α-亚麻酸对TM3细胞活性及相关基因表达的影响

α-亚麻酸(ALA)是哺乳动物必需脂肪酸的重要成员,在机体生长和发育过程中起着重要作用。在雄性动物生殖系统,ALA通过代谢生成二十二碳六烯酸(DHA)和二十碳五烯酸(EPA),进而对生殖系统发挥调控功能。采用WST-1、JC-1以及RT-PCR等方法研究ALA对体外培养的小鼠睾丸间质细胞TM3细胞的活力及相关基因表达的影响。结果表明:培养体系中添加10,50,100,200,400μmol/L的ALA,处理24 h可以显著提高TM3细胞活力(P0.05),并且呈剂量依赖性。与对照组相比,50μmol/L的ALA处理24 h可以促进TM3细胞增殖,提高线粒体膜电位,抑制凋亡相关基因Caspase-3表达(P0.05),促进类固醇代谢相关基因StAR表达(P0.05)。这说明在体外培养体系中添加ALA可以增加TM3细胞活性,促进细胞增殖和StAR基因表达,抑制Caspase-3基因表达。     

硫化氢对细胞增殖和凋亡作用的研究进展

正大多数情况下,人们提起硫化氢(H_2S)都知道它是一种无色、比空气重、有剧毒,具有臭鸡蛋气味、吸入过多会伤害生命的气体~([1-2])。H_2S的中毒机制通常被认为是其可使呼吸链中的细胞色素C氧化酶与Fe~(3+)结合,抑制分子氧的利用和电子传递,阻断氧化磷酸化~([2-5]),同时还会抑制其他酶的活性,使组织缺氧而中毒(如:碳酸酐酶~([6])、单胺氧化酶~([7])、Na~+/K~+-ATP酶和胆碱酯酶[2]),这也使得人们谈     

能量对初情期前母猪卵巢LHR和FSHR mRNA表达的影响

对9头50日龄、体质量为30 kg的初情期前杜×长×大三元杂交母猪进行长期日粮能量差异饲养试验.饲养结束后屠宰,取卵巢液氮保存.半定量RT-PCR检测每头母猪卵巢LH和FSH受体mRNA的含量.结果,高能组卵巢LH和FSH受体mRNA的含量显著高于中能组和低能组(P<0.05);而低能组显著低于中能组和高能组(P<0.05).表明,能量水平高的日粮可以显著地促进初情期前卵巢上LH和FSH受体在mRNA水平的表达,而能量水平不足的日粮则不利于这种表达.本文首次报道了日粮能量水平对母猪卵巢LH和FSH受体mRNA表达的影响.     

不同保存方法对牛卵母细胞总RNA和cDNA品质的影响

实时荧光定量RT-PCR是检测低丰度mRNA的敏感方法,也是精确定量RNA拷贝数的有效方法,它的出现使得在少量细胞中定量基因的表达量,在小量基因组中分析基因突变和等位基因缺失成为可能.为了使这种检测技术更加稳定可靠,就必须在检测步骤的每一环节做到精确无误,而总mRNA的提取质量就显得十分重要.研究选择了牛MⅡ期的卵母细...     

神经生长因子对小鼠卵巢颗粒细胞增殖的影响

本研究旨在探索神经生长因子(nerve growth factor,NGF)对小鼠卵巢颗粒细胞增殖的影响。试验建立了小鼠卵巢颗粒细胞的原代培养体系,并通过免疫荧光技术对颗粒细胞进行鉴定和检测NGF及其受体在卵巢颗粒细胞上的表达,采用MTS法检测不同浓度的NGF对昆明小鼠卵巢颗粒细胞增殖的影响。卵巢颗粒细胞在10、50、100、500 ng/mL NGF作用24 h,用酶标仪测定细胞D_{490 nm}值,试验组与对照组相比均有促进增殖的影响（P<0.05）,50 ng/mL NGF试验组与对照组相比差异极显著（P<0.01）。结果表明,NGF在昆明小鼠的卵巢颗粒细胞中有表达,在一定浓度范围NGF可以促进卵巢颗粒细胞的增殖。     

猪ESR、FSHβ和leptin基因多态性及其与卵泡囊肿的相关性

雌激素受体基因(ESR)、促卵泡素β亚基基因(FSHβ)和瘦素基因(leptin)是影响卵泡生长发育的主效基因,在母猪繁殖过程中起关键的作用。试验采用PCR和PCR-RFLP技术检测ESR、FSHβ和leptin基因的单核苷酸多态性,分析各基因多态性与卵泡囊肿的关系。结果表明:3个基因共检测到3个多态位点,分别是位于ESR基因内含子AG突变,FSHβ基因内含子TC突变,leptin基因外显子CT突变。ESR的AA和AB基因型在健康群体和卵泡囊肿群体分布差异显著(P0.05),该基因型可以作为检测卵泡囊肿的标志基因型;FSHβ基因和leptin基因的AA、AB和BB基因型分布在检测群体中均未见显著差异(P0.05)。     

脑源性神经营养因子在母牛性腺及性腺外生殖组织中的表达

采用RT-PCR方法及免疫组织化学技术检测脑源性神经长生因子BDNF基因在母牛卵泡期和黄体期的卵巢、输卵管和子宫组织中的表达和定位情况。结果表明:BDNF mRNA表达于上述2个时期3种组织中,主要表达于卵巢的颗粒细胞和膜细胞、输卵管的黏膜上皮细胞、子宫内膜上皮细胞及子宫腺细胞,且各组织间免疫活性的表达强度明显不同。     

丙酸睾酮对小鼠睾丸NT-3和NT-4表达的影响

以30日龄雄性小鼠为研究对象,用丙酸睾酮分别处理小鼠6,12,24 h后收集睾丸,提取睾丸总RNA和总蛋白,通过实时荧光定量和Western-Blot方法探究了雄激素对睾丸中神经营养因子NT-3及NT-4表达的影响。荧光定量结果表明:丙酸睾酮处理小鼠,12 h组和24 h组NT-3及NT-4的表达显著升高,其他各组间无显著差异。Western-Blot结果与荧光定量结果一致。说明丙酸睾酮能够调节小鼠睾丸中NT-3和NT-4的表达。     

不同保存方法对牛卵母细胞总RNA和cDNA品质的影响

实时荧光定量RT-PCR是检测低丰度mRNA的敏感方法,也是精确定量RNA拷贝数的有效方法,它的出现使得在少量细胞中定量基因的表达量,在小量基因组中分析基因突变和等位基因缺失成为可能。为了使这种检测技术更加稳定可靠,就必须在检测步骤的每一环节做到精确无误,而总mRNA的提取质量就显得十分重要。研究选择了牛MⅡ期的卵母细胞作为研究对象,对不同保存方法进行了检测和比较,结果显示,-196℃液氮和-80℃冰箱保存24 h的卵母细胞,总RNA品质并未明显下降;在-20℃或-80℃环境中长时间保存cDNA模板都会造成模板品质的下降。     

性腺外FSH受体和LH受体表达研究进展

雌性动物的性腺是卵巢,性腺外的生殖组织器官主要包括:输卵管、子宫颈、子宫肌层等,其中子宫是内分泌器官,除有局部内分泌功能外,还可能对下丘脑-垂体-卵巢轴有调节作用.促卵泡素(FSH)和促黄体素(LH)的生理功能是通过其FSHR、LHR来介导的,其受体在性腺和性腺外均有表达.本文主要对雌性性腺外生殖组织器官上两种受体的表达加以综述.