副猪嗜血杆菌AfuA-ELISA抗体检测方法的建立与应用

为建立一种特异性强、灵敏度高的副猪嗜血杆菌（Haemophilus parasuis,HPS）ELISA抗体检测方法,为副猪嗜血杆菌病的诊断及免疫抗体检测提供技术支撑,首先重组表达了HPS 2个具有免疫原性的蛋白（HbpA、AfuA）,随后对HbpA、AfuA进行初筛,选择AfuA作为最佳包被蛋白。通过优化AfuA-ELISA反应条件,确定了最佳抗原包被质量浓度为5μg/mL,最佳封闭液为5%脱脂乳溶液,最佳样品稀释液为2%BSA溶液,最佳样品孵育时间为30 min,最佳样品稀释度为1:25,最佳酶标二抗稀释度为1:20 000,最佳酶标二抗孵育时间为30 min,最佳底物孵育时间为10 min。特异性试验显示,建立的AfuA-ELISA方法对猪其他常见病原阳性血清的检测结果均为阴性,表明其具有良较好的特异性。对300份临床样品进行检测,AfuA-ELISA方法分别检出阳性、阴性血清177、123份,与商业化试剂盒的阳性、阴性符合率分别为90.0%、87.5%,总体符合率为89.0%。结果表明,本研究建立的AfuA-ELISA方法具有特异性强、灵敏度高,与商业化试剂盒符合率高的优点,可...     

绵羊肺炎支原体和精氨酸支原体双重PCR检测方法的建立及应用

为建立绵羊肺炎支原体和精氨酸支原体的双重PCR检测方法,本试验分别设计了绵羊肺炎支原体和精氨酸支原体的特异性引物,优化反应条件后对其特异性和敏感性进行评价,并对40份鼻拭子进行了检测。结果显示,该方法能同时扩增出绵羊肺炎支原体545 bp和精氨酸支原体806 bp的特异性片段,而对其他病原的DNA扩增均为阴性。该双重PCR方法对绵羊肺炎支原体和精氨酸支原体的最低检测限分别为100和10 pg/μL。40份鼻拭子检测结果显示,双重PCR检测方法与分离培养法符合率高达92.5%,均能鉴定出绵羊肺炎支原体和精氨酸支原体。结果表明,本研究建立的双重PCR方法可用于绵羊肺炎支原体和精氨酸支原体的临床快速诊断。     

日粮添加黄芪多糖对断奶仔猪生长性能、腹泻率及免疫功能的影响

文章旨在研究日粮添加黄芪多糖对断奶仔猪生长性能、腹泻率及免疫功能的影响。试验选取同批次、初始体重[（9.72±0.13）kg]无显著差异（P> 0.05）的30d断奶仔猪100头,随机分为4组,每组5个重复,每个重复5头。其中,4组断奶仔猪分别采用玉米-豆粕型基础日粮+0%、0.05%、0.1%、0.15%水平的黄芪多糖饲养,并记为对照组、试验1、2、3组,试验为期14d,期间断奶仔猪自由饮水和自由采食。结果表明,（1）与对照组（0%黄芪多糖）相比,试验1组（0.05%黄芪多糖）、试验2组（0.1%黄芪多糖）、试验3组（0.15%黄芪多糖）断奶仔猪8～14d平均日增重（ADG）和平均日采食量（ADFI）显著提高（P <0.05）;与对照组（0%黄芪多糖）相比,试验1组（0.05%黄芪多糖）、试验2组（0.1%黄芪多糖）、试验3组（0.15%黄芪多糖）断奶仔猪1～14d平均日增重（ADG）和平均日采食量（ADFI）显著提高（P <0.05）;与对照组（0%黄芪多糖）相比,试验2组（0.1%黄芪多糖）断奶仔猪腹泻率（DR）显著减低（P <0.05）。（2）与对照组（...