平坝区鹅养殖场细菌感染情况调查

为平坝区鹅养殖户的细菌病防控提供参考,对贵州省平坝区鹅养殖场细菌感染情况进行调查,从发病鹅场采集76份鹅组织样品进行细菌的分离鉴定。结果表明：61份样品中分离出细菌94株,15份样品未分离出细菌,分离率80.3%。分离大肠杆菌41株,分离率最高,为43.6%;鸭疫里氏杆菌30株,分离率次之,为31.9%;沙门氏菌16株,分离率17.0%;金黄色葡萄球菌7株,分离率7.4%;未分离到巴氏杆菌。有33份样品为单一细菌感染,有28份样品同时检出2种以上细菌。提示大肠杆菌和鸭疫里氏杆菌是引起该地区鹅场发病的主要原因。同时混合感染占比36.8%,应加强对细菌病混合感染的监测与防控。     

铜与枯草芽孢杆菌协同对产蛋期种鹅生产性能、空肠组织发育和微生物菌群结构的影响

本试验通过研究铜与枯草芽孢杆菌协同对产蛋期种鹅空肠组织发育和微生物菌群结构的作用,探索在产蛋期种鹅日粮中添加枯草芽孢杆菌条件下铜的添加量。选择46周龄体况相近的产蛋期种鹅120只,随机分为6组,每组4个重复,每个重复5只（1公4母）,采用2×3因子随机试验设计,枯草芽孢杆菌为125、250 mg/kg 2个添加水平,铜为2、4、6 mg/kg 3个添加水平。Ⅰ～Ⅲ组的铜添加水平为2、4、6 mg/kg,BS添加水平为125mg/kg,Ⅳ～Ⅵ组的铜添加水平为2、4、6mg/kg,BS添加水平为250mg/kg。试验期70 d。对种鹅空肠绒毛高度、隐窝深度进行测定,计算绒隐比;对种鹅盲肠微生物进行16S rDNA多样性检测。结果表明：铜与枯草芽孢杆菌协同对产蛋期种鹅的产蛋率、料蛋比及日采食量影响不显著,对空肠绒毛高度影响显著（P<0.05）,对空肠隐窝深度、绒隐比影响极显著（P<0.01）。对样品Alpha多样性进行分析,试验样品的OTU统计覆盖率深度指数值Coverage,Ⅰ～Ⅵ组均大于0.999,表明试验样本中物种被测出的概率极高,样本结果代表了样本中微生物的真实情况。铜与...     

鸭坦布苏病毒自然感染病例的诊断与病理学观察

为探究鸭坦布苏病毒(DTMUV)在贵州省鸭群的流行,对疑似DTMUV感染肉种鸭进行剖检,观察发病鸭内脏器官病变。取病鸭内脏组织进行RT-PCR检测确诊为DTMUV感染,将病料处理后接种BHK-21细胞,进行RT-PCR鉴定和透射电镜观察,确定分离到DTMUV,并将病料组织制作病理切片。结果显示,接种BHK-21出现明显CPE,电镜观察见病毒颗粒。将分离毒株的E基因经PCR扩增后测序,分析E基因氨基酸序列的同源性,发现所分离毒株与中国北京鸭源参考株同源性最高达99.39%,而与我国早期分离参考株(FX2010)同源性较低,将病料制作切片并进行HE染色,可见脑组织非化脓性脑炎,脾脏淋巴细胞减少,肝细胞变性坏死。本研究成功在贵州省分离到一株DTMUV,对其遗传进化进行分析,为探究贵州省养鸭地区DTMUV的感染和致病提供参考。     

犬IFN-β的克隆及其序列分析

为了分析犬干扰素β(IFN-β)基因分子特征,预测其编码蛋白质的生物学功能,根据GenBank登录的犬IFN-β基因序列(FJ194477)设计合成特异性引物,通过PCR从外周血淋巴细胞总DNA中扩增IFN-β基因CDS区并克隆,应用生物信息学方法对犬IFN-β基因进行序列分析,并对其理化性质以及编码蛋白的二级结构、三级结构进行预测,构建分子系统进化树。结果表明:犬IFN-β基因编码区全长561 bp,共编码186个氨基酸,其分子式可表示为C_(1014)H_(1593)N_(263)O_(290)S_9,分子质量为22.40 ku;属于亲水性蛋白,理论等电点为5.98;含有丰富的二级结构,以α-螺旋(76.88%)和无规则卷曲(19.35%)为主,蛋白三级结构呈弯曲螺旋结构;与貉、威德尔海豹、金钱豹、家猫、宽吻海豚、人、鸡和绿头鸭相对应序列核苷酸序列同源性分别为98.4%、87.2%、85.2%、84.7%、79.0%、74.9%、43.9%和43.3%。说明犬与貉IFN-β核苷酸同源性最高,亲缘关系最近。     

