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鸭乙型肝炎病毒的致病性及致癌性研究 总被引:1,自引:0,他引:1
以5B8株抗DHBsAg特异性单克隆抗体作为包被抗体和酶标抗体,首次建立了检测血清中DHBsAg的单抗夹心ELISA,对纯化DHBsAg的最小检出量为10ng/ml,对雏鸭肝炎病毒、鸭瘟病毒等9种禽类常见的病毒病抗原及人乙肝病毒表面抗原(HBsAg)均不发生反应,且能被多克隆的兔抗DHBsIgG及5B8株单抗本身所阻断。应用本试验方法调查江苏省部分地区麻鸭DHBV的感染率分别为:高邮24.5%、常 相似文献
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猪链球菌2型四川分离株猪体回归试验 总被引:5,自引:3,他引:5
选用35~38日龄的健康断奶仔猪21头,分3组,用2005四川分离株SSsc0501分别经静脉、肌肉注射和口服3种途径感染,进行猪体回归试验。肌肉注射组(含菌0.6×108个/mL)16 h开始出现症状,至36 h全部死亡,发病率、病死率均为100%;静脉注射组(含菌0.2×108个/mL)25 h开始出现症状,48 h内全部死亡,发病率和病死率均为100%;口服攻毒组(含菌2×108个/mL)90 h后开始有发病症状,第9天有1头死亡,发病率75%,病死率33%。从感染病死猪的肝脏、脾脏、肾脏、心血、大脑、脑脊液、淋巴结、肺脏和关节液中均分离到链球菌,经鉴定为试验攻毒的目的菌,表明猪体能够很好地用于猪链球菌2型动物感染模型,同时说明该菌侵害器官广泛,为进一步探讨该病的综合防制提供了重要技术依据。 相似文献
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为快速特异检测羊痘病毒属病毒(CaPVs),比较了牛结节性皮肤病病毒(LSDV)、山羊痘病毒(GTPV)和绵羊痘病毒(SSPV)的全基因组序列,选择保守区域设计特异性引物和探针,建立了一种CaPVs通用的Cycleave PCR检测方法。特异性结果显示,该方法在40 min内即可检出CaPVs,与口蹄疫病毒、羊口疮病毒、牛病毒性腹泻病毒、牛传染性鼻气管炎病毒、蓝舌病病毒均无交叉反应;灵敏性结果显示,最低检出限为4.98 copies/μL;重复性结果显示,批内和批间重复变异系数均小于2%。对131份临床样本进行检测发现,该方法与世界动物卫生组织(WOAH)推荐的常规PCR方法相比,敏感性为100%,特异性为91.55%,总符合率为95.42%。以上结果表明,本研究建立的Cycleave PCR检测方法特异、敏感、重复性好,且操作简便,适用于CaPVs的高通量、快速检测。 相似文献
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应用氯化铯密度梯度离心技术,结合Dot-ELISA试验,32P标记的鸭乙型肝炎病毒(DHBV)DNA探针进行斑点杂交试验,从DHBV阳性的的启东鸭血清中分离得到高纯度的DHBsAg颗粒,直径范围40-60nm,在CsCl溶液中的浮密度为1.15kg/L大多数呈10nm厚的密心结构,形态不规则,近似球形,部分颗粒表面有凹陷结构,少数颗粒表面出现缺刻。以纯化的DHBsAg免疫新西兰大白兔,制备了高度特 相似文献
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实验性鸡大肠杆菌病病理学动态变化 总被引:8,自引:2,他引:6
用致病性大肠杆菌O18分离株和/或低致病性禽流感病毒(Mildly pathogenic avian influenza virus ,MPAIV)接种10-12日龄SPF鸡。在接种后1-96h进行临床症状与大体病理变化、组织学观察发现:大肠杆菌接种组、MPAIV接种组和健康接种组除扑杀鸡外未见鸡死亡,MPAIV与大肠杆菌混合接种组除扑杀鸡外死亡率为24%。混合接种组的病变比大肠杆菌接种组出现的时间早,恢复也慢,各脏器的病理变化更严重。MPAIV主要引起各实质器官的坏死,结果表明,大肠杆菌经气管内接种后试验鸡主要表现为呼吸道的炎症反应;MPAVI可使鸡大肠杆菌病严重化。 相似文献
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1例梅花鹿纤维肉瘤的病理学诊断 总被引:2,自引:0,他引:2
纤维肉瘤是由成纤维细胞形成的恶性肿瘤 ,也包括一些能产生胶原蛋白的未分类的混合性间叶细胞的恶性肿瘤。纤维肉瘤在家畜较为常见 ,多发生于成年和老年家畜 ,但在野生动物发生的报道很少。 1999年 ,扬州市某动物园的梅花鹿群中发现1个患肿瘤死亡的病例 ,剖检时肿瘤组织已转移至多个内脏器官 ,经病理组织学观察确诊为高度恶性的纤维肉瘤。1 剖检病变该病例为 1只 10岁的雌性梅花鹿 ,尸体消瘦 ,呈严重恶病质状态。剖检可见腹腔蓄积多量渗出液 ,子宫腔和胸腔内也有多量积液 ;肝肿大 ,表面较粗糙、淤血 ,表面和切面上可见多量大小不一的灰白色… 相似文献
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布鲁菌Cycling探针荧光定量PCR检测方法的建立 总被引:1,自引:1,他引:0
根据布鲁菌BCSP31基因序列设计布鲁菌通用检测引物和探针,建立了布鲁菌Cycling探针荧光定量PCR检测方法。以构建的含BCSP31基因的质粒标准品10倍递进稀释为模板检测其敏感性,结果显示,本方法能检测约10个拷贝的阳性质粒,且标准曲线的线性关系良好。用本方法检测5株不同种的布鲁菌以及猪大肠杆菌K99、巴氏杆菌C48-1、猪链球菌ST171、绿脓杆菌等4株对照菌。结果显示,5株不同种的布鲁菌均出现典型的"S"型扩增曲线,4株对照菌40个循环内均无CT值出现。用本方法和B4/B5-PCR方法对来自布鲁菌病流行地区3个不同牛场的40份血样、奶样和血清样进行平行检测。结果显示,本方法和B4/B5-PCR方法的结果符合率为80.0%。B4/B5-PCR检测为阳性的27份样品经本方法检测均为阳性;B4/B5-PCR检测为阴性的13份样本,经本方法检测,其中8份呈阳性,5份为阴性。本方法的敏感性明显高于B4/B5-PCR方法。试验表明,所建立的Cycling探针荧光定量PCR方法具有敏感、特异、稳定等特点,可用于布鲁菌感染的快速检测。 相似文献
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猪链球菌2型38 000蛋白主要功能区基因的克隆与表达 总被引:1,自引:1,他引:0
根据GenBank中已发表的猪链球菌2型38000蛋白基因核苷酸序列,设计合成1对特异性引物,采用PCR方法,以四川分离株猪链球菌2型基因组DNA为模板扩增38000蛋白主要功能区基因。将PCR产物纯化后与pMD18-T连接转化宿主菌DH5α,提取阳性质粒,进行PCR和酶切鉴定。将目的片段定向克隆到表达载体pET32a中,经测序正确后,重组质粒转化入大肠杆菌BL21(DE3),于37℃、0.8mmol/LIPTG条件下进行诱导表达,结果重组菌菌体裂解物经SDS-PAGE电泳可检测到相对分子质量约为35000的重组蛋白,表达产物经纯化后,免疫印迹法(Western blotting)证实该重组蛋白可以与猪链球菌2型阳性血清发生特异性反应。 相似文献