用MicroBCA方法定量检测硅烷化表面固定的纤维连接蛋白

使用microBCA方法（micro-bicinchoninicacid protein assay）,定量研究了人纤维连接蛋白（fi-bronectin,Fn）在硅烷化石英玻璃表面实现共价固定的情况。首先对石英玻璃进行化学清洗,使表面的羟基得以充分暴露。再利用硅烷偶联剂（APTE）将氨基基团引入,并通过EDC/NHS催化体系把人纤维连接蛋白以酰胺键的形式共价固定于该表面。最后用Mi-croBCA方法对该表面固定化的生物分子（Fn）进行量化表征。应用水接触角、X射线光电子能谱（X-rayphotoelectron spectroscopy,XPS）、原子力显微镜（atomic force microscope,AFM）等方法对各步处理效果进行跟踪分析。结果表明Fn在硅烷化石英玻璃表面实现了固定,一定范围内,硅烷化表面的Fn固定量随所使用Fn孵化液浓度的增加而增大。为生物材料表面改性与修饰研究中生物大分子的量化表征提供了一种新方法。     

TiO_2薄膜表面构建催化活性层改善抗血小板黏附性能

一氧化氮(nitric oxide,NO)是心血管系统的信号分子,具有抗凝血抗增生多种生物学功能。在TiO2薄膜表面固定生物分子胱胺、硒代胱胺,构建催化活性层,催化供体释放NO,从而使改性后的材料表面具有抗凝效应。构建分为两个步骤,首先通过膦酸单分子层自组装固定十二烷基膦酸,再借助光化学方法在材料表面固定4-叠氮基苯甲酸分子使表面羧基官能团化;随后,用EDC/NHS/MES体系活化表面羧基,进而固定胱胺、硒代胱胺。傅里叶红外吸收光谱(Fourier transform infrared spectroscopy,FTIR)与X光电子能谱(X-ray photoelectron spectroscopy,XPS)结果显示各分子均在TiO2薄膜表面成功固定。体外催化实验结果证实了催化活性层的催化活性。该改性层可原位催化内源性一氧化氮供体释放出NO,改善材料表面抗血小板粘附性能,其在体外血小板黏附实验中得到证实。改善了TiO2薄膜的生物相容性,为无机材料的生物活化提供了一种新途径。     

利用MicroBCA和QCM对钛薄膜表面固定纤连蛋白的量化研究与对比

采用物理化学稳定性较好的石英玻璃为基底,用非平衡磁控溅射技术于其表面沉积生物相容性良好的钛薄膜,然后在钛薄膜表面共价固定纤连蛋白。采用傅立叶红外光谱(FT-IR)和X射线光电子能谱(XPS)对各步处理后的材料表面特征进行检测和分析。主要研究了用MicroBCA检测法对样品表面固定的纤连蛋白的定量表征的可行性,并将该结果与用石英晶体微天平(QCM)方法检测获得的纤连蛋白量做了对比和深入分析。结果显示,纤连蛋白可以成功固定到钛薄膜表面,MicroBCA检测法和QCM法的检测结果具有一致性,样品表面纤连蛋白的固定量大约在767～789ng/cm2。