鸭胚成纤维细胞上坦布苏病毒受体蛋白的鉴定

[目的]拓展对坦布苏病毒受体的认知,为研究其在鸭体内的感染机制打下基础.[方法]取9日龄SPF鸭胚制备鸭胚成纤维细胞(DEF),待细胞长成单层后提取DEF膜蛋白,利用免疫共沉淀试验筛选出DEF膜蛋白中可与坦布苏病毒结合的蛋白,经病毒辅覆蛋白结合分析(VOPBA)验证后通过LC-MSMS质谱分析进行鉴定;同时人工合成鸭热休克蛋白70基因(HSP70)序列的开放阅读框(1905 bp),构建重组质粒pET32a-HSP70并转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达,以重组蛋白免疫小鼠制备抗鸭HSP70血清,与DEF细胞共孵育后接种坦布苏病毒,并采用实时荧光定量PCR检测抗血清对病毒感染的抑制作用.[结果]DEF膜蛋白中分子量约70 kD的蛋白可与坦布苏病毒结合,经LC-MSMS质谱分析和序列比对可确定该蛋白即为鸭热休克蛋白70(HSP70).含重组质粒pET32a-HSP70的BL21(DE3)感受态细胞经IPTG诱导4 h后,SDS-PAGE检测发现在分子量约85 kD处出现目的蛋白条带,获得的重组鸭HSP70蛋白主要以包涵体形式进行表达,且能与His标签抗体发生特异性反应.以重组鸭HSP70蛋白免疫小鼠获得的抗鸭HSP70血清可封闭DEF细胞上的HSP70,而竞争性抑制坦布苏病毒感染.[结论]HSP70是坦布苏病毒感染DEF细胞的受体,可作为新的靶点用于抗坦布苏病毒药物设计.     

不同施氮量对夏玉米农田生态系统净碳效应的影响

为探究华北地区夏玉米低碳生产的氮肥管理措施,以典型夏玉米田为对象,设置了不施氮(N0)、施氮100 kg/hm²(N1)、施氮150 kg/hm² (N2)、施氮200 kg/hm² (N3)4个处理,通过土壤温室气体排放、农事投入间接碳排放和作物固碳综合评估了不同施氮水平对夏玉米农田生态系统净碳效应的影响。结果表明,农田土壤CO₂、N₂O排放随施氮量升高而升高,CH₄吸收量随施氮量的升高而下降,N1、N2和N3处理土壤温室气体总排放的碳当量分别较N0提高14.91%、24.19%、29.67%;氮肥投入贡献了较高的间接排放,达到135.27~270.55 kg/hm²;施氮促进了作物固碳,N0、N1、N2、N3净初级生产力固碳量分别为1965.56、3125.68、4345.55、4663.64 kg/hm²。综合系统碳流来看,各处理均表现为碳汇,净碳效应分别为258.33、1034.99、2032.82、2192.16 kg/hm²,碳可持续指数分别为0.15、0.50、0.88、0.89。200 kg/hm²施氮量下能够以相对较低的碳耗换取较高的固碳率,表现出较高的净碳效应,可推荐为氮素适宜投入量。     

