条斑紫菜藻蓝蛋白的分离纯化及其抗衰老作用研究

目的：分离纯化条斑紫菜藻蓝蛋白并对其进行抗衰老作用的研究。方法：以盐析沉淀法和Sephadex G-200凝胶过滤层析纯化条斑紫菜藻蓝蛋白,并对其热稳定性和酸碱稳定性进行研究。采用D-半乳糖致亚急性小鼠衰老模型,研究藻蓝蛋白的抗衰老作用。结果：在常温下,40%饱和度的硫酸铵盐析条件下,紫菜藻蓝蛋白纯度达到最大值1.73;紫菜藻蓝蛋白在30℃时、中性溶液环境时稳定性良好;藻蓝蛋白处理后均能显著提高衰老模型小鼠的胸腺指数、脾脏指数和血清中的SOD活性(P＜0.05,P＜0.01),显著降低血清中的MDA含量(P＜0.05,P＜0.01)。结论：紫菜藻蓝蛋白具有较强的抗衰老作用。     

葛根抗氧化肽的分离及清除自由基活性研究

目的：分离纯化葛根抗氧化肽并对其进行体外清除自由基活性的研究。方法：以野生葛根为实验材料,经30%的乙醇浸提、透析、冷冻干燥,进一步采用DEAE阴离子交换层析,反相高效液相色谱的方法,对葛根抗氧化肽进行纯化,对不同组分进行还原能力的测定,还原能力最强的命名为PE1。对PE1进行茚三酮反应和分子质量测定。采用邻苯三酚自氧化法、DPPH法、Fenton反应法检测PE1体外对超氧阴离子自由基、DPPH自由基、羟自由基的清除作用。结果：反相高效液相色谱检测PE1纯度,显示为单一峰,PE1与茚三酮反应呈阳性,分子质量约为746D,PE1在体外可以有效清除以上3种自由基。在质量浓度为0.652mg/mL时,羟自由基清除率可达到80.01%;在5mg/mL质量浓度条件下,对超氧阴离子自由基的清除率高达97.35%;在3.5mg/mL质量浓度条件下,对DPPH自由基的清除率达到75.02%,其IC50为2.83mg/mL。结论：PE1具有较强的清除自由基活性。     

藻蓝蛋白生理活性及作用机制研究进展

就近年来藻蓝蛋白的生理活性尤其是抗癌活性、抗氧化、抗炎、免疫调节等方面的研究进展进行了综述.     

超声波微波协同提取海蒿子多糖工艺

目的：建立海蒿子多糖超声波-微波协同提取工艺,提高海蒿子多糖的提取率。方法：利用硫酸-苯酚法考察正交试验在不同粒度、提取时间、料液比、超声波功率、微波功率条件下多糖提取率,选出最佳超声波-微波协同提取工艺。结果：最佳提取工艺为粒度40目、提取时间20min、料液比1:25(g/mL)、超声波功率75%、微波功率200W,其中粒度对多糖提取率的影响最大。结论：超声波-微波协同提取能缩短提取时间并提高海蒿子多糖提取率。     

盐度变化对黑藻生长和光合作用的影响

以黑藻为实验材料,于室内可控条件下在自来水培养液中培养2 d后,分别放入5个不同盐度培养液(0,3,6,9,12)中培养1 d,不断交替重复4次(上述盐度变化处理分别记为S0,S1,S2,S3,S4),以研究黑藻在不同盐度变化处理下的生长和光合作用。结果表明,与对照S0组相比,较小的盐度变化(S1组)对黑藻的生长有促进作用,而较大的盐度变化(S2～S4组)则对黑藻的生长产生不同程度的抑制甚至伤害作用,表现在生物量和生长率下降、叶绿素a含量减少以及光合作用速率降低。呼吸作用速率在不同盐度变化处理下没有显著差异。黑藻对盐度变化具有一定的抵抗力,通过降低其光合活性来维持正常的生理活动。     

条纹斑竹鲨鱼再生肝组织cDNA质粒文库的构建和鉴定

建立了鲨鱼肝脏的部分切除模型,获得了再生2 4h的鲨鱼肝组织,分离了再生肝组织的总RNA ,纯化了mRNA ,利用含BamHI酶切位点的Oligo(dT) 16 为引物合成cDNA第一链,通过末端转移酶在cDNA第一链3’末端加入Oligo(dC)尾,进而以Oligo(dT) 16 和含HindIII酶切位点的Oligo(dG) 10 为引物,通过LD PCR (long distance PCR)方法合成双链cDNA ,将双链cDNA经BamHI和HindIII双酶切,通过T4 DNA连接酶连接到经相同酶切的pUC19载体后构建成cDNA文库。对文库质量的分析结果表明,通过本方法构建的鲨鱼再生肝组织cDNA文库容量至少为4 .92×10 5个/ μgdscDNA ,重组率达96 .7%。对随机提取30个克隆的质粒进行分析,获得了其中2 5个插入片段的序列,未见重复序列,经与GenBank和dbEST数据库比对分析发现新基因在其中占较大的比例(76 % )。鲨鱼再生肝组织cDNA文库的成功构建为进一步通过差异显示技术筛选、克隆肝再生过程中差异表达的相关功能基因奠定了一个良好的基础。