达,Western Blot检测Snail蛋白的表达。[结果]高剂量含药血清组24h对lovo细胞抑制率较中剂量、低剂量组更加明显,差异具有统计学意义(P<0.01),免疫荧光结果显示扶正抑癌方含药血清可以下调lovo细胞N-cad的表达和上调E-cad表达,与正常组和空白组相比,差异具有统计学意义(P<0.05);Western Blot检测结果显示扶正抑癌方含药血清能降低lovo细胞转录因子Snail蛋白的表达,与正常组和空白组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。[结论]扶正抑癌方含药血清通过上调E-cad表达和下调N-cad的表达,抑制lovo细胞的EMT转变,从而降低lovo细胞的侵袭力和运动能力。     

复方苦参液通过癌相关成纤维细胞途径抑制肠癌细胞迁移能力的实验研究

目的:探讨复方苦参液是否通过干预肿瘤相关成纤维细胞(cancer associated fibroblasts,CAF)而抑制肿瘤进展。方法:通过条件培养基诱导成纤维细胞CCD-18Co为CAF,Western blot检测αSMA蛋白表达。复方苦参液处理CAF细胞后,通过Transwell检测CAF对肠癌DLD-1细胞迁移的影响;并用Real-time PCR检测复方苦参液处理后CAF细胞的miR-1290的表达。结果:CM培养基诱导的CAF细胞标志蛋白αSMA表达升高;复方苦参液作用CAF细胞后可抑制肠癌DLD-1细胞的迁移能力;复方苦参液抑制CAF细胞miR-1290的表达。结论:复方苦参液通过抑制miR-1290的表达而抑制CAF细胞的促迁移能力。     

扶正抑癌方含药血清对结肠癌Lovo细胞TGF-β/Smad信号转导通路的影响及意义

目的 通过观察扶正抑癌方含药血清对结肠癌Lovo细胞TGF-β/smad信号转导通路中TGF-β1、Smad3和p-Smad3蛋白表达的影响,明确扶正抑癌方抑制结肠癌细胞间质化转变的作用机制.方法 Lovo细胞体外培养,制备大鼠不同浓度含药血清后,MTT法测定不同浓度含药血清对细胞增殖的影响,以5 Fu作为阳性对照;通过Western blot检测TGF-β1、Smad3和p-Smad3蛋白的表达.结果 大剂量含药血清组24 h对Lovo细胞抑制率较中剂量、小剂量组作用更加明显,差异具有统计学意义(P＜0.01).Western blot检测结果表明扶正抑癌方含药血清可以下调Lovo细胞TGF-β1、Smad3和p-Smad3的蛋白表达,与正常组和空白组相比,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 扶正抑癌方含药血清可能通过下调TGF-β/smad信号转导通路中TGF-β1、Smad3和p-Smad3的蛋白表达,抑制Lovo细胞间质化转变.