1～28日龄三穗鸭粗蛋白质需要量研究

本试验旨在研究日粮粗蛋白质水平对1～28日龄三穗鸭生产性能的影响,并估算三穗鸭的粗蛋白质需要量。试验采用单因子完全随机试验设计,挑选420只健康雄性三穗鸭,随机分为6个处理组,每个处理7个重复,每个重复10只,不同处理组试验鸭分别饲喂粗蛋白质水平为17%、18%、19%、20%、21%、22%的试验日粮。试验期为28 d。结果表明：日粮粗蛋白质水平对28日龄体重、平均日增重具有显著影响,且随着日粮粗蛋白质水平的提高呈线性升高（P <0.05）,Ⅰ组体重、平均日增重最低,Ⅴ组的体重、平均日增重最高,Ⅴ组体重及平均日增重分别比Ⅰ组提高25.51%、28.49%。日粮粗蛋白质水平对1～28周龄三穗鸭料重比具有显著影响,且随着日粮粗蛋白质水平的升高呈线性降低（P <0.05）,Ⅵ组的料重比最低,Ⅰ组的料重比最高,Ⅵ组比Ⅰ组降低了11.59%。日粮粗蛋白质水平对1～28日龄三穗鸭平均日采食量无显著影响（P> 0.05）。以日增重为评价指标,利用直线-折线模型估算1～28日龄三穗鸭的粗蛋白质需要量为18.75%。     

A:L1型鸭源多杀性巴氏杆菌灭活疫苗制备及免疫效力研究

【目的】制备鸭多杀性巴氏杆菌灭活疫苗,有效控制贵州省鸭多杀性巴氏杆菌发生和流行。【方法】以实验室分离保存的A:L1型多杀性巴氏杆菌地方流行株为菌种,通过涂板法测定该菌株生长曲线,并采用改良寇氏法计算该菌株对鸭的半数致死量(median lethal dose, LD₅₀),将该菌培养至终浓度为1×10¹⁰ CFU/mL后分别制备白油佐剂灭活疫苗和卡波姆佐剂灭活疫苗,经疫苗质量检验后进行免疫雏鸭试验;通过攻毒保护试验评价比较两种疫苗的保护率,并对攻毒试验鸭肝脏、肺脏、脾脏进行病理组织学观察。【结果】A:L1型多杀性巴氏杆菌疫苗株培养至18 h到达峰值,活菌数可达1.0×10¹⁰ CFU/mL;LD₅₀为5 CFU;制备的两种疫苗安全性良好;攻毒保护试验结果显示,一免后卡波姆佐剂灭活疫苗免疫保护率可达62.5%,高于白油佐剂灭活疫苗(50.0%)及商品灭活疫苗(50.0%)。二免后卡波姆佐剂灭活疫苗优势更为明显,免疫保护率可达87.5%,高于白油佐剂灭活疫苗(75.0%)及商品灭活疫苗(62.5%)。病...     

夏玉米-冬小麦轮作期土壤呼吸的温度敏感性分析

研究土壤呼吸和温度敏感性(Q₁₀)的季节变化对丰富农田土壤的碳循环理论具有重要理论和现实意义。采用动态密闭气室法于2018年6月-2019年6月连续监测北京夏玉米-冬小麦轮作期间农田土壤呼吸速率,研究不同作物生育期Q₁₀值和土壤呼吸变化特征,综合分析土壤温度和土壤含水率对土壤呼吸的影响。结果表明:日内尺度上不同作物生育期土壤呼吸变化均呈单峰型,对土壤温度昼夜变化的响应关系呈顺时针近椭圆曲线;Q₁₀具有明显的季节变化特征,夏玉米苗期、拔节-抽雄、开花-成熟3个时期Q₁₀分别为2.27、6.13、1.28,在整个夏玉米季,土壤体积含水率在19.52%～45.43%变化,水分解释了50%的土壤呼吸变化(P<0.05),临界值土壤体积含水率为27.84%(田间持水量的83.83%),土壤温度只能解释夏玉米季土壤呼吸速率变化的3%(P>0.05),Q₁₀为1.29。冬小麦出苗-分蘖期、越冬期、返青-拔节期、孕穗-抽穗期、开花-成熟期Q₁₀分别为4.17、...     

抗原浓缩技术研究进展

动物疫病是危害养殖业发展的重要因素,而疫苗免疫又是目前防控动物疫病最有效的手段之一。为了提高兽用多联疫苗的免疫效力,去除杂质,减少临床上的免疫不良反应,需要对抗原进行浓缩。疫苗的抗原浓缩技术主要是通过物理或化学方法去除杂质以提高单位体积抗原含量,同时要防止抗原的免疫原性受到破坏,对整个浓缩条件要求较高,因此如何选择合适且高效的抗原浓缩方法尤为重要。文章对近年来抗原浓缩技术的研究及现状进行总结,旨在为选择抗原浓缩技术提供参考。